草菇半纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇（Volvariella volvacea)，对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现，半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导，半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外，木糖糖苷酶分布在胞内，阿拉伯糖苷酶胞内胞外都有分布，木聚糖酶的最适反应温度为60℃，最适反应Ph为5.8，在PH5.4-7.0时比较稳定，保温1h酶活的半衰温度是55℃，木糖糖苷酶的最适反应温度为55℃，最适反应PH为6.6，在PH6.6-7.4时比较稳定，保温1h酶活的半衰温度是52℃，阿拉伯糖苷酶的最适反应温度为60℃，最适反应PH为5.0，在PH4.6-6.2时比较稳定，保温1h酶活的半衰温度为60℃。     

草菇木聚糖酶的纯化提取和酶学性质

草菇产胞外木聚糖酶通过各级浓缩和纯化,获得接近电泳纯蛋白.通过SDS PAGE测得相对分子质量为24500.木聚糖酶为糖基化修饰的蛋白,含有质量分数20.24%的糖.O 糖基化能增加木聚糖酶的活性,O 和N 糖基化都能提高木聚糖酶的稳定性.5min反应,草菇木聚糖酶在60℃和pH值5.65时活性最高.在此条件下,该酶的Km值为3.87mg/mL,Vmax为1250IU/mg.纯酶的稳定pH值为6.54,57℃时半衰期为1h.     

草菇木聚糖酶SDS-PAGE后的复性及活性染色

草菇木聚糖酶经SDS-PAGE后在胶中能够原位复性。通过银染和刚果红活性染色比较．可确定该酶在胶中的位置．草菇木聚糖酶是单亚基蛋白，相对分子质量为24500．     

以玉米芯木聚糖为碳源的草菇木聚糖酶的发酵条件

在玉米芯木聚糖的碱法提取中,玉米芯木聚糖在80℃抽提120min的抽提率较高,还原糖质量分数较低,同时,抽提液的颜色较浅,明显优于121℃抽提30min.以80℃抽提的木聚糖为诱导,草菇产生的木聚糖酶的酶活比121℃抽提的木聚糖的酶活高.以80℃抽提的木聚糖为碳源,通过正交试验,设计出适合草菇生长和产生木聚糖酶的发酵条件.培养基组成为:木聚糖15g/L,(NH4)2SO42.5g/L,Tween 803g/L,酵母膏1g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O0.6g/L,微量元素0.0005g/L.pH7.0,40℃下150r/min培养4d,此时酶活达32.4IU/mL.     

酯化红曲的筛选和酯化酶酶学性质研究

从洋河大曲中筛选到l株具有较高酯化活力的红曲霉,经26S RNA分子鉴定为紫红曲霉(Monascus purpureus),命名为YHM-6.YHM-6菌株能分别耐受8‰的乳酸和10 ％vol的酒精.以YHM-6为出发菌株,生产得到酯化红曲粗酶制剂催化己酸合成己酸乙酯具有很强的专一性和选择性.结果表明,其最适催化温度为35℃,最适催化pH值为3.5,最适催化酒精浓度为28 ％vol,最适己酸浓度为1％,其适合于浓香型白酒和黄水酯化液的生产.     

产酯酵母的筛选及其发酵特性研究

从大曲中筛选到8株产酯酵母,选酶活最高菌株进行26S rDNA鉴定,确定其为异常毕赤酵母.试验结果表明,该酵母麸曲的酯化力可达到19.36 mg/100 mL.该菌株麸曲最佳培养时间为6d;液体培养最高耐受温度为43℃;最低耐受pH值为3.5;最高耐受酒精度为18 ％vol;最适生长温度为27℃;利用葡萄糖产酒精能力较低.     

中高温大曲中的挥发性成分分析

采用索氏提取法对浓香型中高温大曲中的挥发性成分进行提取,并应用气质联用技术对提取物进行定性分析研究.结果表明,从大曲中共检测出主要成分39种,其中含氮化合物8种、醇类化合物7种、有机酸类化合物10种、酚类化合物4种、酯类化合物2种、含氧杂环类化合物3种、烷烃类化合物2种、芳香族化合物1种、酮类化合物2种.其中,四甲基吡嗪、愈创木酚、4-乙烯基愈创木酚和苯乙醇对大曲的香气有重要贡献.     

草菇半纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇 (Volvariellavolvacea) ,对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现 ,半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导 .半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外 ,木糖糖苷酶分布在胞内 ,阿拉伯糖苷酶胞内胞外都有分布 .木聚糖酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应 pH为 5 .8,在pH 5 .4～ 7.0时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 5℃ .木糖糖苷酶的最适反应温度为 5 5℃ ,最适反应 pH为 6 .6 ,在 pH 6 .6～ 7.4时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 2℃ .阿拉伯糖苷酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应pH为 5 .0 ,在 pH 4 .6～ 6 .2时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度为 6 0℃ .     

草菇木聚糖酶的纯化提取和酶学性质

草菇产胞外木聚糖酶通过各级浓缩和纯化，获得接近电泳纯蛋白．通过SDS—PAGE测得相对分子质量为24500．木聚糖酶为糖基化修饰的蛋白，含有质量分数20．24％的糖．O-糖基化能增加木聚糖酶的活性，O-和N-糖基化都能提高木聚糖酶的稳定性．5min反应，草菇木聚糖酶在60℃和pH值5.65时活性最高．在此条件下，该酶的Km值为3．87mg／mL，Vmax为1250IU／mg．纯酶的稳定pH值为6．54，57℃时半衰期为1h。