天蚕素抗菌肽发酵培养基优化

选用抗茵肽生产菌KJ02为出发菌,对其发酵培养基进行了研究并使用正交设计优化了发酵培养基。优化后的培养基：葡萄糖3％,蛋白胨l％,酵母膏2％,NaC10．5％。同时在500L中式水平上对该培养基的效果进行了试验,发酵液杀菌效价为13651IU／mL。     

一株产抗菌肽芽孢杆菌的鉴定及发酵培养基的优化

对一株产抗菌肽菌株GWM 2.1043进行菌落形态特征观察、生理生化分析及16SrDNA序列比对与系统进化分析等鉴定,确定其种属分类地位,并使用正交设计优化其发酵培养基。结果表明,菌株GWM 2.1043与已知枯草芽孢杆菌形成一个类群,同源性高达99.6%,故将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),通过正交设计优化后的培养基为:葡萄糖2%,牛肉浸膏1.5%,酵母粉0.5%,NaCl 0.5%,在此最优条件下,该菌种发酵液杀菌效价为12268IU/mL,比优化前提高了60.2%。     

菌丝霉素在酪丁酸梭菌中的表达研究

目的:构建菌丝霉素(Plectasin,Pt)的真核重组表达菌株,研究其在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的表达和抑菌活性,提供一种高效,天然具有抑菌功能的新型食品添加剂和畜类养殖的抗菌制品。方法:先将启动子thl克隆到载体pMTL82151上,得到表达型质粒pMTL82151-thl,然后根据酪丁酸梭菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后的Pt基因,再将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,构建表达质粒pMTL82151-Pt,并接合转化入酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum),通过甲砜霉素抗性筛选阳性重组子,PCR鉴定,SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得菌丝霉素组成型表达菌株,并进行工程菌酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)pMTL82151-Pt发酵表达研究。结果:thl基因与质粒pMTL82151连接,得到表达型质粒pMTL82151-thl,将产菌丝霉素基因Pt克隆到启动子thl的下游,成功构建表达质粒pMTL82151-Pt。实现了Pt基因在酪丁酸梭菌(Clostridium tyrobutyricum)中的组成型表达,SDS-PAGE分析显示,在4.4 kDa处有明显的目的条带。工程菌经发酵表达培养后取上清,对金黄色葡萄球菌ATCC25923的半抑制浓度(half-inhibitory concentration IC₅₀)为12.74 μg/mL。结论:本研究中成功将菌丝霉素在酪丁酸梭菌中表达,为以后大批量生产和推广菌丝霉素作为食品添加剂和肉食类畜牧养殖中抗生素替代品奠定了基础。     

纳豆芽孢杆菌液体发酵条件的优化研究

采用单因素试验和正交实验对筛选出的1株纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)的液体发酵培养基和发酵工艺条件进行了优化.确定了最佳的培养基配方为蔗糖2%、大豆蛋白胨1%、硫酸铵0.5%、Na2HPO40.1%、NaH2PO40.1%、CaCl20.02%、MgSO40.1%;最适发酵条件为发酵温度37℃,初始pH值7.0,最适接种量4%、装液量100mL/500mL、转速200 r/min.进行了50 L发酵罐放大培养,10h达到生长高峰期,最适放罐时间为12h左右,此时所获得的菌体数量约为6.0×1010cfu/mL.     

一株抗白色念珠菌的海洋真菌分离鉴定

从广东湛江海域采集到的海泥中分离真菌并通过抗白色念珠菌活性筛选获得强活性菌株GW08072。通过培养特征、形态特征、显微结构分析及ITS rDNA序列比对等方法对菌株GW08072进行分析鉴定,筛选分离到89株真菌,经复筛重复实验得到抗白色念珠菌活性的菌株6株,经复筛得到的GW08072具有较强的抗白色念珠菌活性,经过遗传稳定性跟踪研究发现该菌抗性能够稳定遗传,经鉴定为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。     

空气过滤器对5种苯系物的过滤效率评价方法研究

本文建立空气过滤器对室内苯系物过滤效率的评价方法。通过结合负压式风道系统及热解吸气相色谱法同时测定空气过滤器对多种苯系物过滤效率,改善了使用二硫化碳(CS_2)脱附方法的操作,测试过程中,在空气过滤器的上游和下游同时用活性炭管采集,经全自动热解吸仪解吸后,经过气相色谱中TVOC专用色谱柱分离,氢火焰离子化检测器检测。根据空气过滤器上游和下游的苯系物的浓度值,结合风道系统中苯系物的相关系数,计算出空气过滤器对苯系物的过滤效率。根据所建立的评价方法,具有良好的稳定性,能够准确反映空气过滤器对苯系物的过滤效率,可以为空气净化器及通风系统装置等设备选用对应的空气过滤器提供了方法依据。     

湿巾污染菌的分离鉴定

湿巾是日常生活中必不可少的易耗品,但市场上湿巾的微生物指标却令人担忧。本文从湿巾中分离出一种污染菌,利用形态学、生理生化试验、16SrDNA测序得出此种菌种为洋葱伯克尔德氏菌(Burkholderia cepacia。)     

基于高通量测序技术的蓝莓果实中细菌和真菌菌群多样性分析研究

目的 分析蓝莓中细菌和真菌菌群的组成及其多样性,探究不同蓝莓样品中微生物的暴露水平。方法 构建了蓝莓中微生物菌群的基因组文库,利用高通量测序技术分析了5种蓝莓中细菌和真菌菌群的组成及其多样性,借助微生物属水平和种水平分析比较了蓝莓中细菌和真菌菌群组成和丰度信息。结果 5种蓝莓中微生物菌群的多样性较高,但其细菌和真菌菌群组成仍存在共有特征,细菌和真菌中共有的操作分类单元数量分别为76和42。蓝莓中优势细菌主要归属于放线菌门、拟杆菌门、蓝藻菌门、厚壁菌门和变形菌门,优势真菌主要归属于子囊菌门、担子菌门和被孢霉门。结论 不同蓝莓样品中微生物菌群的组成变化较大,真菌菌群的多样性比细菌更丰富,这对蓝莓的腐烂变质、贮藏保鲜和生物防控研究具有重要意义。     

流动注射法与传统分光法检测饮用水中挥发酚的比较及其不确定度评定

本研究分别采用FIA法和传统分光光度法测定水中不同浓度含量挥发酚并进行了多组基体加标实验，结果表明对于不同浓度水平及不同基体加标样品的测定，2种方法的精密度和准确度均符合标准相关要求，对检测结果进行配对t检验，两种方法测定结果无显著差异，但流动注射法相比传统分光光度法有更高的精密度和更宽的线性范围，且检测方法更简便、快捷，安全性和自动化程度更高，更利于第三方检测机构大批量高效测定样品。为更科学、合理的表示FIA法检测水中挥发酚含量的测定结果，对FIA法检测挥发酚过程中的不确定度来源进行了分析，得出测量结果的扩展不确定度，结果表明除去标准溶液，样品重复性测定引入的不确定度最大；当水中挥发酚含量为9.1 ug/L时，其扩展不确定度为0.3 ug/L(k=2)。