成都市冷藏即食预包装熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌定量检测及污染风险研究

目的 为探明了解冷藏即食预包装熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌（单增李斯特菌）污染情况及潜在风险,本研究针对短保质期的冷藏即食预包装熟肉制品开展单增李斯特菌定量污染风险调查。方法 2022年5~8月,从成都市采集样品64份,依据采用传统培养分离鉴定和RT-PCR分子检测方法进行单增李斯特菌的定性和定量检测,分离菌株提取DNA后进行二代全基因组测序并开展相关流行病学特征分析。结果 检测结果发现64份即食熟肉样品中,6份样品检出单增李斯特菌,检出份数为6/64。6份阳性样品均由某同一工厂生产,其中5份为卤肉三拼样品。定量检测结果表明,卤肉三拼的单增李斯特菌污染水平为30~200 CFU/g;单增李斯特菌阳性的猪肉样品污染水平为<10 CFU/g。阳性样品中的6株分离菌株经全基因组测序分析鉴定为单增李斯特菌,均含有LIPI-1毒力岛相关基因,多序列位点分型发现主要的序列型（ST）为ST3（n=2）和ST121（n=2）,其次是ST8和ST9。单核苷酸多态性（SNP）结果分析发现同一工厂分离到的单增李斯特菌菌株LM22071911和LM22080802之间检测到23个SNP差异,单增李斯特菌株LM22062706和LM22080806之间检测到13个SNP差异,说明在该工厂加工环节存在两种克隆群的单增李斯特菌直接传播的风险。结论 成都市部分市售冷藏即食预包装熟肉制品污染多种李斯特菌,需加强源头控制。     

矿泉水中铜绿假单胞菌检测能力的验证与分析

通过参加外单位组织的矿泉水中铜绿假单胞菌检测能力验证,探索减少过滤后菌落数的计数方式和范围,提高实验室应用GB 8538—2022进行检测的能力,同时验证MALDI-TOF MS的准确性。依据组织方的作业指导书对样品进行处理,采取25 mL+225 mL的方式进行稀释,根据GB 8538—2022进行检测,同时应用MALDI-TOF MS进行鉴定。样品23-V717、23-H802报告结果的评价Z值分别为-0.1、-0.9,皆为满意。此方式提高了实验员检测水平,验证了借助基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS）鉴定的准确性,缩短了检验检测时间。     

正电性金纳米-核酸适配体纳米生物传感器快速检测野生菌中的α-鹅膏毒肽

目的 构建一种基于正电性金纳米-核酸适配体的纳米生物传感器,以实现野生菌中α-鹅膏毒肽(α-amanitin, α-AMA)的快速检测。方法 选择可与α-AMA特异性结合的核酸适配体作为识别元件,以半胱氨酸(cysteamine, Cys)修饰的正电性纳米金(gold nanoparticles, AuNPs)作为信号探针。基于静电吸附作用,将适配体固载到Cys@AuNPs表面。测定溶液在特定波长处吸光度值的变化,实现α-AMA的快速检测。结果 该纳米生物传感器检测α-AMA的最佳条件:Cys@AuNPs体积为150μL,适配体浓度为6 nmol/L, Cys@AuNPs与适配体反应时间为10min, α-AMA与适配体结合时间为10 min。在最佳条件下检测α-AMA的线性范围为1～125 ng/mL(r²=0.995)。本体系中α-AMA的检出限为0.87 ng/mL,加标回收率为98.6%～120.0%。结论 该纳米生物传感器操作简便、灵敏度高、特异性好、成本低廉,适用于野生菌样品中α-AMA的快速检测。