不同细胞对乙型脑炎病毒蚀斑减少中和试验的影响

目的分别使用不同细胞测定乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)滴度及乙型脑炎灭活疫苗效价,分析不同细胞对检测结果的影响。方法将JEV P3株接种至长满单层的MDBK、Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的6孔板,采用蚀斑试验测定JEV的PFU;将乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)免疫小鼠,取静脉血,分离血清,经56℃灭能30 min后,与JEV P3株混合,接种至长满单层的Vero、BHK-21、LLC-MK2细胞的6孔板,采用蚀斑减少中和试验检测乙型脑炎灭活疫苗的效价。结果 JEV在4种细胞上均可产生细胞病变(cytopathic effect,CPE),但在MDBK细胞上不形成蚀斑,病毒感染的Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的收获液病毒滴度分别为10.02、9.42和9.21 lg PFU/ml;3种细胞测定乙型脑炎灭活疫苗效价T值VeroLLC-MK2BHK-21,其中Vero细胞与BHK-21和LLC-MK2细胞比较,蚀斑减少率及对应T值差异有统计学意义(P0.05),LLC-MK2与BHK-21细胞比较,蚀斑减少率及对应T值差异无统计学意义(P0.05)。结论 4种细胞感染JEV后均可产生CPE,但MDBK细胞不能形成蚀斑;不同细胞测定疫苗效价,蚀斑减少率及对应T值也不同,其中Vero细胞测定T值最大,BHK-21细胞测定T值最小。     

苯乙烯吡唑类化合物的合成及体外抗增殖活性

以3,4-二甲氧基苯甲醛为原料,经羟醛缩合、环合、烷基化、亲核取代等反应合成5个未见文献报道的苯乙烯吡唑类化合物,结构均经核磁共振氢谱和质谱确证,以MTT法考察目标化合物对4种肿瘤细胞的增殖抑制作用。其中化合物5b~5e对肿瘤细胞HT29的增殖抑制作用强于先导化合物姜黄素。化合物5a和5d抑制A375细胞增殖的IC_(50)值与姜黄素相当。     

增强ESAT6-CFP10融合蛋白诱导小鼠细胞免疫应答佐剂的筛选

目的筛选能增强特异性抗原早期分泌抗原靶6蛋白(Early secretory antigenic target 6,ESAT6)-培养滤出液蛋白-10(Culture filtrate protein 10,CFP-10)融合蛋白(E1C0)诱导小鼠细胞免疫应答的佐剂,建立基于细胞免疫应答的小鼠模型,以评价基于体外干扰素γ释放分析(IFNγrelease assay,IGRA)结核诊断方法中特异性刺激抗原E1C0的活性。方法建立小鼠IFNγ双抗体夹心SABC-ELISA检测系统,并验证系统的线性、灵敏度、重复性和特异性。将BALB/c小鼠随机分为7组:E1C0+单磷酸类脂A(Monophosphoryl lipid A,MPL)+双十八烷基二甲基溴化铵(Dimethyl dioctadecylammonium bromide,DDA)组、E1C0+DDA组、E1C0+MPL组、E1C0+弗氏不完全佐剂(IFA)组、E1C0组、生理盐水组和MPL+DDA联合组,每组6只,经小鼠后肢内侧皮下免疫3次,间隔2周,免疫剂量为:E1C0 100μg/只,MPL 25μg/只,DDA 250μg/只,IFA 100μl/只。末次免疫4周后处死小鼠,无菌取脾,分离脾淋巴细胞,加入E1C0进行培养,MTT法检测特异性淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测培养上清中IFNγ水平。采用筛选出的最佳佐剂与抗原组合免疫3批BALB/c小鼠,进行IFNγ诱生测定。结果检测系统的线性范围为:40～2 560 pg/ml(R>0.98);灵敏度为40 pg/ml;变异系数(CV)<15%,检测大鼠、豚鼠和兔血清IFNγ均为阴性;E1C0+MPL+DDA组、E1C0+IFA组和E1C0+DDA组小鼠特异性淋巴细胞增殖刺激指数均明显高于生理盐水组(P<0.01);E1C0+MPL+DDA组小鼠的脾淋巴细胞经E1C0体外刺激后,产生的IFNγ水平明显高于其他组(P<0.001);重复试验结果显示,E1C0+MPL+DDA组3批小鼠免疫后,脾淋巴细胞诱生的IFNγ水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 E1C0与MPL和DDA联合免疫所诱导的小鼠Th1型细胞免疫应答最强,成功建立了用于评价刺激抗原E1C0活性的小鼠模型。     

益生菌复合制剂对脾虚证大鼠胃肠及免疫功能的调节作用

采用ELISA法测定比较不同剂量益生菌复合制剂和脾虚证经典方剂四君子汤对番泻叶水煎液诱导的脾虚证大鼠血清胃肠激素和免疫因子水平的影响,考察其对脾虚证大鼠的调节作用。结果表明,益生菌复合制剂和四君子汤均能显著降低脾虚证大鼠血清血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平(p0.05),且均可显著升高白介素-2(Interleukin-2,IL-2)水平(p0.05)。此外,益生菌复合制剂可显著降低脾虚证大鼠血清胆囊收缩素(Cholecystokinin,CCK)、P物质(Substance P,SP)及白介素-4(Interleukin-4,IL-4)水平(p0.05);四君子汤能极显著降低脾虚证大鼠血清胃泌素(Gastrin,GAS)及胃动素(Motilin,MTL)水平(p0.01)。益生菌复合制剂能够调节脾虚证大鼠胃肠激素水平,改善其免疫功能。与传统脾虚证治疗方剂四君子汤相比,益生菌复合制剂与四君子汤所调节的胃肠激素和免疫因子指标不同,提示二者治疗脾虚证的作用机制可能不一。     

片剂中粉体压缩性的研究进展

目的对片剂中的粉体压缩性进行总结,从而指导压片过程。方法通过查阅文献及相关资料对片剂中粉体压缩性进行综述。结果综述了研究粉体压缩机制的3种方法的原理、优点和缺点,通过这些方法可以很好地预测粉体的压缩过程,从而防止黏冲和裂片等问题的发生,保证压片过程的顺利进行,提高片剂质量。结论通过对粉体压缩性进行研究可以指导压片过程。     

地椒水提物对大鼠致畸作用的研究

目的 考察地椒在大鼠体内是否具有明显的母体毒性、胚胎毒性和致畸性, 对其安全性进行毒理学评价。方法 孕鼠随机分为阴性对照组、地椒高剂量组5 g/kg、中剂量组2.5 g/kg、低剂量组1.25 g/kg和阳性对照组(0.3 g/kg阿司匹林), 通过在雌性SD大鼠怀孕后第6~15 d经口给予受试药物, 于妊娠第20 d处死母鼠, 观察记录母鼠体重、子宫连胎重、胎鼠体重、体长等各项生理指标, 并进行胎鼠的外观、内脏、骨骼检查。结果 与阴性对照组比较, 地椒5、2.5及1.25 g/kg各组对SD孕鼠母体各项指标影响无明显差异(P>0.05), 对胎鼠各项观察指标无明显差异(P>0.05)。结论 在本实验条件下, 中药地椒对SD大鼠无母体毒性、胚胎毒性和致畸毒性。     

关于加强高校二级党校建设模式初探

二级党校是学校党校的重要组成部分,是学校党建工作的重要组成部分和基础性工作,当前,高校学生党员教育普遍存在"中发展,轻教育"的现象。学院党组织作为考察和培养党员最直接的单位,具有对学生党员的进行培养及继续教育的责任。本文通过沈阳药科大学生命科学与生物制药学院关于二级党校建设体系的分析,从而探讨学校二级党校办学的教育体系理论框架。     

生物制品在眼用制剂中的作用机制及临床应用

生物制品是指应用生物技术，以细胞、微生物、动物或人的组织或体液为原料制成的用于预防、诊断、治疗的药品，其在市场上以及临床治疗上所占比例均在不断上升。本文对眼科疾病中常用生物制品在眼用制剂中的应用[如重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rbFGF)、小牛血去蛋白提取物等在角膜损伤或角膜炎中的作用]，以及不同生物制品之间联合应用的相关性(如羟糖苷与生长因子类药物联用效果等)作一综述。通过现有药物应用的启发，为生物制品在该领域的发展提供新的方向。