PCR法检测肉制品中鹅源性成分

目的 建立一种PCR法检测肉制品中鹅源性成分的方法。方法 根据鹅的线粒体DNA(mtDNA)序列设计引物, 以9种动物的DNA为模板, 利用新设计的鹅的特异性引物进行PCR反应, 并用琼脂糖凝胶电泳检测引物的特异性和敏感性。结果 通过PCR反应, 仅鹅的DNA扩增得到了194 bp的目的片段, 其余物种DNA和空白对照均无目的片段。扩增产物的核苷酸序列与GENBANK中检索到的相应序列基本相符合。 结论 该方法特异性强、灵敏度高, 适合检测肉制品中的鹅源性成分。     

肉制品中牛源性成分多重实时荧光PCR检测 方法的建立及初步应用

目的建立肉制品中牛源性成分的荧光PCR检测方法。方法根据牛特异性线粒体DNA片段,设计合成两对引物,以生、熟牛肉及超市牛肉加工品为材料,建立肉制品中牛源性成分的多重实时荧光PCR检测方法,并用该法与国标法同时对市售的25份肉制品同时进行检测,通过对其他种类的肉源DNA进行扩增验证方法的特异性;对含有不同比例牛肉成分的DNA样本进行检测确定检出限。结果该方法可成功检测出肉制品中的牛源性成分。在25份肉制品检测中,与国标法检测结果一致。该法的特异性为100%,灵敏度检测线为1%。结论本研究成功建立牛源性肉制品的检测方法,该方法快速简便,且具有较高的特异性和灵敏度,可用于市售肉制品中牛源性成分的鉴定。     

三聚氰胺偶联抗原制备及其免疫原性分析

探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗原特性分析,证明半抗原Mel-ACS的转化效率达到了85.9%,且针对Mel特异性单抗获得率达到了42.9%,抗原BSA-ACS-Mel免疫原性较好,完全可以适用于三聚氰胺分子的特异性检测需要。这对其余小分子抗原的合成也起到一定的指导作用。     

中药材二氧化硫快速定量检测系统的研发及验证

目的 建立一种针对中药材二氧化硫残留特异性强的定量快速检测系统。方法 利用醋酸铅检测微量硫化氢的高敏感性,以硫化铅黑色沉淀的灰度响应值为定量依据,设计醋酸铅检测卡,设计可控制反应条件使硫化铅灰度可线性地反映二氧化硫含量的检测反应器,研发与检测卡配套的可准确检测灰度值的定量检测仪。制备标准灰度卡、绘制检测灰度值与标准溶液浓度关系曲线、考察定量检测系统的精密度、加样回收率、时间稳定性,同时做干扰实验及用本系统与国标方法对同一批次中药材的二氧化硫残留量进行检测比较,评价检测体系的定量检测效果。结果 本检测系统试纸条的灰度值与标准溶液的浓度线性关系良好(R_²=0.99),线性检测范围在0 mg/kg到805 mg/kg之间;对高中低浓度的二氧化硫残留样品多次检测值的相对标准偏差均小于5%,加样回收率达到85%以上,精确性良好;常见的含硫化合物对其没有干扰,系统与2015版药典第三法(离子色谱法)对同一批次的中药材二氧化硫检测结果一致。结论 该检测系统准确性好,稳定可靠,特异性强,操作简便,可用于中药材二氧化硫残留的快速定量检测。