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Based on a crosslinked chitosan (CS)/polyvinyl alcohol (PVA) matrix membrane, an immobilized metal ion affinity membrane (IMAM) using Cu2+ and Ni2+ ions as affinity ligands was prepared for purification of the His-tagged recombinant protein. The affinity membrane possessed a favorable membrane structure including 1.39 μm average pore size and 0.33 mL·cm−2·s−1 water flux under 0.08 MPa pressure at 25 °C. The Cu2+ and Ni2+ ions capacities immobilized on the IMAM were 155.6 and 137.3 μmol·disk−1, respectively. The IMAM had an excellent specific affinity to His-tagged protein. About 10-fold purification factor for the model protein was obtained in a batch adsorption, and serine hydroxymethyl transferase could be purified to a single band in sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis analysis from its crude extract solution with an affinity membrane cartridge by a dynamic purification process. This work provides a promising IMAM for the purification of His-tagged recombinant proteins. © 2018 Wiley Periodicals, Inc. J. Appl. Polym. Sci. 2019 , 136, 47347. 相似文献
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A method of isotope dilution inductively coupled plasma mass spectrometry for the determination of selenium in IMEP-17 serum samples is established. The serum selenium was prepared by using microwave digestion andsulphydryl cotton separation. This method of sample preparation can efficiently eleminate matrix interference. The results obtained agree well with the certified values. 相似文献
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脂溶性维生素是维持身体健康所必需的一类有机化合物,对人体生长发育、新陈代谢有极其重要的作用,如果长期缺乏或过量某种脂溶性维生素,就会引起生理机能障碍或某种疾病。脂溶性维生素品种丰富、结构类似;稳定性差,在光、氧、酸、碱等条件下易降解;不同类型脂溶性维生素极性不同、且在食品基质中含量差异大,因此多目标物高效前处理、有效分离、降低基体干扰等关键技术是脂溶性维生素准确定量面临的挑战。本文综述了液液萃取、固相萃取等传统及新型QuEChERS萃取、超临界流体萃取等提取与净化技术在乳制品及婴幼儿配方奶粉中脂溶性维生素的分析应用,分析了液相色谱、液相色谱串联质谱、超临界流体色谱以及酶联免疫等检测技术的特点,并展望了其发展趋势。 相似文献
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The method of isotope dilution multi-collector ICP-MS with hexapole collision cell was developed for determining Fe, Cu, and Zn in soybean powder through the studies of measuring parameters of the instrument and sample preparation. Furthermore, this method was used to determine Fe, Cu, and Zn in soybean for the comparison among national metrology institutes, and got excellent results. In addition, measurement results by means of IDMS are compared with those by other methods in this paper. 相似文献
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目的 研究确定最佳的锶同位素分析技术,分析不同产区葡萄酒中锶同位素组成,通过统计手段,直观展示锶同位素用于葡萄酒产地鉴别的可靠性。方法 本文首先通过葡萄酒中锶同位素国际比对CCQM P105比较、确认多接收电感耦合等离子体质谱法(Multi-collector Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, MC-ICP-MS)和热电离同位素质谱法(Thermal Ionization Mass Spectrometry, TIMS)的准确性,确定采用TIMS分析79种葡萄酒中锶同位素数据,以K-平均值算法进行统计分析,展示大产区、小产区的δ(_^87)Sr。结果1)TIMS是最佳的葡萄酒中锶同位素分析方法:(1)87Rb信号残留比为1/1000时,影响锶同位素测量的准确性。采用TIMS,在1000℃下加热10min,Rb的干扰可以完全消除;(2)采用86Sr/88Sr = (0.1194 ± 0)内标法校正质量歧视,对测量结果有影响,外标法获得的结果最准确;2)各产区葡萄酒中锶同位素组成具有明显的地域特征:新疆产区δ(_^87)Sr偏负,甘肃、宁夏产区具有正的δ(_^87)Sr;3)锶同位素鉴别葡萄酒产地的总体正确率达到91%以上,石河子、巴州、焉耆、五家渠、哈密等5个新疆域内小产区的判别正确率达到100%。结论 TIMS可以通过测量程序进一步消除残留87Rb的干扰,对样品分离要求低,所测结果的准确性更可靠;统计分析表明,锶同位素技术具有良好的葡萄酒产地鉴别能力,而且具有较好的地理分辨力,是食品产地追溯的有效手段。但部分地区葡萄酒的鉴别效果不佳,也说明单一的鉴别技术具有局限性,大数据基础上的多维分析技术是食品真实性鉴别领域的发展方向。 相似文献
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该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率>10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到103 CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。 相似文献
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目的建立双氰胺的纯度定值方法来研制双氰胺纯度标准物质(certified reference material,CRM),并考察其均匀性、稳定性和不确定度。方法采用基于高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)的质量平衡法和差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)2种方法对双氰胺的纯度进行定值。水分、无机杂质和挥发性溶剂分别采用卡尔费休滴定法(Karl Fischer,KF)、电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)和顶空气相色谱-质谱法(headspace gas chromatography mass spectrometry,HSGC-MS)测量。根据《标准物质定值的通用原则及统计学原理》(JJF 1343-2012)的要求,采用高效液相色谱法进行均匀性和稳定性的检验。不确定度评定综合考虑均匀性、稳定性、定值过程引入的不确定度。结果均匀性和稳定性检测结果表明:均匀性良好,在规定的保存条件下可以稳定保存36个月以上。研制的双氰胺标准物质的纯度为99.8%,扩展不确定度0.3%(k=2)。结论本研究研制双氰胺标准物质的量值具有溯源性和准确性。 相似文献
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