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1.
2.
目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparinsepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异。结果最佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5molL,精氨酸浓度大于0.3molL,GSH∶GSSG=4∶1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低。IMAC和Heparinsepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparinsepharose纯化效率较高。结论确定了重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的最佳条件及复性后蛋白纯化的方法。 相似文献
3.
弹复性是系统在失效或被破坏之后能够恢复正常工作的能力.弹复性工程是当今国际上研究的热点.本文提出了基于节点对间的独立路径可靠度和交通网络的弹复度的定量测算方法,提出了反映节点和路段对交通网络影响大小的易碎性的概念和测算方法.论文还就弹复度和易碎度的几个相关性质提出了几个重要定理.针对我国的铁路网络,计算了所有节点城市和路段的弹复度和易碎度,并对弹复度和易碎度高的节点的分布规律进行了探讨,得出了一些有益的结论. 相似文献
4.
5.
重组蛇毒纤溶酶Fibrolase的复性 总被引:1,自引:0,他引:1
将Fibrolase基因克隆入表达载体pET25b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的40%左右. 比较了直接稀释法、流加稀释法和透析法的复性效率,同时研究了温度、pH 值、初始蛋白浓度、复性液中盐酸胍浓度和氧化/还原环境等对复性的影响, 得到了较为适宜的复性条件. 结果表明,采用流加稀释复性,并在4℃, pH 8.5, 1.5 mol/L盐酸胍, 1 mmo1/L GSSG, 2 mmo1/L GSH, 初始蛋白浓度10 mg/mL及稀释体积为50倍时,复性效率最高. 重组Fibrolase蛋白在复性和纯化后的收率可达25%左右. 相似文献
6.
金线鱼肝胰脏蛋白酶激活提取条件的优化 总被引:2,自引:1,他引:1
用响应面法对金线鱼肝胰脏蛋白酶的激活及提取条件进行了优化。比较了不同激活剂的激活效果。研究了提取时间和pH值交互作用对蛋白酶活力的影响。结果表明:肠提液与CaCl2协同作为激活剂的激活效果最好。优化后激活时间为6 h,激活温度为27℃,肠提液质量分数为7%,CaCl2浓度为5.20 mmol/L,酶活力为1578.14 U/(g.min)。肝胰脏蛋白酶最佳提取条件为:提取时间8.5 h,提取温度11℃,pH 5.4,酶活力为1431 U/(g.min)。蛋白酶复性电泳结果说明酶活力增加显著。 相似文献
7.
《计算机集成制造系统》2014,(8)
为了使第四方物流系统能够在动态环境下安全、有效地运作,研究了第四方物流多周期弹性网络设计问题。建立了第四方物流多周期网络设计问题的优化模型,在各个周期满足一定的弹复性水平条件下的最小化网络总成本。根据模型的特点,设计了一种带邻域搜索的全局最好和声搜索算法。通过随机生成的算例对算法性能进行测试,结果证明了模型的合理性和算法的有效性。 相似文献
8.
<正> 本论文研究了KCNS、NH_4CNS、硫脲、尿素(脲)等助剂对照相明胶复性的影响。通过Bloom强度仪测试这四种助剂对明胶凝胶冻力的影响,发现随KCNS等助剂加入量的增大,冻力呈单调的线性下 相似文献
9.
10.
本文采用压缩空气吹展DNA的制样方法,使得DNA链在云母表面大致向着同一方向充分舒展,为DNA线度的AFM测量打下了基础,对λDNA HindⅢ依次进行了酸变性、复性DNaseⅠ降解处理,并分离一种抗内切酶降解的组分。AFM研究表明该绷 分可能是一种新的多链DNA。 相似文献