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《中国生物制品学杂志》2015,(11)
目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒。结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒。结论成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础。 相似文献
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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量. 相似文献
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1月11日,长春市肉类协会召开第一次会员暨成立大会。该协会组建的宗旨是:组织全市肉类行业,认真贯彻国家关于畜禽屠宰、加工、流通有关法律、法规;积极发挥政府与企业之间的桥梁纽带作用;维护企业合法权益;大力促进行业发展,为市场提供放心肉类食品。该协会组建后,将在政府指导下,紧紧围绕其宗旨,从深入调研,当好桥梁,强化服务,及时协调,充分维权,严格自律等六个方面来发挥好作用。长春市商务局领导在长春市肉类协会成立大会上要求,协会要遵循市场经济规律,着眼于大市场、大流通、大发展,卓有成效的为肉类行业服好务,成为深受行业欢迎、大有… 相似文献
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2月28日上午,吉林省扶余县政府、江苏雨润食品产业集团5000万只禽类加工项目签约仪式在扶余县举行。这是江苏雨润集团继去年百万头生猪屠宰项目落地后,在扶余投资的又一个超亿元大项目。 相似文献
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