柱前衍生反相高效液相色谱法测定柞蚕蛹蜕中氨基酸

建立一种反相高效液相色谱同时测定柞蚕蛹蜕中17 种氨基酸的分析方法。以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯(PITC)作为Venusil-AA 氨基酸分析专用柱柱前衍生试剂,采用二元梯度洗脱,波长254nm 处检测柞蚕蛹蜕中氨基酸含量。17 种氨基酸在0.5～0.0125μmol 的范围内,具有良好的线性关系,加样回收率在96.2%～101.9%。柞蚕蛹蜕中氨基酸含量为21.9%,其中精氨酸含量最高。人体必需氨基酸占总氨基酸的33.62%。柱前衍生反相高效液相色谱法简单、高效,可以用于柞蚕蛹蜕氨基酸含量测定。     

苯基异硫腈钴（I）配合物的合成与结构及性质

本文报导了三－三苯基膦氧化钴（Ｉ）与过量的异硫氰酸苯酯反应，依据快原子轰击质谱（ＦＡＢ－ＭＳ），证实生成物的结构为四员钴杂环配合物。该配合物不稳定，容易脱硫，生成苯基异腈钴（Ⅱ）配合物。     

柱前衍生-HPLC法测定五指毛桃中16种游离氨基酸含量

目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法同时测定不同产地、不同叶形五指毛桃Ficus hirta Vahl根中16种氨基酸含量,评价其质量差异。方法:采用高效液相色谱法,以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,采用Ultimate Amino Acid色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以0.1 mol/L乙酸钠-乙腈为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温为40 ℃,检测波长为254 nm。结果:9个产地12份五指毛桃根中16种氨基酸线性关系良好,相关系数均大于0.9992,平均加样回收率介于98.1%~105.9%之间,RSD为0.67%~2.11%,L-天门冬氨酸、L-谷氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-组氨酸、L-精氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、L-甲硫氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-苯丙氨酸和L-赖氨酸的平均含量分别为3.308、3.424、2.750、2.978、1.302、4.549、2.778、3.989、3.818、1.327、3.732、0.395、2.925、4.549、2.873、3.305 mg/g。产地为漳州卫生职业学院的四种叶形五指毛桃根中氨基酸总含量由高到低为,三指浅裂>七指深裂>五指深裂>全缘;其余8个产地的五指毛桃根中16种氨基酸总含量也存在差异,含量最高的为广西钦州灵山县,其次为广东河源源城区源南镇,含量最低的为福建漳州龙海区程溪镇。结论:该方法能使16种氨基酸很好地进行分离,可靠准确,且加样回收率较高,可作为五指毛桃根中氨基酸含量的测定方法,并可以用氨基酸含量来评价五指毛桃质量。     

缩氨基硫脲类受体的合成和表征

采用对甲基苯胺和高锰酸钾氧化生成对氨基苯甲酸,后者用磷酸三甲酯N甲基化,生成对二甲氨基苯甲酸,其经酯化、肼解得到对二甲氨基苯甲酰肼（A）。A与异硫氰酸对硝基苯酯反应,制得N-对二甲氨苯甲酰胺基-N’-对硝基苯基硫脲,收率76％;同理,对硝基苯肼与异硫氰酸对甲苯酯反应,得到N-对硝基苯胺基-N’-对甲苯基硫脲,收率41％。通过元素分析,IR,1HNMR对化合物的结构进行了表征。     

柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸的含量

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、牛磺酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸)的分析方法.采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测饮料中16种氨基酸的含量.使用DiamonsilTMCl8色谱柱(250 min×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 moL/L乙酸钠,B为乙腈;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温40 ℃;进样量20"L.在各氨基酸的线性范围内,16种氨基酸的线性相关系数r在0.9996～0.9999,平均回收率为96.0%～104.0%.日内精密度RSD为0.51%～1.87%,日间精密度RSD为0.52%～1.89%.结果表明本方法专属性强.操作方便,灵敏度高,可用于饮料中氨基酸的含量检测.     

高效液相色谱法检测食品中17种游离氨基酸

目的使用异硫氰酸苯酯衍生-高效液相色谱法对食品中17种游离氨基酸进行检测。方法对17种游离氨基酸及其苯胺硫甲酰基衍生物稳定性的分析,研究游离氨基酸的最佳衍生条件。同时,对盐沉淀法和C_(18)固相萃取(solid phase extraction, SPE)小柱法2种样品除杂方法的加标回收率进行测定。结果胱氨酸加热干燥5h后,回收率为68.46%±4.01%,热稳定性差;其它16种氨基酸加热1～5h后回收率均在90%～110%之间,热稳定性较好。胱氨酸的苯胺硫甲酰基衍生物,6h后回收率仅为11.04%±1.65%,稳定性差;其它氨基酸的苯胺硫甲酰基衍生物24 h后回收率均大于90%,比较稳定。另外,前处理中使用C_(18) SPE除杂时,样品中游离氨基酸的加标回收率均大于70%,而使用水杨酸和三氯乙酸除蛋白后苯胺硫甲酰基衍生物降解严重。结论除胱氨酸外,其余16种氨基酸的热稳定性均较好,且生成的苯胺硫甲酰基衍生物比较稳定,可以通过异硫氰酸苯酯衍生进行定量分析。相比于水杨酸和三氯乙酸沉淀法, C_(18) SPE柱是游离氨基酸除杂方法的首选,而无机盐影响异硫氰酸苯酯与氨基酸衍生,因此此方法不适用于含盐样品的衍生。     

不同产地地参中17种氨基酸的测定与分析

以全国6 个产地地参为研究对象,建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生,超高效液相色谱法同时测定地参中17 种氨基酸含量的方法,并对不同产地地参中氨基酸类成分进行分析评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mmX150mm,1.7 μm)分离,流动相为0.1 mol/L乙酸钠-80％乙腈溶液梯度洗脱(冰...     

谢村黄酒酒曲微生物多样性分析及产γ-氨基丁酸能力的初步研究

探究谢村黄酒酒曲微生物多样性,筛选产功能性成分菌株,为谢村黄酒的品质研究提供理论依据。采用分离培养法结合高通量测序技术分析酒曲微生物多样性;通过薄层层析法定性筛选、异硫氰酸苯酯柱前衍生高效液相色谱法定量筛选,得到产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的菌株。结果表明:酒曲中细菌可划分为48个属,优势属为克罗彭斯特菌属(Kroppenstedtia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、乳杆菌属(Lactobacillus)等;真菌可划分为18个属,主要为耐干霉菌属(Xeromyces)、横梗霉属(Lichtheimia)、根毛霉属(Rhizomucor)等。分离培养出细菌及真菌共27株,其中6株具有产GABA的能力,占总菌数22%。其中优势菌芽孢杆菌属菌株N1产GABA的能力最高,产量达0. 78 g/L。研究探明了谢村黄酒酒曲中优势微生物及其产GABA的能力,为通过调控微生物来改善黄酒品质,开发功能性黄酒提供了科学参考。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

复合氨基酸中牛磺酸的高效液相色谱分析

采用国产C1 8反相柱 ,研究了异硫氰酸苯酯 (PITC)柱前衍生高效液相色谱法测定复合氨基酸中牛磺酸的可行性 ,测定了淡水珍珠中牛磺酸的含量 ,结果表明 ,采用甲醇流动相体系 ,在适宜的色谱条件下 ,牛磺酸可获得较好的分离 ,并且在 8～ 4 0 μg/mL浓度范围内与峰面积成良好的线性关系 ,峰面积定量的相对标准偏差为 0 .7% (n =5) ,牛磺酸的PITC衍生物溶液室温存放 3 6h不变质 ,用本法测得淡水珍珠样品中牛磺酸含量为 0 .0 2 %。