赤红球菌组氨酸激酶的融合表达和功能分析

对赤红球菌的组氨酸激酶基因进行密码子优化，将优化后的组氨酸激酶基因（rhks）构建重组表达质粒pGEX-4T-2-rhks。将此质粒导入到大肠杆菌BL21（DE3）中进行异源表达。在25 ℃和1 mmol/L异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导条件下，组氨酸激酶融合蛋白（GST-RHK）获得成功表达，并具有催化活性。经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化，获得电泳纯的GST-RHK，其中纯化倍数为3.1，得率为19.5%。该蛋白大小约为72.75 kDa，Km、Vmax和Kcat值分别为20.92 μmol/L、0.17 μmol/（L·min）和1.4 min－1。野生型赤红球菌、组氨酸激酶基因增强株sdrhkE和组氨酸激酶基因敲减株sdrhkD在分别含有苯酚、甲苯、氯苯、异辛烷4 种有机溶剂的培养基中培养，菌株sdrhkD的生长情况都优于野生型赤红球菌，菌株sdrhkE的生长情况都低于野生型赤红球菌。本研究为进一步揭示赤红球菌SD3中组氨酸激酶涉及的信号转导途径与赤红球菌有机溶剂耐受性的关联机制提供一定参考依据。     

Thermokinetics of Liquid-Liquid Reaction of Dy（NO3 ）3 with Histidine

The thermokinetics of liquid-liquid reaction of dysprosium nitrate with histidine were studied using a microcalorimeter. On the basis of experimental and calculated results, threethermodynamic parameters (the activation enthalpy, the activation entropy and the activation free enegy),the rate constant, three kinetic parameters (the activation energy, the pre-exponential constant and the reaction order) wereobtained. On the basis of thermodynamics and kinetics, the for marion reaction of the complex was discussed.     

组氨酸锌的合成及其作为PVC热稳定剂的研究

以组氨酸与六水合硝酸锌为原料,在碱性条件下合成了组氨酸锌,通过元素分析以及红外光谱分析对合成产物进行了表征。进一步通过刚果红法、变色性能测试测定了其作为聚氯乙烯(PVC)热稳定剂的热稳定性能。结果表明,组氨酸锌可延长PVC的稳定时间,赋予PVC制品较好的初期颜色,而且不会发生"锌烧"。将组氨酸锌与硬脂酸钙混合制成复合热稳定剂,发现二者之间有较好的协同作用。     

胆固醇衍生的新型脂质材料的合成

以天然产物胆固醇和赖氨酸或组氨酸为原料,以6-氨基-1-己醇为连接臂成功构建了两种新型脂质材料。所得中间体和目标产物经熔点、IR、1HNMR和质谱等进行了结构表征,结果表明,所得中间体和产物的化学结构与目标化合物结构一致,为阳离子脂质体的制备和基因治疗提供了载体材料。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定猴免疫缺陷病毒基因治疗产品中盐酸组氨酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)基因治疗产品中盐酸组氨酸含量的方法。方法以正亮氨酸为内标,异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)为柱前衍生化试剂,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以醋酸钠缓冲液(pH 6.5)和80%乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长254 nm,进样量10μl,流速1.0 ml/min。用建立的方法检测样品中盐酸组氨酸含量,绘制标准曲线,并验证该方法的精密度、稳定性、专属性和准确性。结果盐酸组氨酸在12.54~31.35μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 9);3份供试品溶液,每份连续进样5次,盐酸组氨酸峰面积平均RSD值为1.77%;同1份供试品溶液0、3、6、12 h进样,盐酸组氨酸峰面积平均RSD值为1.03%;该方法可将甘氨酸、精氨酸和丝氨酸对照品有效分离;高、中、低浓度样品的平均回收率分别为103.37%、102.28%和102.91%。SIV基因治疗产品中盐酸组氨酸3次检测的平均含量为9.66 mg/ml。结论建立了柱前衍生RP-HPLC检测SIV基因治疗产品中盐酸组氨酸含量的方法,该方法重现性好,专属性强,精密度及准确度高,可对基因治疗产品中的盐酸组氨酸进行质量控制。     

L—组氨酸产生菌的选育

以谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum)ATCC-13761为出发菌株，经硫酸二乙酯（DES）和亚硝基胍（NTG）诱变处理，D-组氨酸（D-His)、6-氮鸟嘧啶（6-AU）等结构类似物平板和以L-组氨酸（L-His)为惟一氮源平板定向筛选，获得一株L-组氨酸产生菌H-24（D-His^r6-AU^r Hisase^-）。在加有150g/l葡萄糖、35g/L硫酸铵以及10mL/L玉米浆的发酵培养基中发酵72h，产L-组氨酸1.6g/L。     

锌(Ⅱ)—组氨酸络合吸附波的研究及应用

本文提出和研究了锌(Ⅱ)—组氨酸体系的络合吸附波。在0.05mol/L NH_3—0.05mol/L NH_4Cl底液中,加入组氨酸后,使锌(Ⅱ)的单扫示波极谱导数峰电流增大,峰电位从-1.24V(vs.SCE)负移至-1.36V。该导数峰电流与锌(Ⅱ)的浓度在1.0×10~(-7)-7.0×10~(-6)mol/L范围内成正比,检测限达5.0×10~(-8)mol/L,用于镀锌车间排放废水中锌的测定,得到满意的结果。研究了该极谱波的性质及反应机理,证明为反应物弱吸附的络合吸附波,吸附反应物为锌(Ⅱ)与组     

Bola型表面活性剂1,12-二组氨酸基十二烷基二胺盐的性质研究

通过红外光谱、1HNMR、元素分析等对新型Bola型表面活性剂1,12-二组氨酸基十二烷基二胺盐(H2D)的结构进行表征。通过微量量热和电导率的实验方法测得H2D的临界胶束浓度(cmc)为3.0×10-5mol/L左右,通过荧光探针法测定H2D胶束聚集数N为5,动态光散射测得H2D的胶束半径主要分布在1.79 nm附近。     

响应面法优化L-组氨酸发酵培养基

采用响应面OKSM）对L-组氨酸发酵培养基成分葡萄糖、硫酸铵、玉米浆进行优化。采用多元二次回归方程拟合3种因素与组氨酸产量的函数关系，并得到了最适发酵培养基。在优化培养条件下，组氨酸的产量由18．13g．／L提高到20．28g／L，产量提高了11．86％。     

糖用活性炭吸附L-组氨酸的特性研究

研究了活性炭用量、pH、吸附平衡时间、吸附温度等因素对活性炭吸附L-组氨酸的影响。实验结果表明,活性炭吸附L-组氨酸达到吸附平衡的时间大约是80min;L-组氨酸的吸附率随着活性炭用量的增加而增大,吸附量则随着活性炭用量的增加先快速下降后又略有回升,当活性炭用量为10%(质量分数)时,吸附量达到最低点;吸附量随着溶液pH的上升呈现先上升后下降的趋势,在L-组氨酸的等电点附近,吸附量达到最大值,在pH大于12时,活性炭几乎不吸附L-组氨酸;吸附量随着温度的升高呈现先上升后下降的趋势,当温度到达70℃左右时,吸附量达到最高点。