低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34-5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9．6,该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌（Burkholderia）的同源性为99％摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g／L）;淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO4 1,聚乙烯醇大豆油乳化液20．其最高酶活为6．87U／mL。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

Liquid-liquid extraction of protease from cold-adapted yeast Rhodotorula mucilaginosa L7 using biocompatible and biodegradable aqueous two-phase systems

This work aimed to optimize the extraction of an extracellular protease produced by the cold-adapted yeast Rhodotorula mucilaginosa L7 using aqueous two-phase systems (ATPS) comprising polyethylene glycol (PEG) and sodium citrate or sodium tartrate. First, the biocompatibility of the phase forming agents was assessed. The results obtained with PEG-2000, PEG-4000, and PEG-6000 demonstrated that even at large PEG concentrations (32 wt%) the protease maintains its activity after 3 h of reaction, whereas an increase in salt concentration provokes a gradual decrease in protease stability. Subsequently, the partitioning of the protease in both types of ATPS was assessed, evaluating the effect of temperature, molecular weight, and concentration of PEG on protease purification, using two 2³-full factorial designs. The best partitioning conditions were obtained in PEG-6000/sodium tartrate-based ATPS, at 30ºC (with a yield of 81.09 ± 0.66% and a purification factor of 2.51 ± 0.03). Thus, considering the biodegradable characteristics of the system, the PEG/sodium tartrate ATPS is a viable and economic low-resolution step in protease purification, with a strong potential for future industrial application.     

低温微生物的适冷性及其应用

对低温微生物的概念、分布与分类进行了介绍,主要从低温微生物的适冷性方面综述了其生理特性,在低温环境下对污染物的生物降解作用,讨论了低温微生物在污水处理中的应用,对环境保护具有一定的理论意义。     

寒区城市污水冷热源对污水生化处理影响

城市污水冷热源开发利用具有重要的节能与环保意义,但在寒区是否会对污水生化处理产生严重的影响是关键性问题.基于实际运行的两个典型项目,测试污水排放温度分布,研究城市污水干渠周边土壤对水温的调节特性,在此基础上进一步分析污水处理流程的温度分布情况,并从生化角度分析污水冷热源对污水生化处理的影响.研究表明:土壤对污水水温具有调节作用,被利用污水水温不低于8℃时,污水冷热源不影响污水处理厂进水水温,污水处理曝气池水温在5~7℃内,水处理能力由耐冷菌承担,再提取2~3℃污水热能对水处理无明显影响,水温均在耐冷菌活性范围内.     

一株产低温脂肪酶酵母菌的鉴定及酶学性质

低温脂肪酶已成为工业低温工艺良好候选物，在生物质能源、食品、皮制品、废水处理等领域发挥重要作用。本文从实验室保藏的55株产低温脂肪酶酵母菌株中筛选出一株高产菌株NYNU 19160，通过形态学、生理生化以及ITS和26S rDNA序列分析，将该菌株鉴定为Papiliotrema fonsecae。经过硫酸铵分级沉淀、透析、浓缩将该脂肪酶纯化后，对酶学性质进行了研究。结果表明，该脂肪酶最适反应温度为20℃，最适作用pH为7.5，属于低温碱性脂肪酶；Cu²⁺显著促进该酶的水解活性，而Li⁺表现为显著抑制作用；有机溶剂乙腈、甲醇、乙酸对酶活性有较强的促进作用，而苯和正己烷则抑制了该酶的活性；该酶对对硝基苯酚丁酸脂（pNPC₄）底物表现出较强特异性。     

寒冷地区城市污水处理的工艺与强化措施

低温对城市污水的生物处理有较大影响。比较认为,CASS工艺、膜生物反应器是较适合低温污水生物处理的工艺。利用低温微生物强化、通过预处理改善进水的水质、提供泥水充分混合的条件是可采用的提高处理效果的措施。     

双水相萃取法分离低温α- 淀粉酶的研究

对利用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)- 磷酸盐双水相体系从Pseudoalteromonas arctic GS230 发酵液中直接萃取分离低温α- 淀粉酶进行研究。探讨PEG 分子量、相浓度、pH 值对低温α- 淀粉酶在PEG- 磷酸盐双水相中分配系数、纯化系数及回收率的影响,并进行直线放大实验。结果表明：在pH5.0,PEG-1000 15%- 磷酸盐15% 的双水相体系中,低温α- 淀粉酶的纯化系数及回收率分别为4.8 和87%。     

耐低温生物脱氮机制与对策研究进展

废水处理系统中不可避免存在着低温环境，低温使得硝化菌和反硝化菌的活性下降，如何在低温条件下提高污水生物脱氮效果是废水处理研究工作中亟待解决的问题。本文对近年来研究发现的低温微生物耐低温机制进行了梳理，提出了最近发现的胞外聚合物（EPS）和聚羟基脂肪酸酯（PHA）的作用机理；介绍了几种已被研究证实能在低温下进行脱氮的功能菌与一些可以提高低温污水脱氮效果的新技术/工艺（包括使用新型填料、改变碳源投加方式、投加特定的重金属）；阐述了目前研究所遇到的一些问题，如缺乏工程实践、处理水质与研究菌株单一，研究结论与实际废水处理应用还有着差距。指出未来可以通过特异性功能菌的固定与使用、生物倍增技术与工程实践结合等方法来降低运行成本，提高低温污水的脱氮效果。     

石油烃污染场地低温修复机制研究进展

生物修复一直是石油烃污染场地修复技术的研究热点，已经取得了很多实验和理论认知。但是，现有研究主要集中在中高温环境下，而在实地修复中，生物修复往往要跨越中低温期，此时，无论是土著还是外源微生物的生理特性都将发生改变；由于细胞活力低，这一时期经常在修复过程中被忽视，或是采用缺乏针对性的常规工艺而事倍功半。本文围绕低温生物修复技术，概述了低温石油烃降解微生物的研究现状，重点介绍了长链烷烃、苯及其同系物、多环芳烃三大类典型石油烃的低温代谢机制和主要代谢途径；在此基础上，从脂肪酸的组成、蛋白的低温表达、特殊蛋白的合成以及酶的结构适应性等4个方面，进一步剖析了低温环境下细胞生理生化特性的微观变化，这种低温微生物独有的适冷机制决定了其特有的低温降解特性，并成为低温修复的核心。分析表明，低温期生物修复应该得到足够重视：一方面，充分而合理地利用漫长的低温期，针对性实施低温期受控修复，提高营养盐利用率，可以有效提高生物修复效率；另一方面，深入研究细胞低温代谢和适冷机制有助于指导低温修复手段的实施，将成为切实可行的发展方向。