北京棒杆菌天冬氨酸激酶五突变体的构建及酶学性质表征

目的:天冬氨酸激酶（aspartate kinase,AK）是催化天冬氨酸族氨基酸合成的第一个关键别构酶,为了提高其活力,并削弱或解除末端产物赖氨酸（Lys）与苏氨酸（Thr）对AK的协同反馈抑制。方法:在获得的北京棒杆菌四突变体T379N/A380C/G171I/Y198N AK（NCIN AK）的基础上,发现G295位点与抑制剂Thr通过氢键相连且高度保守, 对G295位点进行定点饱和突变,提取质粒,转入大肠杆菌BL21感受态细胞中诱导表达,采用高通量筛选获得酶活力显著提高的突变株,对野生型（Wild type,WT）、五突变体T379N/A380C/G171I/Y198N/G295L AK（NCINL AK）进行酶动力学研究和酶学性质表征。结果:成功构建五突变体NCINL AK,最大反应速率V_max为259 U/（mg·min）。与野生型相比,米氏常数K_m值由3.44 mmol/L减小到0.93 mmol/L,酶与底物结合更加紧密;希尔系数n值由2.73降为1.21,正协同性降低;最适反应温度由25 ℃提高到28 ℃,最适pH由8.0升至8.5,半衰期由4.7 h延长至5.2 h;五突变体NCINL AK较野生型WT AK,不同底物抑制剂浓度在0.2、1.0、5.0、10.0 mmol/L时,抑制作用被不同程度的减弱,甚至Lys抑制作用被完全解除,且在10 mmol/L Thr条件下有激活作用。结论:本实验获得酶活力提高87.20倍的五突变体NCINL AK,酶学性质得到明显改善,在一定抑制剂浓度范围内,基本解除Lys对AK的反馈抑制作用,Thr的反馈抑制得到一定缓解,提高了积累大量天冬氨酸族氨基酸的可能性,为构建高产天冬氨酸族氨基酸菌株提供参考,使甲硫氨酸（Met）等氨基酸的无污染、高效生产成为可能。     

兵临城下——图拉城,阻挡德军的“钢铁之城”

正二战中期，尽管德国已称霸半个欧洲，但这并不能满足希特勒的胃口。德国是一个典型的工业化国家，其国内产能过剩，但缺乏石油、橡胶等资源。同时，只凭有限的国内市场，无法消化掉其庞大的工业产能。德国国内失业率居高不下，想要解决这些问题就必须向外扩张，占领更多资源和市场。     

六(4-硝基苯氧基)环三磷腈的合成及其热稳定性研究

六(4-硝基苯氧基)环三磷腈(HNCTP)是一种环境友好型阻燃剂,因具有良好的耐热性和阻燃性而备受关注。以六氯环三磷腈(HCCP)、对硝基苯酚为原料合成了HNCTP,经傅里叶红外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)、元素分析(EA)、热重-差示扫描量热分析(TGA-DSC)等分析手段对产物的结构和热稳定性进行了表征,并考察了反应溶剂、投料比例和反应时间3个因素对HNCTP收率的影响。结果表明,以丙酮为溶剂,n(对硝基苯酚)∶n(HCCP)=9∶1,56℃回流反应18h,HNCTP的收率为90.5%。热稳定性研究表明,HNCTP的热稳定性较好,在N2气氛下的初始分解温度为371.5℃,可作为添加型阻燃剂应用于聚合物基材中,而且适用于加工温度较高的体系。     

软件测试工具Logiscope的应用研究

静态测试是指不运行测试而直接对代码进行分析的测试。Logiscope是一较为典型的静态测试工具。本文主要通过一个实际案例来介绍软件测试工具Logiscope的功能与应用方法。     

低温固相反应合成Bi2WO6粉体及其可见光光催化性能

以Bi(NO3)3?5H2O和Na2WO4?2H2O为原料,采用固相法直接合成Bi2WO6粉体,研究了反应温度和保温时间对产物物相、形貌及可见光光催化性能的影响. 结果表明,350℃下保温2 h所得粉体含少量Bi2O3和Na2W4O13杂质,但光催化性能最好,可见光照射90 min对0.01 mmol/L RhB溶液的降解率达95%,且经5次循环后光催化活性和化学稳定性良好.     

生不逢时:温彻斯特G30半自动步枪及其改进型

<正>二战前,美国军方计划将制式步枪由采用旋转后拉枪机式工作原理的斯普林菲尔德M1903步枪更换为M1伽兰德半自动步枪。虽然M1伽兰德步枪在后来的多次战争中证明了自己的价值,但其在采用之初却遭到多方质疑,很多人认为该枪不适合作为战斗步枪使用。温彻斯特公司在充分评估这一情况后,认为这是一次商机,M1伽兰德步枪很有可能被取代,于是公司与约纳森·勃朗宁合作,开发出一款G30半自动步     

小国de抵抗:苏芬战争中芬兰使用的轻武器

<正>苏芬战争(1939年11月30日~1940年3月12日)是一场强国与弱国之间的较量,当时苏联在军队数量、装备方面都远远胜于芬兰这个欧洲小国。苏联当时的领导人斯大林认为只需要不到一个月的时间就可以打败芬兰。但出人意料的是,芬兰人凭借着勇敢精神和出色的战术,将这场战争持续了将近3个半月。虽然芬兰最终战败并割让10%的国土,却给苏联造成了惨重的人员伤亡。在这场战争中。苏芬对峙情况如何?芬兰军队使用的轻武器种类有哪些?——     

时代产物:贝尔杰卡宾枪及步枪

<正>法国陆军在一战前曾装备过一款贝尔杰M1890骑兵卡宾枪及其数款变型产品,其中既包括卡宾枪,也包括步枪。尽管这些枪的光芒似乎被同时代法军大规模制式采用的勒贝尔M1886步枪所遮掩,但各型贝尔杰M1890卡宾枪及步枪在当时仍是一款很好的武器,在一战之前直至一战后被法国陆军在全世界范围内使用,尤其是在法国殖民地部队及外籍军团中……     

巴祖卡火箭筒研制始末及改进设计

正历史钩沉巴祖卡火箭筒是二战期间著名的反坦克武器,其可谓世界单兵反坦克火箭筒的鼻祖。该火箭筒研制历程如何?又是如何在短短的三四年时间内快速经历多次改进的呢?——美国出版的《在滩头阵地和战场前线上》一书记载:"1942年9月,一艘从美国驶来的舰船停驻在埃及东北部城市苏伊士的港口中。在这艘舰船上装载了一批极为秘密的物资——600具巴祖卡火箭筒,准备装备在此地作战的美军