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81.
目的 制备重金属镉人工抗原并对其进行理化性质和免疫原性鉴定。方法 以乙二胺四乙酸二钠(EDTA.2Na)或二乙基三胺五乙酸(DTPA)为双功能螯合剂,将牛血清白蛋白(BSA)和Cd2+进行螯合,制备镉人工抗原,通过二喹啉甲酸(BCA)法、紫外全波长扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、火焰原子吸收法以及动物免疫的方法对人工抗原进行分析鉴定。结果 紫外全波长扫描和SDS-PAGE电泳初步证明人工抗原合成成功;BCA法测定人工抗原BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+的蛋白质浓度分别为0.9488、0.5506 mg/mL;火焰原子吸收法测得BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+的Cd2+浓度分别为22.8、20.1 μg/mL,说明人工抗原合成成功,且BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+的偶联比分别为14.2:1和21.6:1;用BSA-EDTA-Cd2+和BSA-DTPA-Cd2+分别免疫小鼠,四免后血清效价均能达到1:25600,且两组血清敏感性分别达到208.63和98.43 ng。结论 人工抗原BSA-EDTA-Cd2+、BSA-DTPA-Cd2+合成成功,为制备单克隆抗体和建立重金属镉快速免疫分析技术提供研究基础。 相似文献