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本研究通过RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001中克隆了编码阿魏酸酯酶A的成熟肽cDNA(AusfaeA),构建重组表达质粒pPIC9K-AusfaeA,将其经SacⅠ线性化后转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,通过抗G418筛选获得高拷贝重组子GS115/AusfaeA,用甲醇诱导表达重组阿魏酸酯酶(reAusFaeA)。SDS-PAGE显示,纯化后的reAusFaeA为单一条带,其表观相对分子质量为36 000;以阿魏酸甲酯为底物,经高效液相色谱法测定,该酶的酶活为29.4 U/mg;reAusFaeA的最适反应温度为45℃,并在45℃以下稳定;最适反应pH为5.0,在pH 4.0~6.0范围内稳定;多数测定的金属离子及EDTA对该酶的活性影响不大。结果表明在P.pastoris中成功实现了AusfaeA的异源表达,该重组酶优良的酶学性质表明其具有较大的工业应用潜力。 相似文献
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2013年6月24日,大港油田石油工程研究院在西40-8-4H井成功实施水平井裸眼挤压砾石充填防砂完井工艺,累计用携砂液338 m3,加砂52.6 m3。这是大港油田首次在水平井中采用这项工艺。西40-8-4H井油藏类型为断块构造油藏,目的层为高孔高渗的砂岩储层,胶结疏松。大港石油工程研究院和采油工艺研究院相关部门经过多次方案讨论,推荐采用顶部注水泥固井、裸眼砾石 相似文献
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为探索盐诱导激酶2(salt-inducible kinase 2, SIK2)对电离辐射引起的自噬与凋亡的影响,以期为肿瘤的放射治疗提供新的思路,以慢病毒颗粒LV-GFP和LV-SIK2体外转染HeLa细胞,48 h后用荧光显微镜观察转染是否成功,RT-PCR和Western blot检测转染细胞SIK2的干扰效果。通过Western blot检测SIK2低表达对8 Gy 60Co γ射线照射下细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ 和P62表达的影响来观察自噬的变化;利用流式细胞术来检测SIK2低表达对8 Gy 60Co γ射线照射下细胞凋亡的影响。结果表明,SIK2低表达的稳转细胞系被成功构建;8 Gy γ射线照射后,SIK2低表达细胞系LC3-Ⅱ表达下调,P62表达上调,表明自噬被减弱;流式细胞术检测发现SIK2低表达细胞系在照后12 h FITC+PI-细胞比例就显著增加,表明SIK2低表达增加了细胞凋亡。因此,SIK2低表达会导致电离辐射引起的细胞自噬大大减弱,凋亡显著增加。 相似文献
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正2019年5月20日,西南油气田足206井钻至6 240 m完钻,水平段长1 500 m,刷新中国石油页岩气水平井井深纪录,为渝西区块深层页岩气开发奠定基础。足206井是西南油气田渝西区块部署的一口深层页岩气水平评价井,储层埋藏深度4 245 m,井底静止温度达130℃,是一口大位移三维水平井,钻井施工及精准着陆难度大。钻进过程中,西南油气田实行地质工程一体化工作模式,精准建立地质导向模型,使用高性能地质导向工具,整合国内外优势资源、先进管理模式和先进技术,强化各环节过程管理,严格控制井眼轨迹,克服超深、超高温、大位移带来的水平段地质导向钻井难题,顺利完成钻井任务。 相似文献
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<正>截至2019年7月23日15时,中油国际管道公司运营的中亚天然气管道和中缅天然气管道,自投产输气以来累计向中国输送天然气达到3 000×10~8m~3。中亚天然气管道三条线年输气能力550×10~8m~3,中缅天然气管道缅甸段年输气能力52×10~8m~3。每年两大管道的进口量占同期我国进口总量的40%以上,约占全国同期年消费总量15%以上,在保障国家能源安全、推进我国能源结构清洁转型等方面发挥着重要作用。 相似文献
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<正>截至2019年3月25日,由中国石油在塔里木油田成功开发的迪那、塔中1号等14个超深超高压复杂凝析气田,建成了全球最大超深层凝析油气生产基地,已累计生产天然气1 066×10~8 m~3、凝析油及轻烃等石油液体2 477×10~4 t,成为世界深层复杂凝析气田开发的引领者。 相似文献
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正2018年7月30日,《BP世界能源统计年鉴》(以下简称《年鉴》)2018年中文版发布。2017年,世界总体能源、石油和天然气消费量均实现5年来最快增长,减排压力相应增加。石油市场供给不确定性将影响中期市场油价走势。中国能源消费量与前两年相比增长显著,贡献世界能源消费增量1/3,已经成为全球能源低碳转型的关键力量。 相似文献
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