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目的 建立一种双重实时荧光PCR检测转基因植物中常用调控元件pCaMV35S和tNOS的方法。方法 首先, 通过扩增多个植物DNA来测定此系统的特异性; 然后, 将转基因棉花的模板DNA稀释5个梯度, 检测此方法检出限(Limit of detection, LOD), 建立标准曲线判断该方法的定量能力; 最后, 通过相对模拟掺假试验测定此灵敏度。结果 特异性试验的检测结果显示此系统具备较强的特异性, 能够区分含有上述两种调控元件的转基因植物和非转基因植物。此方法对于pCaMV35S基因的检测限为1 ng, 对于tNOS 基因的检测限为10 ng。依托此方法建立的标准曲线的扩增效率分别为96%和87%, R2均大于0.99, 方法具有定量能力。而且, 方法的相对灵敏度达到1%, 满足混合样品中转基因成分的检测要求。结论 建立的双重实时荧光PCR方法表现出较强的特异性和较高的灵敏度, 有高通量、低成本以及定量检测的能力。 相似文献
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管理信息系统自20世纪60年代的数据库系统发展到现在,经历了层次数据库系统、网状数据库系统、关系数据库系统等发展阶段,到今天可以说管理信息系统的技术已经得到了很大的改善,国外在管理信息系统的应用方面走在了前列,国内对管理信息系统作用的普遍认可还不过是近十来年的事。但是管理信息系统在我国发展非常迅速,现在它的应用已经非常普遍,大到一个企业,小到一个组织,到处可以看到各式各样的管理信息系统的身影。〈br〉 经过对学院超市的调研,发现其管理上存在很大的漏洞,在学生下课或放学的交易高峰期,经常出现结账错误或货品短缺的现象,随着超市的规模不断扩大,只依靠个人的管理经验来管理超市的日常运营已经不再可靠,现在急需引入一种科学的管理方法。 相似文献
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牛肉干具有重要的营养价值,应用范围很广,论文主要阐述了锡林郭勒盟地区传统风干牛肉干应进行工业化生产的思考。 相似文献
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目的为了保障食品安全和维护消费者合法权益,对网销市场中驴肉(鲜肉和制品)真伪及掺假情况进行分析。方法本研究根据现行行业标准SN/T 3730.4-2013和SN/T 3730.5-2013,分析市场中鲜驴肉(9份)和加工驴肉制品(18份)中的驴源性及马源性。结果 9份鲜肉样品中有4份为驴肉,剩余5份为马肉;加工肉制品中,7份含有驴源性成分,5份含有马源性成分,剩余6份既含有驴源性成分又含有马源性成分。结论市场中存在利用马肉冒充驴肉的欺诈现象,相关部门应加强监管,避免欧洲"马肉风波"在中国上演。 相似文献
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致泻大肠埃希氏菌是引起人体以腹泻症状为主的常见病原菌。将传统微生物学方法和分子鉴定方法相结合鉴定致泻大肠埃希氏菌。根据聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和测序建立5种不同类型致泻大肠埃希氏菌的分子鉴定标准,并对试验过程进行安全性评价,最后通过检测鲜肉中肠道集聚性大肠埃希氏菌验证此方法的适用性。结果显示5种致泻大肠埃希氏菌标准菌株的特征基因都有明显的条带,且与该特征基因的产物条带大小一致。同时,胶回收测序的结果与特征基因的序列一致性为100%,可利用PCR和测序鉴定5种致泻大肠埃希氏菌;在安全性评价试验中,利用细菌裂解液进行涂板,培养后均未发现菌落生成,因此没有生物安全隐患;肉样中的检测结果显示,有astA基因的目的条带,且测序结果与此基因序列一致,说明此方法能够准确鉴定出鲜肉中肠道集聚性大肠埃希氏菌。成功建立5种不同类型大肠埃希氏菌的分子鉴定方法,评价试验过程的安全性,并准确鉴定出肉样中的肠道集聚性大肠埃希氏菌,为实验室相关标准的制定和修订提供理论依据和有益借鉴。 相似文献
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该研究以采集于内蒙古三个盟市的11份发霉奶豆腐样品为研究对象,通过真菌毒素和抗生素检测对其进行安全性评价,采用传统培养分离法从中分离霉菌菌株,采用分子生物学技术对分离菌株进行菌种鉴定,并对其产脂肪酶活性进行研究。结果表明,11份发霉奶豆腐样品中均未检出黄曲霉毒素M1和16种β-内酰胺类抗生素,具有一定的安全性。共分离鉴定出25株霉菌,11株归属于青霉属(Penicillium)的5个物种,6株归属于曲霉属(Aspergillus)的1个物种,5株归属于毛霉属(Mucor)的2个物种,3株归属于地霉属(Geotrichum)的1个物种。共有5株菌株产脂肪酶活力>6.00 U/m L,其中,菌株M1-2产脂肪酶活力最高,为(8.56±0.41)U/m L。奶豆腐中霉菌的筛选、安全性评价及产脂肪酶活力的初步研究,为功能性霉菌奶酪的研发提供有益探索。 相似文献
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牦牛是生长于我国高原环境特有物种,其肉和乳具有丰富的营养和较高的商品价值。本研究建立了一种基于内源质控的三重实时荧光PCR,可用于同步鉴定肉和乳中的牛和牦牛源性成分。首先对牛肉、牦牛肉、牛奶、牦牛奶等7种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法验证此方法的绝对检出限,最后通过牛和牦牛肉掺假模拟试验确定该方法的相对灵敏度。结果显示,本方法的特异性强,只能特异的检测到来源于牛和牦牛肉和乳的DNA,稳定扩增的内源质控有效的避免假阴性结果;本方法针对牛奶的绝对检出限为0.0025-0.005 ng、针对牦牛奶的绝对检出限为0.0025-0.05 ng;本方法的相对灵敏度可达0.1%。综上所述,所建立的三重实时PCR方法特异性强、灵敏度高,可实现牛和牦牛源性以及内源质控的同步检测。 相似文献