功能化纳米金属有机骨架材料的合成及其药物传输应用

本文总结了最近与纳米金属有机骨架材料(NMOFs)相关的研究进展,重点是合成策略、功能化修饰和药物传输方面应用。     

肺炎克雷伯菌CRP蛋白表达与纯化及生物学特征分析

目的:原核表达获得肺炎克雷伯菌KP1_RS23625基因（crp）编码的CRP蛋白,并解析CRP蛋白具体的生物学功能。方法:首先克隆肺炎克雷伯菌crp基因,并亚克隆至pET-28a（+）质粒构建重组蛋白表达载体;然后体外原核诱导表达、纯化目的蛋白并进行SDS-PAGE电泳分析。进一步通过生物学信息方法分析CRP蛋白的生物学功能:利用ProtParam、Protscale、SignalP4.1 Service、TMHMM Server v.2.0、SOPMA、SWISS-MODEL软件分别分析目的蛋白理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区域、二级与三级结构等一般生物学特征;并借助CDD数据库、Net Phos 3.1 Sever在线软件预测蛋白的功能结构域、磷酸化位点等功能特征;进一步利用ATRING 11.0交互式数据库进行蛋白质交联互作分析。结果:成功构建了重组目的蛋白表达载体pET-28a-crp,并通过原核诱导表达与镍柱亲和吸附法表达、纯化获得CRP目的蛋白;蛋白电泳结果显示CRP蛋白为水溶性蛋白,包括标签蛋白（约4 kDa）的重组目的蛋白分子质量约27 kDa。对CRP蛋白的生物信息学分析结果显示:CRP蛋白大小23.65 kDa、为亲水性蛋白;无跨膜结构域、无信号肽;蛋白二级结构主要由α螺旋与不规则卷曲构成,其中α-螺旋占比40%以上,结构较松散;同时成功构建了三级结构模型;CRP蛋白结构域分析表明含有1个功能结构域,属PRK11753超级家族;修饰位点及蛋白注释分析显示目的蛋白含20个磷酸化位点,与多个蛋白具有交互作用。结论:本研究利用基因工程方法成功获得了较高纯度肺炎克雷伯菌CRP蛋白,并通过生物信息学手段解析了其生物学特征,为肺炎克雷伯菌感染的临床治疗提供理论基础。     

模糊数学结合响应面法优化甘草桔梗复合饮料配方

以甘草和桔梗为主要原料制备甘草桔梗复合饮料,加入麦芽糖醇和柠檬酸进行风味调配,结合模糊数学法对其口感进行评价,采用单因素实验法和响应面法优化其配方,采用DPPH和ABTS法分析饮料的抗氧化活性。结果表明,甘草桔梗复合饮料最佳配方为甘草汁与桔梗汁体积比50:50、麦芽糖醇添加量4.29%、柠檬酸添加量0.05%,感官评分为90.23分,该饮料对DPPH和ABTS⁺自由基的最大清除率分别达到94.59%和98.37%。按该方法得到的最优配方制备的甘草桔梗复合饮料澄清透明,甘草和桔梗滋味协调浓郁,酸甜适宜,具有一定的抗氧化活性。     

金荞麦山药保健面包的研制

以金荞麦和山药为主要原料,研究金荞麦山药保健面包的配方.通过单因素和响应面试验,研究酵母用量、白砂糖用量以及牛奶用量对面包感官评分的影响.结果表明:金荞麦山药保健面包的最佳配方为高筋面粉160 g、金荞麦粉5 g、山药粉15 g、黄油16 g、改良剂1 g、盐1 g、鸡蛋50 g、酵母3.3 g、白砂糖34 g、牛奶76 m L.用此配方制成的面包外形均整、烤色均一、内部气孔均匀、弹性适中、口感及气味良好,感官评分为93.333.     

凌霄花多酚微波提取工艺优化及其抗氧化研究

以凌霄花为原料,在单因素考察的基础上,考察乙醇浓度、微波功率、提取时间和液料比等因素,通过响应面法优化微波辅助提取凌霄花多酚的工艺,并研究其抗氧化活性。结果表明,微波提取凌霄花多酚的最优工艺为:乙醇浓度40%、微波功率281 W、提取时间37 s、液料比32∶1(mL/g),在此条件下凌霄花多酚的平均提取率为8.07%,与预测值相对标准偏差(2.58%)较为接近。优化的提取工艺科学可行,重现性良好,适用于凌霄花多酚的提取,可为凌霄花的开发利用提供参考。抗氧化研究表明,凌霄花具有较强的抗氧化作用,为凌霄花多酚天然抗氧剂的研发提供了基础。     

石墨烯HF-SPME-HPLC测定牛奶中氟喹诺酮类抗生素残留

建立了一种石墨烯中空纤维固相微萃取-高效液相色谱联用测定牛奶中6种氟喹诺酮类药物的方法。以中空纤维为模板,石墨烯为增强体,采用溶胶-凝胶法制备了石墨烯中空纤维。以最大峰面积为标准考察了影响萃取效率的因素。结果表明,最佳实验条件为解析液为乙腈(含5%甲酸)1.0 mL,样品体积10.0 mL,NaCl 2.0 g,萃取体系pH=7,萃取温度为50℃。在最佳实验条件下,富集倍数为14.2~30.8,6种氟喹诺酮药物线性良好,方法检出限为0.38~0.70 μg/L,相对标准偏差为2.4%~8.5%,牛奶中加标回收率为75.2%~95.4%。在品牌牛奶2和市售鲜奶中分别检出2.1 μg/L诺氟沙星和4.8 μg/L沙氟沙星。该样品处理方法基质效应小、灵敏度高、简便、准确,可用于牛奶中残留氟喹诺酮类药物的检测。     

中药药理学保持式双语教学的研究与实践

为适应医药、化工专业学生对外交流,以及学生考研的实际需要,我们以保持式教学开展了中药药理学中英文双语教学模式,以问卷调查、座谈会、研讨会、工作坊等形式做好双语教学的调研和持续改进,收到了一定的效果。     

新型稀土铕荧光探针的合成及其性质研究

通过浸渍法将镧系阳离子Eu3+封装在MOF-5孔道结构中,制备出一种新型Eu3+功能化MOF-5(Eu3+@MOF-5)发光金属有机框架材料.Eu3+@MOF-5在394 nm波长激发下表现出Eu3+特征荧光峰,在有机溶剂及水中具有的良好荧光稳定性,且表现出对Fe3+的良好选择性和抗干扰能力.随着Fe3+逐渐加入,Eu...     

肺炎克雷伯菌对H2O2氧化胁迫的响应机制研究

目的:研究宿主肠道氧化条件对肺炎克雷伯菌的影响及该菌响应氧化胁迫的机制。方法:通过体外模拟肠道氧化条件,将肺炎克雷伯菌接种在含不同浓度梯度H₂O₂的液体培养基中进行氧化胁迫处理;测定细菌的生长曲线、检测细菌的关键毒力因子-荚膜与生物膜的生成量。并进一步地利用qRT-PCR荧光定量分析荚膜与生物膜表型相关基因的表达差异。结果:在氧化因子胁迫下,当处于较低浓度范围(<1.56 mmol/L)时,肺炎克雷伯菌早期生长受到抑制作用,中后期逐渐适应胁迫、其生长未受明显影响。此外,肺炎克雷伯菌在氧化胁迫条件下荚膜生成量明显降低,呈剂量依赖效应;但在一定浓度范围氧化因子作用下,其生物膜的形成量增加。分子检测表明荚膜结构基因magA表达量明显下调,生物膜相关基因YbaJ出现显著的上调表达。结论:肺炎克雷伯菌通过上调YbaJ基因的表达促进毒力因子生物膜形成以此响应氧化因子胁迫,本研究可为食源性肺炎克雷伯菌与宿主肠道因子互作及致病机制研究提供新思路。