烟酸姜黄素酯对低剪切应力诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及相关机制

目的: 探讨烟酸姜黄素酯（curcumin nicotinate,CN）对低剪切应力（low shear stress, LSS）诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）凋亡的影响及机制研究。方法: 运用平行平板流动腔建立LSS诱导的HUVECs凋亡模型。采用Hoechst33258荧光染色,流式细胞术检测CN对LSS诱导的HUVECs凋亡的影响。Western blot检测CN对LSS诱导的HUVECs中前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9）蛋白表达的影响。结果:Hoechst33258荧光染色结果显示,与静态培养组比较,LSS组（3 dyne/cm2,12 h）内呈现凋亡状态的HUVECs明显增多。与LSS组比较,各CN+LSS组内呈现凋亡状态的HUVECs明显减少,并且呈现浓度依赖性。其中以20 μmol/L CN+LSS组凋亡细胞数最少;流式细胞术结果显示,与静态培养组比较,LSS组HUVECs凋亡率明显增加,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与LSS组比较,各CN+LSS组HUVECs凋亡率明显减少,并且呈现浓度依赖性,其中以20 μmol/L CN+LSS组HUVECs凋亡率减少最为明显,差异具有显著统计学意义（P<0.01）。Western blot结果显示与静态培养组比较,LSS组内PCSK9蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与LSS组比较,CN+LSS组内PCSK9蛋白表达下降,并且呈现浓度依赖性,差异具有统计学意义（P<0.05）。其中以20 μmol/L CN+LSS组PCSK9蛋白表达下降最为明显(P<0.01)。结论: CN能够抑制LSS诱导的HUVECs凋亡,其作用机制与CN下调LSS处理的HUVECs中PCSK9蛋白表达相关。     

枸杞子促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性的分子网络调控机制研究

目的:基于生物信息学和网络药理学方法探究枸杞子（LF）促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性（RP）的分子网络调控机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）检索LF的主要活性成分及其可能的作用靶点；从GEO数据库下载GSE81058基因表达谱数据，采用R软件构建虹膜色素上皮细胞（IPE）和视网膜色素上皮细胞（RPE）差异表达基因火山图和聚类热图；采用STRING数据库构建LF成分-靶点和IPE-RPE差异表达基因的蛋白质-蛋白质交互网络（PPI），运用Cytoscape提取交集网络基因；通过DAVID数据库对交集基因进行基因本体和信号通路分析；采用cytoHubba分析LF作用于IPE的关键靶点。结果:共获得LF的化学成分188个，其中主要的入血活性成分36个，这些活性成分可能作用的靶点201个；IPE与RPE主要的差异表达基因有142个，其中上、下调基因各71个；发掘得到105个与LF促进IPE分化以治疗RP的相关基因靶点；LF作用于这些靶点涉及的生物学过程包括调节细胞分化、调节视网膜层形成等，相关的分子功能主要涉及转录共激活剂活性、离子通道活性等，主要富集于细胞质、高尔基体、细胞核等区域；LF作用于IPE涉及的分子机制包括调控PI3K-Akt信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等；LF促进IPE分化主要作用于SPP1、MMP9等十个关键靶点。结论:IPE与RPE具有明显差异的基因表达谱，LF的有效活性成分可作用于这些差异表达基因，促进IPE细胞分化为RPE，从而治疗RP。本研究可为细胞移植与中医药联合的中西医结合疗法应用于RP的临床治疗提供科学依据。     

电压门控钠通道亚型基因突变相关癫痫发生和临床治疗

癫痫（epilepsy,EP）是一种由大脑神经元异常放电所引起的以短暂的大脑功能失常为特征的常见脑部疾病,易反复发作,严重影响患者的健康和生活质量。研究发现,表达在中枢神经系统中电压门控钠通道（voltage-gated sodium channel,VGSC）亚型Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.6、Nav1.7在癫痫发病机制中起重要作用,是相关抗癫痫药物（AEDs）的作用靶点。这些通道α亚基编码基因突变可引起不同形式的癫痫发作。本文针对表达在中枢神经系统中的上述5种VGSC亚型基因突变相关癫痫发生和临床治疗作简要综述,为癫痫的发生发展电生理机制和临床治疗研究奠定基础。     

姜黄素对血小板源性生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖及PTEN表达的影响

目的:研究在血小板源性生长因子（platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB）诱导下姜黄素对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMCs）增殖以及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（phosphatase and tensin homology deletedon chromosome ten,PTEN）的影响，为侗族药物“姜黄”的临床应用提供更丰富的实验依据。方法:用20 ng/mL PDGF-BB孵育大鼠VSMCs 24 h，建立细胞增殖模型。MTT和CCK-8法观察姜黄素对VSMCs的细胞活性的影响，流式细胞术检测细胞周期，细胞划痕实验观察细胞迁移力，RT-PCR和Western blot观察PTEN mRNA、PTEN蛋白以及磷酸化PTEN（p-PTEN）蛋白的表达情况。结果:在20 ng/mL PDGF-BB的诱导下，10、30 μmol/L的姜黄素可显著抑制VSMCs增殖，以10 μmol/L姜黄素为最佳作用浓度，其不仅可以使细胞周期中G0/G1期比例明显升高，S期比例降低，还能显著抑制VSMCs迁移。同时可以上调PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达，下调p-PTEN蛋白的表达。结论:姜黄素可以抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖与迁移，其对PTEN的影响，可能与上调PTEN mRNA和PTEN蛋白，下调p-PTEN蛋白相关。     

白簕叶总多酚对Aβ25-35与AAPH诱导的PC12细胞氧化损伤和衰老的保护作用

为探究中药白簕(Acanthopanx trifoliatus(L.) Merr.)能否作为高效、低毒的防治阿尔茨海默病的天然药物原料,选用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12作为神经细胞模型,建立Aβ_25-35诱导的PC12细胞氧化损伤模型,测定白簕叶总多酚干预24 h后PC12细胞存活率;通过AAPH诱导的PC12细胞衰老模型和β-半乳糖苷酶活性染色法评估PC12细胞衰老情况。结果表明：与仅损伤处理组相比,5～60 mg/L的白簕叶总多酚能够显著提高(p<0.05)经Aβ_25-35诱导的氧化损伤的PC12细胞的存活率,且能够降低AAPH诱导的细胞衰老模型中的β-半乳糖苷酶活性,表明白簕叶总多酚对PC12细胞具有显著的保护作用,能有效缓解PC12细胞氧化损伤与衰老。该研究为寻找有效防治阿尔茨海默病的天然药物的鉴定与筛选提供理论依据。     

夏枯草水提取物对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制研究

目的:探讨夏枯草水提取物对血管紧张素II诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖作用及对Daxx/PTEN/NF-κB信号通路的影响。方法:培养VSMCs,体外用血管紧张素II （angiotensin II,Ang-II）(1 μmol/L)诱导细胞增殖模型,MTT和BrdU法分别检测夏枯草水提取物不同浓度(10、20、40、80、160 μg/mL)作用24 h后对VSMCs活性和增殖的影响、划痕法观察细胞迁移力,Western blot检测细胞中Daxx、PTEN、NF-κB蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组VSMCs活力及细胞迁移能力明显增强;同时细胞中Daxx、PTEN蛋白表达明显降低,NF-κB蛋白显著上调;与模型组比较,20、40、80 μg/mL夏枯草水提取物成浓度依赖性显著抑制VSMCs活力与细胞迁移能力,以80 μg/mL浓度最显著;同时,夏枯草水提取物处理组细胞Daxx、PTEN蛋白表达明显上调,NF-κB蛋白下调。结论:夏枯草水提取物能显著抑制Ang-II诱导的VSMCs增殖与迁移,其机制可能与Daxx/PTEN/NF-κB信号通路有关。     

蜂蜜中植物源性毒性成分的研究进展

蜂蜜是天然的甜味剂、膳食补充剂,有广泛的药用功效,但与欧美等国家相比,我国在食用蜂蜜中毒机制及毒性成分阐明上还有待进行深入的研究。本文对我国食用蜂蜜中毒事件、临床症状、中毒原因、植物源性毒性成分及其毒性等进行综述,为开展蜂蜜中植物源性毒性成分研究及提升蜂蜜安全标准提供参考。     

微生物乳糖酶研究进展

乳糖酶是一种分解乳糖产生半乳糖和葡萄糖的双糖酶,在乳品生产、医药助消化、果菜成熟软化、环境保护等方面具有重大应用价值。微生物是产乳糖酶的主要来源,具有生长繁殖快、酶量丰富、生产成本低、适合工业化生产等特点。通过查阅国内外文献,对微生物乳糖酶研究从微生物乳糖酶特点、产乳糖酶主要微生物、基因工程技术在乳糖酶生产上的应用及微生物乳糖酶的应用等领域进行了综述,为产乳糖酶微生物的开发、乳糖酶基因工程技术的应用等提供参考。     

鲜榨山茶油食用安全性毒理学评价

通过急性毒性试验、遗传毒性试验和亚急性毒性试验对鲜榨山茶油进行毒理学研究,并做安全性评价。结果表明:鲜榨山茶油对大鼠的急性经口LD_(50)大于10 000 mg/kg,判属实际无毒级;遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和体外哺乳类细胞染色体畸变试验)结果均为阴性;在大鼠28 d喂养试验中未见动物健康状况、血液生化指标和器官组织形态的异常变化。因此,鲜榨山茶油无急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性,具有较高的食用安全性。     

交互式教学法在中医类专业心电图实验教学中的应用

为提高中医类学生心电图实验教学效果,文章分别分析了正常心电图及异常心电图实验教学中存在的问题,并提出了"交互式问答法""结合图纸学生主动讲授法",从而提高了学生心电图测量与分析能力,弥补了理论课学习的不足,为以后临床工作打下坚实的基础。