硅胶载体氯霉素免疫亲和柱的制备

以硅胶为载体,通过硅烷偶联剂3-氨基丙基三乙氧基硅烷在其表面引入氨基,采用戊二醛法与氯霉素抗体进行偶联。该方法制备的免疫亲和柱对氯霉素抗体的偶联率达到72%,对氯霉素的最大吸附容量达到80ng/mL柱体积, 选择含70%甲醇的PBS为洗脱溶液。以牛奶为检测对象分别采用3种不同方法进行样品处理,利用免疫亲和柱实现对样品中痕量残留的氯霉素纯化富集并进行ELISA检测。     

磁性氧化石墨烯固定化果胶酶

磁性氧化石墨烯固定化酶的研究鲜见报道,本实验采用水热沉淀法制备了铁磁性氧化石墨烯（magnetic graphene oxide,MGO）,通过交联剂固定化果胶酶。采用红外光谱和SEM表征了制备的MGO的活性基团和特性。结果表明MGO具有—OH等亲水活性基团,可以较好地分散在水相催化体系中。磁性氧化石墨烯的蛋白上载量可达1453mg/g MGO,远高于颗粒活性碳,硅藻土和粉末活性炭的上载量。并且研究了酶催化的动力学,酶的催化转化值7.41h?1,催化效率0.98mL/(h?mg),Km7.55mg/mL。固定化酶稳定性明显增强,且重复使用10次活性仍然可以保持在初始酶活的58％。     

比色法与HPLC法对比测定桑叶茶中γ-氨基丁酸的含量

应用酶标仪定量分析桑叶茶（下称桑茶）中的γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）,经优化的显色体系在波长640 nm处有最大吸收波长,建立GABA质量浓度与吸光度的相关方程。比色法与高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）法所测GABA在所需质量浓度范围内线性关系均良好（R2＞0.99）。比色法的平均相对标准偏差为1.28%,平均回收率为98.46%;HPLC法的平均相对标准偏差为0.37%,平均回收率为100.10%。表明2?种检测方法均可准确定量测定GABA。经t检验比较分析,无统计学差异。采用比色法对桑叶与桑茶进行检测,结果表明不同加工方式会影响GABA含量。比色法方便快捷,更适合大量样品的检测。     

不同乳酸菌对低脂Mozzarella干酪品质的影响

研究不同乳酸菌对低脂Mozzarella干酪品质的影响。采用无盐渍新工艺制作低脂Mozzarella干酪,经测定干酪的脂肪含量为9.85%。通过测定可溶性氮的指标、未融化干酪的质构特性、融化干酪的融化性和感官评定等对其进行研究。结果表明：低脂组的质构、融化性和风味均低于全脂组,但唾液链球菌嗜热亚种（ST）＋德氏乳杆菌保加利亚亚种（LB）＋干酪乳杆菌（LC）3 种乳酸菌组合制作的低脂Mozzarella干酪质构、融化性和风味等指标最接近全脂组。与生产Mozzarella干酪所用的传统乳酸菌组合（ST＋LB）相比,ST＋LB＋LC 3 种乳酸菌的组合,能有效地改善低脂Mozzarella干酪硬度大、融化性小、风味差的缺陷。     

响应面法优化β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖工艺

本文以乳糖为起始原料,在单因素实验的基础上,结合响应面分析法考察加酶量、反应温度、反应时间、反应pH等因素对低聚半乳糖总产率和低聚半乳四糖产率的影响,优化β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖工艺。结果表明,β-半乳糖苷酶法制备低聚半乳糖的最佳工艺参数为起始乳糖浓度300 g/L、加酶量8.25 U/g乳糖、反应温度49 ℃、反应时间16 h、反应pH5.6。在此条件下,低聚半乳糖总产率为14.61%,低聚半乳四糖产率为3.31%。该方法针对性提高高聚合度低聚半乳糖的产率,可为低聚半乳糖的功能性应用及特医食品的研发提供参考。     

硫酸酯化修饰对白背三七多糖抗氧化性能的影响

采用浓硫酸法对白背三七多糖(Gynura davaricata(L.)DC polysaccharides,GDPs)进行硫酸酯化修饰,得到取代度为1.23的硫酸酯化多糖(sulfated GDPs,S-GDPs)。进一步分析GDPs和S-GDPs清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟自由基(·OH)的能力,并考察两种多糖对H_2O_2诱导的红细胞氧化损伤以及·OH诱导的小鼠肝脏线粒体氧化损伤的保护作用。研究表明:GDPs和S-GDPs均具有抗氧化活性,其中S-GDPs清除DPPH(P<0.01)、O2-·(P<0.05)以及·OH(P<0.05)的能力显著高于GDPs;S-GDPs能显著降低红细胞溶血度(P<0.01)及其丙二醛含量(P<0.05),显著降低小鼠肝脏线粒体丙二醛含量(P<0.05)、极显著增加线粒体细胞膜的琥珀酸脱氢酶(SDH)和ATP酶(Na+-K+-ATPase、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase)活性(P<0.01),作用优于GDPs。由此可见,硫酸酯化修饰可以增强GDPs的抗氧化活性。     

微细化-蛋白酶解对蚕蛹蛋白营养价值和功能特性的影响

本实验采用磨球超微粉碎-蛋白酶解的方法改性处理蚕蛹蛋白,研究了改性处理后蚕蛹蛋白的营养价值和 功能特性。结果表明：微细化-酶解改性处理后蚕蛹蛋白的必需氨基酸/非必需氨基酸、必需氨基酸/总氨基酸均达到 联合国粮食及农业组织和世界卫生组织推荐模式标准,营养价值显著提升（P＜0.05）;改性处理后蚕蛹蛋白的水 解度提高了65.62%,溶解度、乳化性和起泡性分别提高了402%、187%和141%;巯基含量增加了57%,二硫键含量 降低了21%;二级结构无规卷曲含量由37.46%增加到91.33%;剂量为25 μg/mL的蚕蛹蛋白改性处理后,促小鼠脾细 胞增殖能力增加了100%,免疫能力极显著提高（P＜0.01）。     

麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定

建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25和SephadexG-15分离,再经过反相高效液相色谱（reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC）分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱（HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS）鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC50为10.98?mg/mL,能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5?kDa的高活性组分,IC50为1.60?mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好,2.5%氨水的洗脱率为98.13%,通过动态离子交换吸附分离后,活性显著提高,IC50为0.30?mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分,经RP-HPLC分离得到8?个组分（峰）,其中1号峰的活性和含量都最高,IC50为0.098?mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z?274.45的丰度比较高,经离子碎片拼接,共有7?种多肽,其中二肽有1?种,三肽有6?种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。     

白酒微量香气成分分析与样品处理应用研究

样品处理和分析技术是白酒微量成分研究的关键,化学测定、纸上层析、薄层色谱或层析、气相色谱、气相色谱-质谱联用、二 维气质联用等分析技术先后应用于白酒的香味成分检测与分析,与分析技术相适应的样品处理方法同步创新和发展,包括动态顶空、 液液萃取、固相微萃取、搅拌棒吸附萃取、超临界二氧化碳萃取、超声萃取、同时蒸馏萃取等技术。从中国白酒中分析鉴定的微量香气 成分达上千种之多,该文深入剖析了白酒中复杂的化学构成,系统论述了样品处理与检测技术研究进展,为进一步揭示白酒重要香 气化合物、特征成分提供借鉴,进而探索白酒复杂的微生物代谢和发酵机理,指导生产中有效调控重要香气成分。     

具有吸附功能的再生丝素蛋白复合膜的制备

本文以埃洛石纳米管(HNTs)对再生丝素蛋白(RSF)进行共混改性,采用流延法制备了一种新型的生物吸附剂HNTs/RSF复合膜。表征结果表明,25%HNTs/RSF复合膜具有良好的机械性能和热稳定性,其中25%HNTs/RSF复合膜的断裂强度和断裂伸长率分别达到(6.67±0.65) MPa和291.17%±16.74%,相比RSF膜分别提高了84.3%和278.2%。通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)和广角X射线衍射(WAXD)分析表明,HNTs降低了RSF膜的β折叠和结晶度。进一步通过亚甲基蓝的吸附实验表明,增加环境的碱性或HNTs含量,均有助于提高其吸附性能,在300 min后基本达到吸附平衡。本文基于此制备了具有高吸附性能和优异机械性能的HNTs/RSF复合膜,在医药化工废水处理和生物吸附等领域具有较高的开发和利用价值。