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目的 在耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Msm)中克隆并表达结核分枝杆菌(M. tuberculosis,Mtb)RD1区蛋白Rv3873,并评价其在结核病(tuberculosis,TB)血清学诊断中的价值。方法 以Mtb H37Rv标准株全基因组DNA为模板,扩增得到rv3873基因完整序列,克隆至分枝杆菌表达载体pMF406,构建重组质粒pMF406-rv3873,电转化至Msm mc2155,加入乙酰胺诱导表达Rv3873同源重组蛋白(mRv3873),利用亲和层析进行纯化,Western blot分析抗原特异性;ELISA法检测27份TB患者和31份健康者血清IgG抗体,以大肠埃希菌表达的Rv3873(r Rv3873)和免疫优势抗原Ag85A作为对照抗原,评价mRv3873在TB血清学诊断中的作用。结果 在Msm中成功表达了重组Mtb蛋白mRv3873,主要以可溶形式存在,经Ni2+亲和层析柱纯化可获得高纯度(95%)的可溶性重组蛋白,蛋白浓度约为2.0 mg/mL;TB患者组血清中抗mRv3873和Ag85A抗原特异性IgG水平均显著高于健康... 相似文献
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《中国生物制品学杂志》2017,(3)
目的在原核体系中表达人颗粒酶B(granzyme B,Gzm B)融合蛋白,并制备Gzm B免疫血清多克隆抗体。方法构建Gzm B原核表达重组质粒p ET32a-Gzm B,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组Gzm B(r Gzm B)蛋白,镍离子螯合亲和层析柱纯化表达产物。以纯化的r Gzm B蛋白为免疫原,皮下多点注射BALB/c小鼠,共免疫3次,分别于免疫后2、4、6周经小鼠尾静脉采血,分离血清,间接ELISA法检测免疫血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平,并确定其抗体最大稀释度,免疫斑点试验检测免疫血清多克隆抗体对Gzm B的特异免疫结合特性。结果质粒p ET32aGzm B经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的r Gzm B蛋白相对分子质量为48 000;纯化的r Gzm B蛋白免疫小鼠血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平随免疫时间延长至第4周达到高峰,随后维持一定水平;抗体最大稀释度为1∶1 600;r Gzm B免疫血清能够特异地结合Gzm B,显示了其免疫结合特性。结论制备了r Gzm B蛋白和Gzm B小鼠免疫血清多克隆抗体,为后续开展Gzm B的靶向杀伤、靶向检测等应用研究奠定了基础。 相似文献
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计算机类课程普遍具有较强的基础性和实践性。但在疫情期间,教学方法以线上教学为主,教师既无法实时监督学生的理论课学习,又不能对学生的实践课程做出面对面的指导和反馈,故如何提高线上教学期间学生的学习积极性和主动性是亟待解决的问题。本文以《计算机网络》课程为例,提出了一种线上混合教学的教学模式,并总结了该教学模式实施的具体措施和方案。 相似文献
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针对新一代英特尔酷睿CPU提出了两种超频模式——定压模式和Offset模式,分析了CPU主频与核心电压、掉电及电压补偿之间的关系,比较了两种模式的优缺点.试验结果表明所提出的方法有效可行. 相似文献
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目的:探索用于治疗肱骨大结节骨折的新型内固定方法,并开发用于力学实验的骨折模型.方法:基于肱骨大结节的解剖形态和骨折分型设计一种用于肱骨大结节骨折内固定的解剖锚钉锁定钢板,并基于Sawbones仿骨材料开发肱骨大结节骨折模型.结果:本文设计的解剖锚钉锁定钢板切迹低、服帖性好,相较于现有的内固定技术具有骨折块复位精度高、对骨折块压迫小以及对血运破坏少等优点.开发的肱骨大结节骨折模型为不同内固定方法的力学测试提供了高度一致且成本低廉的实验样本.结论:本文设计开发的锁定钢板和骨折模型相比现有肱骨大结节骨折内固定技术和实验模型具有一定的优势. 相似文献
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《Planning》2017,(2):20-21
通过田间试验验证50%氯吡·硝·烟嘧水分散粒剂对春玉米田禾本科杂草、阔叶类杂草、莎草的防除效果、杀草谱及安全性,探索出最佳用量和用药时期。试验结果表明:50%氯吡·硝·烟嘧水分散粒剂对禾本科杂草、阔叶类杂草、莎草有较好的防除效果,在玉米3—5叶期,杂草3—6叶期茎叶喷药一次,制剂用药量240~600 g/hm~2,药后15天,对杂草防除效果达66.1%~85.7%;药后30天对杂草防除效果达88.8%~100%;药后45天对杂草防除效果达90.88%~100%,并且随着用量的增加,防效提高;春玉米生长从喷药后到成熟都正常,整个生育期没有药害发生;说明该药剂防除春玉米田杂草时对春玉米是安全的,也未发现对其他非靶标生物产生影响。最佳用量为300~320 g/hm~2; 相似文献
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《Planning》2021,(1):82-86
刑事诉讼管辖制度是刑事诉讼活动承上启下的关键节点,能够优化司法资源配置、确保诉讼程序合法正当。当前我国配套的刑事诉讼管辖权异议制度尚未形成,制约了刑事诉讼管辖制度发挥其应有的作用。一些发达国家的刑事诉讼管辖权异议制度相对完善,其中以英美法系国家和大陆法系国家为两大流派。美国、日本分别是这两大法系国家的代表,两者虽然在刑事诉讼管辖权异议问题的处理方式上存在不同,但其设立管辖权异议制度的初衷则是相同的。我国可以在刑事诉讼法律体系基本框架内,结合司法实践,有选择性地借鉴域外刑事诉讼管辖权异议制度,构建符合我国国情的刑事诉讼管辖权异议制度,实现打击犯罪与保障人权的有机统一。 相似文献
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目的 调查2021年4月浙江省丽水市发生的一起误食野生蘑菇引起神经精神型中毒事件,鉴定毒蘑菇种类,了解中毒症状和救治措施。方法 开展中毒病例的流行病学调查、临床救治分析,毒蘑菇样本现场采集并结合形态学与分子生物学方法鉴定物种。结果 6例患者食用了自己采集并煮汤的蘑菇,于食用后30 min~2 h出现中毒症状,轻症患者恶心呕吐、头晕,重症患者有意识模糊、四肢不自主抽动等症状。轻症患者经过支持性治疗当天痊愈出院,重症患者经过住院治疗顺利恢复。毒蘑菇样本经过形态学结合分子生物学方法鉴定为假残托鹅膏(Amanita pseudosychnopyramis)。结论 该起中毒事件是一起由假残托鹅膏导致的食物中毒事件,国内外文献未见报道。 相似文献