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61.
M. C. ADAMS A. MATOV D. YARAR S. L. GUPTON G. DANUSER & C. M. WATERMAN-STORER 《Journal of microscopy》2004,216(2):138-152
Fluorescent speckle microscopy (FSM) uses low levels of fluorescent proteins to create fluorescent speckles on cytoskeletal polymers in high‐resolution fluorescence images of living cells. The dynamics of speckles over time encode subunit turnover and motion of the cytoskeletal polymers. We sought to improve on current FSM technology by first expanding it to study the dynamics of a non‐polymeric macromolecular assembly, using focal adhesions as a test case, and second, to exploit for FSM the high contrast afforded by total internal reflection fluorescence microscopy (TIR‐FM). Here, we first demonstrate that low levels of expression of a green fluorescent protein (GFP) conjugate of the focal adhesion protein, vinculin, results in clusters of fluorescent vinculin speckles on the ventral cell surface, which by immunofluorescence labelling of total vinculin correspond to sparse labelling of dense focal adhesion structures. This demonstrates that the FSM principle can be applied to study focal adhesions. We then use both GFP‐vinculin expression and microinjected fluorescently labelled purified actin to compare quantitatively the speckle signal in FSM images of focal adhesions and the actin cytoskeleton in living cells by TIR‐FM and wide‐field epifluorescence microscopy. We use quantitative FSM image analysis software to define two new parameters for analysing FSM signal features that we can extract automatically: speckle modulation and speckle detectability. Our analysis shows that TIR‐FSM affords major improvements in these parameters compared with wide‐field epifluorescence FSM. Finally, we find that use of a crippled eukaryotic expression promoter for driving low‐level GFP‐fusion protein expression is a useful tool for FSM imaging. When used in time‐lapse mode, TIR‐FSM of actin and GFP‐conjugated focal adhesion proteins will allow quantification of molecular dynamics within interesting macromolecular assemblies at the ventral surface of living cells. 相似文献
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青藏铁路西格二线混凝土冻融试验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
由于工期的要求,青藏铁路西格增建二线必须进行冬期施工。根据工程状况,分析了混凝土受冻的破坏机理,针对施工环境及对混凝土设计强度和要求,进行了大量冻融试验分析,对引气剂、水胶比、砂率、粉煤灰掺量等原材料与混凝土含气量的关系及其混凝土搅拌温度与静停时间等对混凝土性能的影响进行了分析与技术论证,确保了该线冬期混凝土施工顺利进行。 相似文献
63.
影响碾压混凝土抗裂性能的因素很多,本文主要从水泥矿物成分、石粉含量、掺和料(氧化镁等)、骨料特性(弹性模量)及砂率等方面影响因素开展试验研究,分析各因素对碾压混凝土抗裂性能的影响效果。试验结果表明,砂率和石粉含量均存在碾压混凝土抗裂能力最大的最优含量;掺入适量的氧化镁掺和料和合理增加水泥熟料中的C,S和C4AF两种矿物成分含量,对提高碾压混凝土的抗裂能力非常有利;骨料的弹性模量是影响混凝土弹性模量的重要因素,使用低弹性模量骨料可以大大降低混凝土的弹性模量,增大极限拉伸值,提高混凝土的抗裂能力。 相似文献
64.
水库淤积初步平衡问题 总被引:2,自引:0,他引:2
水库淤积平衡问题对于确定淤积危害程度、可持续利用标准等都非常重要。本文通过分析大量已建、在建和规划水库淤积情况,对水库淤积初步平衡后淤积变化趋势与设计淤积标准等问题进行了讨论和商榷。研究表明,水库淤积初步平衡后,兴利库容淤积发展仍然很快,库尾河床与水位抬升仍在继续,并未最终稳定。水库淤积平衡应该更加注重兴利库容淤积情况和库尾河床与水位抬升趋势,仅仅关注总淤积量变化情况是不够的。从区域长远利益考虑,大江大河上的水库设计淤积年限还应大大加长。 相似文献
65.
66.
67.
The new method of calculation of intermolecular distribution functions is used to calculate various thermodynamic properties of diatomic substances (oxygen, nitrogen, ethane). Good agreement is demonstrated between the calculation and experimental data. 相似文献
68.
根据双点后方交会的图形特点和已知条件,列出了方程组,推导出了双点后方交会直接计算座标的简便公式,同时求出了精度计算公式,以供测量人员参考 相似文献
69.
本文应用声波时差测井资料判别划分地层压实异常段,并结合其它测井资料对盖层进行质量评估,寻找油气有利聚集带(段),为勘探提供有利区域和评价依据。 相似文献
70.
用光谱辐射计测量大气光学厚度的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文给出了用光谱辐射计VF921-256测量大气光学厚度的实验结果,并对其与太阳辐射计DTF-1的同步测量结果进行了比对。实验结果表明:在比较好的大气条件以及对VF921-256测量中所应用的参考板的非朗伯特性进行校正后,两种方法的测量结果符合得较好。因此,在一定的误差范围内,VF921-256可以用于辐射校正中对大气光学厚度的同步测量。最后,本文对上面两种方法各自的测量误差也进行了进一步的分析讨论。 相似文献