儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用

采用分光光度计法测定酶液加入量、底物浓度、温度、pH 值对酶活力的影响,确定最适反应条件。在30℃、pH6.8 的Na2HPO4-NaH2PO4 缓冲体系中,采用酶动力学方法研究儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制效应。结果表明：反应最适条件为酶液加入量0.5mL、底物浓度2mmol/L、温度30℃、pH6.8。儿茶素对马铃薯酪氨酸酶有抑制作用,抑制率达到50% 的儿茶素质量浓度(IC50)约为0.27mg/mL;Lineweaver-Burk 图显示儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用表现为竞争型抑制,抑制常数(KI)为0.16mg/mL。     

对香豆酸、阿魏酸和低聚糖阿魏酸酯对酪氨酸酶的抑制效果

通过测定酶的稳态活力、迟滞时间和动力学参数,研究对香豆酸、阿魏酸及低聚糖阿魏酸酯对酪氨酸酶的抑制效果。结果表明,3种物质对酪氨酸酶单酚酶活性均有抑制作用,其中对香豆酸的抑制作用最强,其次为低聚糖阿魏酸酯和阿魏酸。对香豆酸、低聚糖阿魏酸酯和阿魏酸对单酚酶的IC_(50)值分别为0.75,3.20,9.30 mmol/L。对香豆酸和阿魏酸抑制二酚酶活性,IC_(50)值分别为4.3,12.7mmol/L;但低聚糖阿魏酸酯对二酚酶活力没有影响。对香豆酸能明显延长单酚酶反应的迟滞时间,阿魏酸影响很小,而低聚糖阿魏酸酯则缩短迟滞时间。动力学研究结果显示,阿魏酸和低聚糖阿魏酸酯对单酚酶的抑制作用表现为混合性抑制,而对香豆酸为竞争性抑制。     

玫瑰细胞露的化学成分及活性研究

玫瑰细胞露是玫瑰花在水蒸气提取玫瑰精油后产生的玫瑰花水溶液。本文针对玫瑰细胞露进行了植物化学分析和生物活性分析,通过GC-MS定量分析结合HPLC分析发现玫瑰细胞露主要化学成分包括：芳樟醇,苯乙醇,香茅醇,α-红没药醇,山奈酚-3-O-芦丁苷,同时对细胞露的酪氨酸酶抑制活性,抗氧化活性,抗菌活性进行了系统评价。结果表明：细胞露的酪氨酸酶抑制活性为IC50=2.45 mL,DPPH抗氧化活性为IC50=2.58 mL,ABTS自由基清除活性为3.43 mL;另外,细胞露具有较强的抗菌活性,对具核梭杆菌有较强的抑制率,最低抑菌浓度为MIC=32 μL,最低杀菌浓度MBC=125 μL。为玫瑰细胞露在化妆品和食品行业中的应用提供理论基础。     

体外消化对藜蒿叶多酚含量及抗氧化活性的影响

本文研究了藜蒿叶提取物在模拟体外消化过程中酚酸含量、抗氧化活性以及对酪氨酸酶活力抑制率的变化。研究表明,经过模拟体外消化后藜蒿叶提取物中的绿原酸、1,5-双咖啡酰奎宁酸、3,4-双咖啡酰奎宁酸、3,5-双咖啡酰奎宁酸、4,5-双咖啡酰奎宁酸5种酚酸含量均显著性降低。总酚含量和DPPH、FRAP、ABTS抗氧化活性经过模拟体外消化后均显著性增加。消化后粗提物和纯化样总酚含量分别升高了73.57%、23.79%,DPPH抗氧化能力分别增强了36.17%、53.29%,FRAP抗氧化能力分别增强了28.71%、15.45%,ABTS清除自由基能力分别增强了163.67%和49.50%。此外,藜蒿叶粗提物对酪氨酸酶活力的抑制率在体外消化过程中也显著性增加,消化后粗提物的抑制率可达到49.88%。从而可有效抑制黑色素生成,具有较好的美白潜力。因此,藜蒿叶提取物经体外消化后具有较好的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活力的能力,有望应用于美白产品的开发,该研究为藜蒿茎加工副产物-藜蒿叶的开发提供了借鉴。     

皮肤化学美白剂抑制酪氨酸酶活性的研究

采用化学评价法,即通过测定皮肤美白剂对酪氨酸酶的活性抑制率,对9类13种皮肤美白剂的活性进行了评价与比较,排出了抑制次序;穷乡僻壤 制了各美白剂浓度与其酪氨酸抑制率关系曲线;多数美白剂呈钟形曲线;得到了各美白剂的ICmax及IC50;探讨了酪氨酸酶抑制率与美白效果评价的关系。     

天然产物增白作用的初不筛选

筛选具有增白作用的天然产物,为美白化妆品的开发提供了依据。通过体外实验比较28种天然产物对酪氨酸酶的抑制作用的活性高低,初步判断增白活性大小,桔梗、威灵仙、地榆、柳叶、红景天、土茯苓、木瓜、丹参、白芷、红参、银杏、防风等具有较高的酷氨酸酶抑制率。所以,上述天然产物适合于美白化妆品的开发利用。     

乌发组方要素对酪氨酸酶活性的影响研究

考查了正常人体皮肤范围内pH在不同浓度乙醇、二甲基亚砜水溶液以及中药薄荷水提物中对酪氨酸酶活性作用的影响。实验结果表明酪氨酸酶在pH5 8～ 7 0之间对黑色素合成催化活性较高 ,其中pH在 6 8时活性最大 ;不同浓度乙醇和二甲基亚砜水溶液对酶活性均呈浓度依赖性抑制 ;而薄荷水提物对酶活性呈剂量依赖性激活作用。在实验浓度范围内酶激活率达 164 8% ;薄荷水提物对酶动力学曲线说明 ,该中药水提物中含有的活性物对酪氨酸酶具有竞争性和非竞争性双重性激活作用。研究结果对美白、乌发功能化妆品研制提供了理论指导和技术支撑     

Tyrosinase-glucose dehydrogenase substrate-recycling biosensor: A highly-sensitive measurement of phenolic compounds

Mushroom tyrosinase and glucose dehydrogenase from Acinetobacter calcoaceticus were immobilized in poly(vinyl)alcohol membranes and coupled with a Clark-type oxygen electrode to give a substrate (analyte) regenerating cycle for monitoring of nanomolar concentrations of phenolic compounds. In this way the response for catechol, phenol, p-cresol, p-chlorophenol and p-acetamidophenol was amplified by a factor of 450, 300, 240, 150, and 140, respectively. The resulting detection limit for catechol and phenol is 0·6 nmol dm⁻³ and 0·9 nmol dm⁻³, respectively. The measuring linear range for phenol obtained by the amplified electrode extends from 1 to 400 nmol dm⁻³. The comparison with the chemical (ascorbic acid) regeneration of the phenolic compounds demonstrates the efficiency of the enzymatic procedure. The biosensor can be used for monitoring of phenolic compounds in environmental or industrial samples.     

咖啡酸、阿魏酸和香草酸对酪氨酸酶活性的影响

目的:研究咖啡酸、阿魏酸和香草酸对酪氨酸酶活性的影响, 寻找酪氨酸酶抑制剂, 从而为治疗色素增加性皮肤病筛选药物。方法:酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定药物干预前后酪氨酸酶活性, 求出酪氨酸酶抑制率。采用Lineweaver-Burk 双倒数法制得酶动力学曲线, 推断抑制类型。结果:3 种试药中仅香草酸对酪氨酸酶具有抑制作用, 与氢醌比较无显著差异(P >0.05), 咖啡酸、阿魏酸对酪氨酸酶具有上调激活作用。结论:香草酸为良好的混合型酪氨酸酶抑制剂。     

Polyphenol oxidase in reverse micelles of AOT/cyclohexane: A thermostability study

Polyphenol oxidase catalysing the oxidation of 4‐methylcatechol in reverse micelles of AOT/cyclohexane had an optimum temperature 15 °C higher than in aqueous medium. However, the enzyme lost stability when it was preincubated in reverse micelles in the absence of substrate regardless of the temperature although the effect was more pronounced at higher temperatures. The thermostability of polyphenol oxidase is higher when it is injected in reverse micelles containing buffer than when injected in initially empty micelles. Moreover, the thermostability of polyphenol oxidase in reverse micelles is strongly dependent on the size of the micelles, the bigger the micelle the greater the stability. The thermoinactivation of the enzyme follows a monomolecular process characteristic of a conformational change so the protein is protected by ligands towards inactivation. p‐Nitrophenol as competitive inhibitor and acetyl tyrosine ethyl ester as alternate substrate increase the half‐life of the polyphenol oxidase by about 2.5 and 4 times respectively. This finding may allow the use of the enzyme at higher temperatures with a gain in its stability. © 2001 Society of Chemical Industry