产胞外耐高温纤维素酶细菌的获得和酶的纯化及性质研究

对从高温堆肥中分离得到的一株产胞外耐高温纤维素酶的细菌进行了生理生化鉴定,结果显示其属于嗜热脂肪芽孢杆菌。对其所产纤维素酶进行了分离纯化,该酶反应的最适温度约为66℃,最适pH值为7.0,至少有8个亚基。     

压电基因传感器检测芽孢杆菌靶序列研究

在石英晶体微天平(QCM)上用生物素亲和素法和自组装法2种不同的方法固定寡核苷酸探针,构建压电基因传感器,对芽孢杆菌靶序列进行实时检测。结果表明:生物素亲和素法固定探针效果更好,靶序列浓度为0.05~0.5μmol/L时,有很好的线性关系,线性回归方程为Y=93.88X+10.88(R=0.989 0,N=6,P<0.001),非线性误差为±4.7%。该传感器特异性较好,能够识别错配3个碱基的序列。     

基于高含油废水降解的产脂肪酶菌株的 筛选及发酵工艺优化

为了筛选高产脂肪酶菌株并探究其对高含油废水的降解能力,采用传统的微生物筛选法从餐厨废水中分离筛选菌株,考察菌株对高含油废水（油脂含量20 g/L）的油脂降解率和产脂肪酶酶活,并对产脂肪酶酶活较高的菌株进行鉴定。采用单因素实验和响应面实验对鉴定菌株发酵产脂肪酶的工艺条件进行优化。结果表明：从餐厨废水中筛选出3株细菌、2株酵母菌,其中2株细菌可在高含油废水中快速生长代谢,油脂降解率和产脂肪酶酶活均较高,经鉴定1株为解淀粉芽孢杆菌（Bi）,1株为鲁氏不动杆菌（Bu）;Bi产脂肪酶最优发酵工艺条件为pH 6.69、氯化钠含量301 g/L、蛋白胨含量6.01 g/L;Bu产脂肪酶最优发酵工艺条件为pH 5.07、氯化钠含量6.10 g/L、蛋白胨含量9.38 g/L;在最优发酵工艺条件下,Bi和Bu产脂肪酶酶活分别为（222.83±0.91）U/mL和（231.50±2.28）U/mL,优化后的Bu产脂肪酶酶活甚至高于初始脂肪酶酶活更高的Bi。综上,2株细菌具有高含油废水降解能力,具备广阔的应用前景。     

Alicyclobacillus属细菌及其在生物冶金中的研究进展

脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus)属细菌广泛存在于酸性果汁饮料、矿山、热泉和火山附近土壤等酸热环境中,具有嗜酸耐热的典型特征。多项研究表明该属细菌具有广泛的底物利用特性,可以利用有机物进行异养生长,也可以氧化Fe2+、元素硫以及硫化矿等进行自养生长,在厌氧或微缺氧的条件下还可以还原Fe3+以及针铁矿等铁的沉淀物中的Fe?,因此该属细菌在生物冶金中具有巨大应用潜力,而目前关于该属细菌在生物冶金中的研究报道很少。对Alicyclobacillus属细菌的分离、生理生化特征以及在生物冶金领域中的国内外研究现状进行概述和分析,并展望了未来该属细菌在生物冶金领域中的研究方向。     

食品级高产亮氨酸氨肽酶重组Bacillus subtilis的构建和发酵优化

为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B. subtilis。首先通过Cre/lox系统敲除B. subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168 (dal)^-。其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal (Amp^R,Ori)-并转化至BS168 (dal)^-中得到食品级重组菌BS168 (dal)-/p MA5-lap-dal (Amp^R,Ori)^-。该工程菌发酵产LAP无需添加抗生素且不含抗性基因。对该菌株进行5 L发酵罐条件优化,在转速300 r/min、温度33℃、p H 7. 0、分阶段补料的条件下,酶活最高达到302 U/m L。结果表明,构建的食品级重组B. subtilis产LAP具有潜在的工业应用前景。     

表达谷氨酸脱羧酶重组枯草芽孢杆菌的构建及其发酵条件的优化

谷氨酸脱羧酶（GAD）是生物合成γ-氨基丁酸（GABA）的关键酶,本研究通过基因工程构建了一株产GAD的重组枯草芽孢杆菌,并对其产GAD的发酵条件进行优化。分别通过单因素法、正交实验、极差分析和响应面法确定了最佳培养基成分（g/L）及发酵条件为:蔗糖23.5,豆粕10、乙酸铵为8.5、磷酸二氢钾4.1、七水硫酸镁0.5,p H7.0,培养温度37℃。在优化条件下GAD酶活达到0.413 U/m L,与优化前的GAD酶活0.143 U/m L相比,酶活提高了188.8%。本研究有助于后续开发枯草杆菌生产γ-氨基丁酸的工艺,以克服现在γ-氨基丁酸生产工艺中,大肠杆菌安全性的问题和乳酸菌成本过高的问题。      

胶质芽孢杆菌液体发酵产孢条件的优化

以提高胶质芽孢杆菌液体发酵产孢量为目的,以血球计数板计数芽孢数量,以产孢量为衡量指标,设计单因素实验和正交实验,对胶质芽孢杆菌液体发酵培养条件进行优化研究。优化后的发酵工艺参数为:接种量5%,起始pH7.5,碳酸钙用量6g/1000mL,装液量70mL/250mL三角瓶,转速250r/min,发酵前24h温度为32℃,然后升高温度到37℃,继续发酵12h。按优化条件培养做生长曲线进行验证,培养36h血球计数板计数芽孢数量为9.3×109cfu/mL。      

胶质芽孢杆菌HJ07的UV与NTG诱变育种及其对铝土矿浸矿效果

以从河南铝土矿样筛选出的一株胶质芽孢杆菌HJ07为出发菌株,对其进行紫外(UV)与亚硝基胍(NTG)诱变育种及铝土矿浸矿脱硅研究.分别通过紫外线照射120 s与采用质量浓度为600 mg·L^-1的亚硝基胍处理,出发菌株HJ07的致死率分别达到89%与90%,正突变率分别达到16.5%与18.7%.从突变菌株中筛选所得的两株菌种UV-2与NTG-5的生长代谢活性与脱硅能力明显比出发菌株高.在铝土矿浸出体系中,UV-2与NTG-5达到生长稳定期的时间比HJ07分别缩短了48 h与24 h,且生长稳定期具有更大的细菌浓度.浸矿12 d后,UV-2与NTG-5菌株浸出液中SiO2的质量浓度分别比HJ07提高了约25.6%与12.5%,且达到浸出终点的时间分别缩短了3 d和2 d.UV-2与NTG-5菌株较出发菌株HJ07具有更强的产酸与产胞外聚合物的能力.被UV-2菌株作用后的铝土矿表面的溶蚀程度更加显著,矿物表面形成了明显的菌胶团.     

罗非鱼加工废水微生物除臭处理的研究

以米曲霉、枯草芽孢杆菌、生物除臭剂为供试菌,对海南罗非鱼加工废水进行了生物除臭研究。考察了除臭过程中废水蛋白质残留量、挥发性盐基氮和pH的变化。结果表明,废水中加入3%葡萄糖后,用枯草芽孢杆菌处理的除臭效果最好。废水中蛋白质的含量从对照的4.5g/100mL降低到0.8g/100mL;挥发性盐基氮含量从对照的0.91g/100mL下降到0.04g/100mL,下降率为95%。本文为罗非鱼加工废水的处理和资源化,探讨出一种新的途径。