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目的构建CTP-OD-HA融合基因原核表达质粒,表达并纯化融合蛋白,并检测其在人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株中的转导活性及胞浆定位。方法分别将胞浆转导肽(CTP)、寡聚化区域(OD)基因和流感病毒血凝素抗原表位(HA)片段依次连接入pET32a(+)质粒,构建重组原核表达质粒pCTP-OD-HA,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经亲和纯化、Western blot验证、肠激酶切割、目的蛋白回收和FITC标记后,将FITC-CTP-OD-HA融合蛋白作用于K562细胞,观察其转导活性及细胞定位。结果重组原核表达质粒pCTP-OD-HA经酶切及测序鉴定,证明构建正确。37℃,1 mmol/LIPTG诱导4h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的35%,纯化后纯度达95%以上。FITC-CTP-OD-HA融合蛋白在K562细胞中具有高转导活性和显著的胞浆定位特性。结论已成功构建CTP-OD-HA融合基因原核表达质粒,并高效表达了目的蛋白,为进一步研究其在CML信号转导通路中的作用,阐明CML的发病机制及探讨蛋白肽在CML中的治疗策略奠定了基础。 相似文献
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在我国煤矿120系列掘进机使用较多,针对该系列掘进机在煤矿井下使用中存在的具体问题,提出了掘进机喷雾系统与装载机构改进的几种方法和实施措施,经过在平煤集团一、四等十个生产单位的井下现场使用,达到了预期的效果,取得了良好的经济效益。 相似文献
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介绍了WSN的节能技术及对节点调度机制进行分析。对各种节能方案进行了分析,提出无线传感网络节能应重点关注无线节点睡眠调度。 相似文献
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使用C18固相萃取小柱,系统研究了食醋中对羟基苯甲酸酯固相萃取预富集方法,考虑影响回收率的四个主要因素,即上样速率、洗脱溶剂、洗脱溶剂用量、洗脱速率,利用正交试验进行萃取条件优化,成功地确定上样速率4mlomin-1,洗脱溶剂为甲醇,洗脱溶剂用量2ml,洗脱速率2mlomin-1为优化的萃取条件,此时得到对羟基苯甲酸甲酯(MPB)、对羟基苯甲酸乙酯(EPB)、对羟基苯甲酸丙酯(PPB)、对羟基苯甲酸丁酯(BPB)的回收率分别为在96.5%~120%范围内,相应化合物的液-液萃取回收率为92.9%~120%,表明固相萃取在测定对羟基苯甲酸酯中可以取代液-液萃取。 相似文献
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马齿苋乙醇提取物对3种植物油的抗氧化活性比较 总被引:2,自引:1,他引:1
用一定浓度的乙醇浸提马齿苋活性成分,用分光光度法测定醇提物中总黄酮的质量分数为53.67%。将不同浓度的马齿苋乙醇提取物添加到花生油、核桃油和芝麻油中,定期测定油脂的POV值以此来评价其抗氧化性。结果表明:马齿苋乙醇提取物在花生油中添加量为0.03%、核桃油中为0.01%及芝麻油中为0.02%时其抗氧化活性最大,在此最佳添加量下其抗氧化活性优于0.02%的维生素E。马齿苋乙醇提取物的抗氧化活性与植物油的种类和在其中的溶出度有关。马齿苋乙醇提取物是一种很有潜力的天然、安全、高效的抗氧化剂,研究结果可为利用马齿苋乙醇提取物及其功能性食品的开发提供科学依据。 相似文献
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以草莓为研究对象,用浓度为0.10%、0.20%、0.30%的马齿苋多糖、马齿苋水提物、马齿苋醇提物、马齿苋丙酮提取物进行处理,研究草莓的低温防腐保鲜,并和山梨酸(0.02%)处理草莓果实的效果相比较。结果表明,马齿苋提取物具有良好的抑制细菌效果,在所试条件下其防腐保鲜作用在第4天后比山梨酸好,第11天后山梨酸反而加快了草莓果实的腐烂。在6℃温度左右,0.02%的马齿苋多糖防腐保鲜效果最好,0.02%醇提物为第二,0.01%丙酮提取物第三,0.03%水提物为第四。第14天时处理的其处理草莓的腐烂指数分别为28.6%、35.3%、46.3%和46.4%,此时0.02%山梨水处理的草莓腐烂指数为78.6%,对照组为71.4%。因此,马齿苋提取物在草莓果实防腐保鲜中具有良好的应用前景。 相似文献
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提高内燃机气门杆端的耐磨性,通常采用感应热处理达到要求,对杆端的技术要求的指标为硬度、淬火长度或深度、晶粒度以及杆端变形等。介绍了几种淬火感应器的特点与选择原则,同时指出了过程控制、常见缺陷,提出了其以后的发展方向。 相似文献