谷氨酸全营养流加发酵新工艺

全营养流加主要是选择适当的全营养培养,在合适的时间进行营养的补加,通过补加的营养来弥补菌体因生长代谢而消耗的营养物质,同时也可以降低发酵培养基的浓度,避免富营养对于菌体活力的抑制。因此,采用全营养流加策略能够解决L-谷氨酸发酵后期菌体活力不足和产酸能力下降等问题。实验结果表明,最佳流加条件为从发酵2 h开始流加,持续24 h流加体积分数为60%的流加培养基。在此条件进行L-谷氨酸发酵,生物量(OD 600)达到了66,提升了29.4%,菌体转型时间提前了2 h,L-谷氨酸产量为168 g/L,提高了22.6%,乳酸含量为3.1 g/L,降低了13.8%,丙氨酸含量为2.06 g/L,降低了17.6%,糖酸转化率为63%,提高了1.5%。全营养流加发酵对于加快菌体转型,提高菌体活力、谷氨酸产量及糖酸转化率均有积极作用。     

谷氨酸棒杆菌苏氨酸脱氨酶基因敲除及对L-亮氨酸发酵的影响

L-异亮氨酸是L-亮氨酸发酵的主要副产物,L-异亮氨酸的积累对L-亮氨酸的发酵及提取均产生不利影响。采用基因重组技术敲除L-亮氨酸产生菌-谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)TGL8207的苏氨酸脱氨酶基因ilvA,构建了ilvA缺失株谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)TGL8207 ilvA。发酵结果显示:ilvA基因缺失对TGL8207 ilvA的生长影响很小。与供试菌比较,TGL8207 ilvA的L-亮氨酸产量和糖酸转化率分别提高了8.4%和1.9%。     

L-亮氨酸的发酵中试生产

基于天津科技大学代谢控制发酵研究室亮氨酸发酵法生产小试基础上,进行的中试工作。在5 L罐小试基础上连续3批进行300 L、5 m3发酵罐规模的中试扩大试验,历时12个月,产酸率达2.5%以上,最高达2.65%。     

B族维生素对大肠杆菌发酵生产乳清酸的影响

为提高大肠杆菌发酵乳清酸的产率和糖酸转化率，以大肠杆菌(Escherichia coli)Ora-6为供试菌株，在原有培养基的基础上，通过单因素试验及正交试验探究维生素B₁、维生素B₃、维生素B₅、维生素B₆、维生素B₇、维生素B₁₂几种关键B族维生素对菌体生长及产酸能力的影响，并确定最佳组合添加量为维生素B₁ 6.8 mg/L,维生素B₃ 4.8 mg/L,维生素B₅ 4 mg/L,维生素B₆ 3.4 mg/L,维生素B₇ 1.4 mg/L,维生素B₁₂ 4 mg/L。在此条件下，经5 L发酵罐验证对比，此时优化后的培养基菌体量(OD₆₀₀)、乳清酸产量、糖酸转化率分别为134.32、121.41 g/L和25.73%,较原始培养基分别增长了13.16%、15.47%、12.96%。同时研究确定了B族维...     

磷酸盐和pH值协同调控大肠杆菌发酵合成5-羟基色氨酸

为了提高大肠杆菌合成5-羟基色氨酸能力，该研究设计构建了pSTV28-TPH150过表达质粒，增强了羟化酶基因TPH150的表达，以HTP10为出发菌株(代谢工程实验室保藏，专利号：CN202110714155.1),电转化pSTV28-TPH150质粒得到菌株HTP10-1,发酵结果显示，存在副产物L-色氨酸积累过多，质粒不稳定等问题，因此在初始发酵工艺的基础上，通过设计4个pH梯度进行发酵对比试验和4种不同磷酸二氢钾流加策略来探究最适发酵工艺。实验结果表明，在菌株HTP10-1发酵pH值为6.7,并于发酵培养基中添加1 g/L磷酸二氢钾，葡萄糖补料瓶中添加3 g/L磷酸二氢钾时，菌体比生长速率达到最优，发酵结束后5-羟基色氨酸积累量最高达到5.46 g/L,副产物L-色氨酸积累量减少到1.37 g/L,质粒丢失率较对照组减少32%,极大地提高了菌株HTP10-1的质粒稳定性，验证了磷酸盐与发酵pH调控菌体生长的可行性，对质粒工程菌的发酵控制具有重要参考意义。