响应面法优化大豆分离蛋白复合酶法糖基化交联改性工艺研究

大豆分离蛋白(SPI)用木瓜蛋白酶适度水解再与氨基葡萄糖在转谷氨酰胺酶的作用下进行糖基化交联改性,制备高乳化性能SPI。在单因素实验基础上以氨基葡萄糖与SPI质量比、SPI水解度和交联反应时间为自变量,以乳化活性为响应值,利用响应面法对SPI糖基化改性条件进行优化。结果表明:最佳反应条件为氨基葡萄糖与SPI质量比0.96∶1、SPI水解度0.64%、交联反应时间3.29 h。在最佳反应条件下,改性SPI乳化活性为16.97 m2/g,是未改性SPI乳化活性的3.25倍,乳化稳定性提高了35个百分点,达到96%。     

骨膳食营养补充剂研究进展

随着年龄的增加,骨质疏松及其引起的骨折和骨关节炎患病率逐步增高,严重的危害老年人的健康。对于这类疾病要从根本上解决问题,就是要早预防,早干预,预防重于治疗,而不是仅靠药物和手术治疗。营养干预是传统骨关节炎治疗方法的补充和理念的更新。除了生活方式的干预,营养干预对于调节骨与软骨组织中合成代谢和分解代谢的平衡,调节免疫反应等起重要作用,具有战略意义。而且营养干预获益多,副作用小,费用低,在每天膳食增加一些营养素很容易获取。对全骨营养素类骨营养补充剂、氨基葡萄糖和硫酸软骨素类骨营养补充剂、胶原蛋白肽类骨营养补充剂等骨营养补充剂的研究进展进行综述,希望对相关研究提供有益借鉴。     

产N-乙酰氨基葡萄糖的工程菌构建、发酵及应用研究进展

N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）是一种氨基葡萄糖（GlcN）衍生物,属于功能性氨糖类化合物,广泛应用于食品、医药及化妆品领域,市场前景非常广阔。传统的GlcNAc生产方法主要采用甲壳素水解法,该方法在原料供应、环境保护及产品安全方面存在许多潜在问题,构建高效生产GlcNAc的基因工程菌可以解决这些问题。该文着重综述了生产GlcNAc基因工程菌的构建及发酵方面的研究进展,并对GlcNAc的应用进展进行了介绍,并对如何利用工程菌提升GlcNAc产量进行了展望。     

硫酸氨基葡萄糖联合参麦注射液治疗膝骨性关节炎的疗效研究

目的: 探讨硫酸氨基葡萄糖联合参麦注射液治疗膝骨性关节炎的疗效。方法: 取膝骨性关节炎患者120例作为研究对象,随机分为联合组和对照组,每组各60例。对照组单纯给予硫酸氨基葡萄糖治疗,联合组给予硫酸氨基葡萄糖（0.5 g/次,3次/天）联合参麦注射液（每次每膝5 mL,每周注射1次）治疗,连续治疗6周,观察两组患者临床疗效。结果: 联合组临床治疗总有效率为91.67%,对照组为78.33%,两组差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,联合组患者膝关节骨性关节炎自评量表（WOMAC）改善较对照组明显,差异有统计学意义（P<0.05）;联合组和对照患者治疗不良反应发生率无显著差异;治疗后,两组患者血清IL-17、IL-18浓度水平明显下降,转化生长因子β（TGF-β）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）、成纤维细胞生长因子2（FGF-2）浓度水平明显上升;联合组患者血清IL-17、IL-18浓度水平下降明显优于对照组,TGF-β、IGF-1、FGF-2浓度水平上升明显优于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:联合组治疗膝骨性关节炎的疗效显著增加,不良反应发生率较低,其作用机制可能与降低血清IL-17、IL-18浓度水平和提高TGF-β、IGF-1、FGF-2浓度水平有关。     

2-氨基葡萄糖荧光探针的制备及肿瘤靶向性的研究

目的: 制备2-氨基葡萄糖-FITC荧光探针和2-氨基葡萄糖-ICG02近红外荧光探针,从细胞水平和动物水平研究荧光探针的靶向性。方法: 本实验选用氨基葡萄糖配体作为“导向基团”, 以谷氨酸为连接2-氨基葡萄糖和荧光染料FITC/近红外染料ICG02的Linker,制备2-氨基葡萄糖-荧光染料FITC/近红外染料ICG02探针,用TLC、UV-vis和LC-MS鉴定2-氨基葡萄糖荧光探针的化学结构,通过细胞和动物实验研究荧光探针的靶向性。结果: 实验结果证明已成功合成2-氨基葡萄糖-谷氨酸-荧光染料FITC/近红外荧光探针,并可靶向肿瘤组织,延长其在肿瘤部位的滞留时间。结论:细胞和动物实验表明在葡萄糖转运蛋白受体-配体作用的介导下,2-氨基葡萄糖荧光探针可靶向葡萄糖转运蛋白受体高表达的肿瘤细胞和组织。     

N-半胱氨酰基-1,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖的合成研究

以2-氨基-β-D-葡萄糖盐酸盐为起始原料,与苯甲醛反应得到氨基保护的中间体苯甲醛缩-β-D-氨基葡萄糖(1),1以乙酸酐-吡啶乙酰化、盐酸-乙酸乙酯溶液脱去氨基保护基合成重要中间体2-氨基-1,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-葡萄糖盐酸盐(2)。2与保护氨基酸Boc-Cys(CH2-U)-OH在缩合剂DIC/HOBt/DIEA的作用下偶联,合成目标产物N-(N-叔丁氧羰基-S-5'-尿嘧啶甲基半胱氨酰基)-1,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖(3)的合成3,总收率为40.0%。产物结构经1HNMR、MS、IR得以确证。     

分子动力学模拟与热稳定性实验相结合分析乙酰氨基葡萄糖与脂肪酶的相互作用机制

该研究采用分子动力学模拟方法研究南极假丝酵母脂肪酶B（CaLB）与乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）的相互作用,以及通过热稳定性实验论证GlcNAc对CaLB的保护效果。结果表明：在323.15 K下,CaLB与GlcNAc的静电势能与Lennard-Jones（L-J）在前20 ns模拟时间中显著下降,CaLB-250 mmol/L-GlcNAc模型在0~100 ns时,静电势能和L-J势能分别下降了3350 kJ/mol和2791 kJ/mol,二者间的氢键数从0增加到115左右,CaLB与GlcNAc的可及面积（SASA）接近于50 nm2。均方根偏差（RMSD）和均方根波动（RMSF）数据表明：游离酶（Free-CaLB）模型在323.15 K和353.15 K下的RMSD分别为0.2617 nm和0.3473 nm,而不同浓度CaLB-GlcNAc模型的RMSD均小于Free-CaLB的数值,且CaLB-GlcNAc组装体模型区域（Val 147-Leu 155）波动明显小于Free-CaLB模型,说明GlcNAc可以减弱Free-CaLB的韧性而有效维持脂肪酶的原始结构。热稳定性实验表明：Free-CaLB及CaLB-GlcNAc在60 ℃下处理2.0 h,Free-CaLB的残余酶活力仅为22.26%,而CaLB-GlcNAc的残余酶活力为52.11%。综上,乙酰氨基葡萄糖可以提高游离脂肪酶的热稳定性。     

N-乙酰氨基葡萄糖对乙醇致肝组织损伤的保护作用及其机制

目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制.方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时间,HE染色观察模型组和干预组小鼠肠道组织和肝组织的病理损伤程度.结果:与模型组比较,GlcNAc低、中、高剂量组小鼠的开始醉酒时间逐渐延长(P<0.05或P<0.01),醉酒持续时间逐渐缩短(P<0.05或P<0.01).组织切片观察,模型组小鼠肠道组织结构受损,腺体萎缩,管腔内可见脱落的肠黏膜细胞,肝组织多数细胞胞膜破裂,少许细胞核破碎、溶解消失,肝小叶中央静脉及其周围肝窦明显扩张,肝细胞索间充满淡红色嗜酸性均质状物,周围组织结构疏松;GlcNAc干预组小鼠肠道及肝组织损伤均有不同程度的减轻,且随着GlcNAc剂量的增加,肠道组织和肝组织损伤逐步减轻.结论:GlcNAc可不同程度减轻乙醇对肠道组织和肝组织的损伤,GlcNAc对肝脏的保护作用可能与GlcNAc稳定肠黏膜屏障作用有关.     

氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖的测定方法

对国内外文献报道的几种甲壳素及壳聚糖测定中常用的还原糖测定方法进行了比较。结果表明,DNS法和改良Schales法较为适合对氨基糖和乙酰氨基糖混合体系的测定,其中DNS法的测定范围为还原糖含量200～1000μg/mL,改良Schales法的测定范围为还原糖含量10～80μg/mL。     

硫酸氨基葡萄糖非酶褐变的初步研究

将硫酸氨基葡萄糖样品分别在60、70、75、80℃下加热10h,测定加热过程中褐变指数、5- 羟甲基糠醛含量、硫酸氨基葡萄糖含量、pH 值的变化,用来表征非酶褐变进行的程度,将结果应用零级动力学方程拟合。结果表明,随着加热温度升高、时间延长,褐变指数、5- 羟甲基糠醛的含量逐渐增加,而pH 值和硫酸氨基葡萄糖的含量逐渐下降,硫酸氨基葡萄糖的非酶褐变反应符合零级动力学,褐变指数和5- 羟甲基糠醛含量变化的反应活化能分别为85.127、136.973kJ/mol,NaHSO3 对硫酸氨基葡萄糖的非酶褐变有一定的抑制作用。