洋姜水解生产果糖的研究

本文分别研究了盐酸和菊糖酶催化水解洋姜生产果糖的工艺条件，并在生产工艺和设备、水解转化率及产品纯度上比较和评价了两种工艺条件的特点。     

大肠杆菌分泌表达烟酰胺单核苷酸合成途径酶及催化体系优化

烟酰胺单核苷酸（NMN）是具有重要医用价值的NAD+前体,通过信号肽PelB实现大肠杆菌BL21(DE3)分泌表达催化NMN合成的烟酰胺磷酸核糖转移酶（Sfnampt）、磷酸核糖焦磷酸激酶（Tkprs）和核糖激酶（Erbks）。对三酶的酶学特性分析显示,Sfnampt、Tkprs和Erbks的最适反应温度分别为45、50和37 ℃,最适pH值分别为7.5、8.5和5.5。热稳定性分析发现,Sfnampt在35 ℃热稳定性良好而在40~55 ℃较差;Tkprs在40~60 ℃热稳定性良好;Erbks在25~40 ℃热稳定性良好而在45 ℃较差。酶动力学分析可知,Sfnampt、Tkprs和Erbks的Vmax分别为0.65 μmol/(L•min)、2.37 μmol/(L•min)、12.58 μmol/(L•min),Km分别为2.87 μmol/L、25.48 μmol/L和74.13 μmol/L,Tkprs、Erbks与已表征的Prs、Rbks相比底物亲和力好。将分泌表达的三酶用于催化合成NMN,温度37 ℃、pH值8.0为较优催化条件。底物ATP以及酶Sfnampt在反应体系中为关键因素,经底物和酶配比优化后,使用三酶经过7 h催化可获得5.50 μmol/L的NMN。该研究在大肠杆菌系统成功实现了NMN合成途径酶的分泌表达,为NMN合成提供了新思路。     

木棉纤维的基本性质与结构研究

木棉纤维是热带木棉的果实纤维,具有中空、壁薄、拒水吸油等特点而被用于被褥、枕头絮填料、浮力及吸油材料等,而在造纸领域的应用研究未见报道.本研究对木棉纤维的化学成分及结构进行了测定和表征,对木棉纤维的打浆性能进行了初步研究.研究表明.木棉纤维的硝酸-乙醇纤维素、Klason木素、戊聚糖含量分别为43.73%、11.36%、37.43%;光学显微镜和扫描电镜(SEM)研究显示木棉纤维表面光滑、壁薄中空、壁/腔比很小;X射线衍射测定木棉纤维的结晶度为31.29%.槽式打浆对木棉纤维主要起切断作用,用PFI磨磨浆11000转后,木棉纤维浆料的打浆度由17°SR提高到26°SR.     

营养基因组学研究与应用

随着基因组学、生物信息学等领域的迅猛发展,营养基因组学应运而生,并迅速发展成为营养学研究的热点.营养基因组学主要研究营养素和植物的化学物质对人体基因的转录、翻译表达以及代谢机制,是将高通量组学技术用于食物营养素与基因组的相互作用,及其与健康关系的研究,其应用范围包括营养素作用的分子机制、营养素的人体需求量、个体食谱的制定以及动物生产等.本文重点介绍营养基因组学的研究与应用的现状,并对今后的研究趋势作了进一步的展望.     

热带假丝酵母木糖还原酶在酿酒酵母细胞表面展示

利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表面展示系统,将来源于热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖还原酶基因xyl1嵌入带有His-Tag的酿酒酵母α-凝集素展示载体pICAS-His,构建重组质粒pICAS- His-Ctxyl1,并转化到酿酒酵母宿主菌酿酒酵母MT8—1,通过流式细胞仪快速检测和筛选,得到重组菌株MT8- 1/pICAS-His—Ctxyl1。将重组酵母用于葡萄糖(15g/L)和木糖(5g/L)的混合糖发酵研究,结果表明,重组酿酒酵母MT8/1/pICAS-His—Ctxyl1细胞具有良好的生长和产酶特性,同时能转化木糖生产木糖醇,在培养基中2.5g/ L木糖转化生成2.5g/L木糖醇,转化率达98.7%。     

枯草芽孢杆菌B2（Bacillus subtiIis B2）木聚糖酶在毕赤酵母中的表达

木聚糖酶是主要工业用酶制剂之一,在食品行业应用广泛。将编码枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis B2）木聚糖酶XYN的基因克隆到pPIC9K载体中,构建了分泌型表达载pPIC9K-XYN,载体经线性化后转化Pichia pastoris GS115,G筛选获得了分泌表达XYN的重组毕赤酵母工程菌GS115／pPIC9K-XYN。初步研究表明：以山毛榉木聚糖为底物时,重组毕赤酵母工程茵摇瓶水平发酵上清液中木聚糖酶酶活可达1542.6U／mL,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH值为6.0,并显示出较好的热稳定性和宽pH适应性。     

枯草芽孢杆菌B2(Bacillus subtilis B2)木聚糖酶在毕赤酵母中的表达

木聚糖酶是主要工业用酶制剂之一,在食品行业应用广泛.将编码枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis B2)木聚糖酶XYN的基因克隆到pPIC9K载体中,构建了分泌型表达载体pPIC9K-XYN,载体经线性化后转化Pichia pastoris GS115,G筛选获得了分泌表达XYN的重组毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K-XYN.初步研究表明:以山毛榉木聚糖为底物时,重组毕赤酵母工程菌摇瓶水平发酵上清液中木聚糖酶酶活可迭1542.6 U/mL,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH值为6.0,并显示出较好的热稳定性和宽pH适应性.     

内切菊糖酶的分离纯化及性质研究

采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析从Fructozyme (Aspergillus niger) 中分离得到三个菊糖酶组份EⅠ、EⅡ和EⅢ,其中EⅠ主要表现为内切菊糖酶,其分子量为65,000,以菊糖为底物其最适pH为4.6,最适温度为60℃,Km值为16mmol/L,对pH及温度有较高的稳定性,并利用液相色谱对菊糖酶EI催化水解菊糖的产物进行分析研究。     

镰刀菌Fo47来源木聚糖酶的异源表达、酶学性质及其对全麦面包品质的影响

为开发新型面粉改良酶制剂,该研究对通过基因组挖掘手段筛选出的一种新型木聚糖酶——镰刀菌Fo47来源木聚糖酶（Fusarium oxysporum Fo47 xylanase,FXYL）,利用毕赤酵母X33首次对其进行异源表达,分析重组FXYL的酶学性质,并初步探究重组FXYL对全麦面包品质的影响。结果表明,摇瓶发酵144 h后,重组毕赤酵母发酵上清液木聚糖酶酶活力为779.64 U/mL;经过Ni-NTA柱层析纯化后,重组FXYL的比酶活为764.33 U/mg;酶学性质研究表明,重组FXYL最适反应pH值为5.0,最适反应温度为45℃,在中温（＜40℃）和pH 5.5～10.0表现出较好的稳定性。重组FXYL的酶学性质较适合面团发酵的偏酸环境;添加重组FXYL能够显著提高全麦面包的比容和弹性,降低全麦面包的硬度和咀嚼性,有望发展为一种新型面粉改良剂。     

国际化大型水下项目管理的特点与方法——以番禺35-2/35-1气田水下开发项目为例

番禺35-2/35-1气田水下开发项目是中国海油自主管理的一个国际化大型水下项目。在此项目管理过程中,项目组针对该深水水下项目独有的特点,采取了与国际接轨的管理模式,在项目管理实践中逐渐积累了宝贵的经验,并初步形成了一套有效的管理方法,对今后同类国际化水下项目管理具有很的好借鉴意义。