烤烟烟碱含量的全基因组关联分析

烟碱是烟草属特有的一类生物碱,为加深对烟碱遗传调控机制的解析,充分挖掘高烟碱优异等位。本研究选取219份烤烟品种开展了RAD重测序研究,获得了384,904个高质量SNP位点的群体分型数据。同时在四川西昌和山东诸城2个试验点,于2012-2015年相同栽培管理条件下对供试品种的烟叶烟碱含量进行了表型鉴定。利用全基因组关联分析的策略,共发掘到2个与烟碱含量显著关联的SNP位点,分别位于1号染色体的69,912,063bp处和2号染色体的81,115,794bp处。基于上述SNP位点预测到2个候选基因,并将目标SNP位点转化3对可通过PCR检测的功能标记。通过以上研究,加深了烟碱遗传调控机制的解析,为高烟碱优异等位基因型的发掘和高烟碱新品种的分子标记辅助选择提供了可用的标记和基因资源。      

烟草叶片蛋白质组双向电泳实验体系的建立

选用干旱敏感型栽培烟草品种中烟100旺长后期的叶片和感黑胫病栽培烟草品种小黄金1025苗期的叶片作为实验材料,总蛋白质提取分别采用稍加改进的TCA/丙酮法和由蛋白质分级提取、酚抽提及丙酮洗涤相结合的方法。对中烟100旺长后期烟草叶片采用的总蛋白质TCA/丙酮提取方法进行了优化、对其使用的IPG胶条pH范围做了初步筛选,并在此研究基础上,对采用第二种提取方法获得的小黄金1025苗期烟草叶片总蛋白质样品进行了不同上样量对双向电泳结果影响的比较实验。初步建立起适合烟草叶片蛋白质组研究的双向电泳实验体系。     

几个烟草种质材料对野火病的抗性研究

通过用针刺结合无针头注射法,在温室条件下对烟草野生种Nicotiana longiflora,普通烟草(N.tabacum)中的白肋烟品种Ky14,烤烟品种Kutsaga110、Speight G-140、中烟90和云烟85,杂交组合(Speight G-140×Ky14)F1、(中烟90×Ky14)F1和(云烟85×Ky14)F1进行烟草野火病菌的接种,对这几个烟草种质材料对野火病的抗性进行了鉴定.结果表明,N.longiflora对野火病免疫,(云烟85×Ky14)F1、(中烟90×Ky14)F1和(Speight G-140×Ky14)F1高抗野火病,Ky14和Kutsaga110抗野火病,Speight G-140、中烟90和云烟85易感野火病.     

SSR和ISSR标记技术应用进展

介绍了SSR和ISSR标记的原理和特点,综述了这两种技术在种质遗传多样性、基因定位及分子标记辅助育种、遗传图构建及种子纯度和真伪鉴定等研究中的应用进展,并提出了在烟草遗传育种中应用的建议。     

烟草种子工作新进展

全国烟草种子工作会暨全国烟草品种审定委员会第四届第二次会议，于２００２年１２月１１～１３日在宁波市召开。全国烟草品种审定委员会委员、各省（市、区）烟草公司烟叶主管领导及有关科研单位、良繁基地和中烟种子公司代表７９人参加了会议。会议由中国烟叶生产购销公司总经理、全国烟草品种审定委员会主任赵兴同志主持。赵兴总经理回顾了全国烟草品种审定委员会成立以来我国烟草种子工作取得的成就，并对今后种子工作作了部署。会议审定通过了中烟１００（CF９６５）、中烟１０１（CF９７８）、贵烟４号（品４）、秦烟１号等４个烤烟…     

不同基因型不同产区烤烟多酚含量的比较

为了筛选出高多酚含量的烤烟基因资源,并了解同一基因型烤烟在不同生态条件下多酚含量的差异性,对山东诸城、四川西昌两产区54个基因型烤烟的多酚含量进行了检测。结果表明:基因型和产区(生态条件)对烤烟多酚含量均有较大影响;不同基因型间相比,各类多酚物质绝对含量最高值是最低值的2~3倍,绿原酸、芸香苷相对含量最高值比最低值高20百分点;两产区中烤烟总多酚含量均高于平均值的品种有NC89、净叶黄、中烟102、秦烟95、中烟98、云烟87、中烟14、单育2号、革新三号等,可作为高多酚含量亲本在育种中利用;不同生态条件相比,四川产区的同一基因型烤烟绿原酸、芸香苷及总多酚绝对含量是山东产区的1.5~2.0倍,山东产区烤烟莨菪亭绝对含量是四川产区的近2倍;与山东产区烤烟相比,四川产区烤烟多酚物质的含量特点是绿原酸、芸香苷绝对含量高,莨菪亭绝对含量低。     

甲基磺酸乙酯对烤烟种子发芽率的处理效应

以不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)作为化学诱变剂,烤烟不同品种的种子为供试材料,探讨了EMS化学诱变剂对烟草种子发芽率、根长等性状差异的诱变处理效应。结果表明,在浓度为0.1%~1.3%的处理范围内,EMS对种子的发芽率主要呈抑制作用,但低浓度处理对种子发芽率和种子根长有促进作用,高浓度处理对种子发芽率和种子根长均呈显著抑制作用;以半致死浓度为选择标准,确定了不同烤烟品种间EMS诱变处理种子的适宜浓度为0.35%~0.52%,致死浓度均为1.3%;供试品种间EMS处理反映的敏感性为云烟87=云烟97>红花大金元>中烟100>K326。     

烟草糖酯SSR分子标记筛选及辅助育种应用

为明确与糖酯紧密连锁的SSR分子标记在烟草实际育种工作中的可用性,加快烤烟糖酯遗传改良进程,本研究利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和GC-MS检测技术,以不同遗传背景的5个烟草种质以及192份重组自交系遗传群体为试验材料,对5个SSR分子标记开展了筛选和验证研究。结果表明,5个分子标记中,PT20315、PT30354两个分子标记在不同遗传背景中多态性稳定,并且其多态性条带与糖酯表型差异的对应性较好;在重组自交系群体中,两个分子标记鉴定的基因型与糖酯表型的一致率分别为93.75%和90.58%,可用于高糖酯烟草分子辅助育种中。目前,利用两个分子标记辅助选择,已经定向改良获得高糖酯K326等新品系材料。     

烤烟烟碱转运蛋白基因与烟碱积累的相关性研究

解析烟碱转运相关基因对烟碱积累的影响,可为定向改良烟碱性状提供理论指导。本研究对7份烟碱含量不同的烤烟进行水培,检测打顶前后烟碱含量、烟碱合成基因（NtPMT、NtQPT）、烟碱转运基因（NtNUP1、NtJAT1/2、NtMATE1/2）以及囊泡运输调节基因（NtGEF）的表达量变化。经相关分析、主成分分析和相关网络分析表明：（1）烟碱合成基因NtPMT、NtQPT与烟碱转运基因NtNUP1、NtMATE1/2相互促进表达;（2）根部和叶部的主效烟碱转运基因中,NtJAT1是腰叶的主要烟碱转运基因,NtNUP1、NtJAT1、NtMATE1/2在根部对烟碱转运都有贡献,且转运效率依次递减;（3）囊泡运输调节因子NtGEF也能间接影响叶部烟碱积累。因此,在对烟碱性状进行定向改良时,可考虑烟碱合成、转运以及囊泡运输调节因子对烟碱积累的贡献大小。