粪肠球菌内源性质粒的序列分析及其穿梭载体的构建

为了对粪肠球菌EXW27的内源性质粒pXW进行DNA序列的测定和分析,并基于其最小复制子构建大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体。本研究从具有优良益生特性的粪肠球菌EXW27中分离得到了内源性质粒pXW,对其进行了DNA序列的测定及分析,然后利用质粒pXW的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体,并研究大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体的宿主范围、转化效率和稳定性。结果表明该质粒大小为8617 bp,GC含量为33.29%,包含8个ORF,推定为θ型复制质粒。质粒pXW在粪肠球菌EXW27中拷贝数最高可达32.09±0.93,表明质粒pXW属于高拷贝数质粒。本研究确定了质粒pXW的最小复制子,并基于该复制子构建了大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体pXWM1。该穿梭载体具有较宽的宿主范围,可成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于1.96×102~8.96×104 CFU/μg （质粒DNA）之间,质粒丢失率介于28.54%~54.17%之间。本研究成功构建了一个具有宽宿主范围、高转化效率以及高稳定性的大肠杆菌-粪肠球菌穿梭载体,为乳酸菌基因操作提供了新工具。     

创新者强 奋斗者胜——稻花香集团创新奋进500亿产业集群目标的铿锵脚步

稻花香集团自2011年提出"515"战略目标以来,受到各级党委、政府以及社会各界的大力支持,全体稻花香人坚定信念、抢抓机遇、奋力作为、创新发展,年年实现提质增效,综合实力逆势进位,市场发展破冰前行,产品结构优化创新,品牌集群活力迸发。稻花香集团发展     

五大特色展会首次联手 九月金秋铸就家具航母——第十届中国国际家具展同期、同场举办第十届中国国际家具生产设备及原辅材料展

由中国家具协会与上海博华国际展览有限公司共同主办的第十届中国国际家具展览会／第十届中国国际家具生产设备及原辅材料展览会，将于9月15～18日在上海浦东新国际博览中心拉开帷幕。同期举办的还有2004中国国际办公家具展览会、2004中国国际家具饰品布艺及灯饰展览会，以及首次登陆中国的欧洲家具配件品牌展会-”ZOW”中国国际家具配件及材料展览会。展览的总面积达9万m^2，参展商达1000余家，创历届之最。     

五大特色展会首次联手九月金秋铸就家具航母--第十届中国国际家具展同期、同场举办第十届中国国际家具生产设备及原辅材料展

由中国家具协会与上海博华国际展览有限公司共同主办的第十届中国国际家具展览会/第十届中国国际家具生产设备及原辅材料展览会,将于9月15~18日在上海浦东新国际博览中心拉开帷幕。同期举办的还有2004中国国际办公家具展览会、2004中国国际家具饰品布艺及灯饰展览会,以及首次登陆中国的欧洲家具配件品牌展会-"ZOW"中国国际家具配件及材料展览会。展览的总面积达9万m2、参展商达1000余家,创历届之最。千余展商的强大阵容,十万平米展示的超大规模中国国际家具展览会历经10年,在海内外的家具业早已享有相当高的知名度。作为国内家具厂商开拓…     

瓦斯对煤自燃特性参数影响的实验研究

选取原煤样、经过瓦斯解吸处理和通甲烷处理的3种不同瓦斯含量的混合煤样,利用程序升温实验对其自燃特性参数进行实验研究,通过对不同煤温条件下的耗氧速率、CO产生率、CO2产生率及放热强度进行分析,得到了氧化自燃过程中瓦斯对煤氧化自燃特性的影响规律,揭示了瓦斯对煤自燃的抑制作用。     

基于单片机的锅炉自动控制系统设计

文中介绍一种新型单片机控制的锅炉采暖自动系统的组成,工作原理及特点.对改造旧锅炉,提高自动化水平提供了一种有效的方法.     

“丰收”文化耀楚天——稻花香品牌花车全省巡展采风

稻花香花车巡游,艺术团巡演自7月7日启动。炎热的湖北．烈日当头照．集团41辆品牌花车．稻花香艺术团历经宜昌．恩施、十堰,襄阳4个地级市．30多个县．演出30多场次,行程15000多公里……这已经成为这个炽热夏日的一道亮丽风景线。花车所到之处百姓无不啧喷称奇,艺术团巡演现场人山人海、气氛热烈,影响力与日俱增．这一切,都让所有稻花香人颇感欣喜．备受鼓舞,让前行路上的他们充满信心、力量和勇气。     

N末端结构模块缺失对嗜热酸性III型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL酶学性质的影响

通过对嗜热酸性III型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL进行N末端截短突变，并比较TK-PUL与突变酶的酶学性质，确定N末端结构模块的缺失对酶学性质的影响。结构模块N1的缺失改良了TK-PUL的催化特性，其α-淀粉酶比活力提高至TK-PUL的1.11 倍，普鲁兰酶比活力提高至TK-PUL的1.12 倍，于100 ℃的半衰期延长至TK-PUL的1.15 倍。结构模块N2的缺失提高了酶的热稳定性，于100 ℃的半衰期延长至TK-PUL的1.25 倍。但是结构域N2的缺失降低了酶的pH值稳定性、酶的底物结合能力以及比活力。并且结构域N2影响了酶的底物选择性，导致其α-淀粉酶活性与普鲁兰酶活性的比值由0.49提高至0.60。结果表明，TK-PUL的N末端结构模块N1和N2均不是其发挥催化活性所必需的结构区域，但是对酶的底物结合能力、底物降解能力以及稳定性具有重要影响。     

改性纳米纤维素对磷的动态吸附及再生

以铁改性纳米纤维素[Fe(OH)₃@CNFs]为吸附剂进行动态吸附除磷试验，探究了不同柱高和不同流速对Fe(OH)₃@CNFs吸附磷性能的影响。结果表明：吸附柱填充越高（6～16cm），进水流速越慢（5～10mL/min），吸附达到平衡所需时间越长，越有利于Fe(OH)₃@CNFs对磷的动态吸附。采用NaOH溶液对吸附剂解吸进行原位再生，再生后吸附柱对磷的吸附量为原吸附柱的83%，表明Fe(OH)₃@CNFs材料具有较好的再生能力。通过Yoon-Nelson模型计算吸附50%目标污染物所需的时间，拟合值与实验值的平均相对偏差在1.8%～6.9%之间，表明Yoon-Nelson模型能够很好地描述Fe(OH)₃@CNFs材料对磷的动态吸附行为。使用红外光谱和X射线光电子能谱对吸附机理进行分析发现Fe(OH)₃@CNFs材料对磷具有吸附能力，并且吸附后主要以FePO₄和Fe₂(HPO₄)₃的形式存在。利用吸附柱对生活污水处理厂二沉池出水进行动态吸附，在流速为10mL/min、填装高度为12cm的条件下，饱和时的吸附容量为34.5mg/g。     

植酸酶YiAPPA在粪肠球菌中的高效组成型表达研究

旨在获得强组成型启动子来实现植酸酶YiAPPA在粪肠球菌EXW27中的高效组成型表达。本研究通过对比分析粪肠球菌中16S rRNA的启动子序列,将启动子中非保守区域替换为随机化序列,获得随机的人工启动子序列。然后利用大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒pSIP409中酶切位点构建人工启动子文库,并结合植酸酶活性的高通量筛选技术,筛选获得启动YiAPPA在粪肠球菌EXW27中高效组成型表达的强组成型启动子,实现YiAPPA在粪肠球菌EXW27中成功表达,并研究重组YiAPPA的酶学性质。结果表明,在组成型启动子p10的控制下,重组YiAPPA在粪肠球菌EXW27中成功表达,其表达量约占细胞内蛋白总量的15%。重组YiAPPA的最适反应pH为4.5,在pH1.0~10.0的范围内具有优良的pH稳定性,于55 ℃的绝对酶活高达3900 U/mg。本研究构建了既具有益生特性又具有植酸酶活性的转基因粪肠球菌,为研制新型转基因微生态制剂奠定了基础。