银耳芽孢总蛋白提取方法的建立

采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris）-饱和酚法、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法提取银耳芽孢总蛋白的效果。结果表明：高压均质的细胞破碎效果优于超声波,3 种方法所得到的银耳芽孢总蛋白质量浓度分别为2.33、1.26、1.02 mg/mL,且Tris-饱和酚法经传统考马斯亮蓝染色法染色所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法。因此,Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法。     

干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生

以干酪乳杆菌LC2W为出发菌株,对其进行原生质体制备与再生。通过单因素试验研究菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间及酶解温度对干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的影响,并对制备条件进行正交设计优化。结果表明：干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的最佳条件为：菌龄8h、酶质量浓度10mg/mL、酶解时间75min、酶解温度42℃,在此条件下制备原生质体并进行再生实验,原生质体形成率达到97.15%,再生率可达到31.25%。研究结果可为L. casei LC2W食品级外源表达系统的构建提供初步的基础。     

革兰氏阴性致病菌细胞脂肪酸组分的气相色谱分析

通过气相色谱对15株革兰氏阴性致病菌的细胞脂肪酸组分进行分析,可以清晰地分出不同的属其脂肪酸组分有明显地差异,同一属中不同的种也表现出一定的差异,地方菌株与模式菌株具有相同的脂肪酸组分,可以根据脂肪酸组分对食品中致病菌进行快速鉴定。     

虎奶菇Mn-SOD提取、鉴定及基因的克隆

以虎奶菇菌丝为材料,提取、鉴定了虎奶菇锰超氧化物歧化酶,克隆虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因。用液氮研磨、超声、硫酸铵沉淀和透析等方法提取虎奶菇Mn-SOD;WST-8 法测定虎奶菇 Mn-SOD 酶活力;H₂O₂ 鉴定虎奶菇 SOD 的类型;用同源克隆、cDNA 末端快速扩增技术和融合引物与巢式 PCR 等方法从虎奶菇中克隆锰超氧化物歧化酶基因。结果表明,虎奶菇 Mn-SOD 酶活力为 1.66 个酶活力单位。酶经过 H₂O₂处理后仍然有活性,与未处理无明显差异,表明虎奶菇中 SOD 主要是 Mn-SOD。克隆获得了虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因PtMn-SOD,其DNA序列全长1025 bp,开放阅读框全长为663 bp,编码220个氨基酸。序列分析与系统进化树表明,PtMn-SOD与属于侧耳属的糙皮侧耳(登录号:MH645359.1)关系较近。预测该蛋白质分子量为 24.54 kDa,蛋白等电点为 7.86。PtMn-SOD 蛋白定位于线粒体,在线粒体中发挥功效。     

汽车前围内板铝合金冲压工艺设计

目前使用轻质材料是实现汽车轻量化的重要途经。通过对某全铝合金汽车前围内板冲压工艺方案的设计，论述了铝合金汽车板在冲压过程中发生的起皱、开裂、减薄、回弹等问题，并使用有限元分析软件，对前围内板工艺方案进行仿真分析，根据分析结果对工艺方案进行优化设计，并验证其可行性。最终确定的工艺方案为铝合金汽车覆盖件的开发、产品试制提供了技术支持和理论基础。