鲜马乳与发酵酸马乳常规营养成分的比较分析

研究旨在对比分析鲜马乳与发酵酸马乳常规营养成分的差异性，为马乳鲜乳与酸乳潜在营养价值的深入研究提供理论依据。随机选择伊犁昭苏县喀拉苏镇3个放牧草场饲养的36匹伊犁马母马为研究对象，其中牧户1家12匹，牧户2家10匹，牧户3家14匹。同时对3家牧户采集鲜马乳，并将部分样品进行传统发酵，采集发酵乳50 mL，编号后-20℃带回实验室分别测定常规乳成分。研究表明不同牧户间鲜马奶乳成分各不相同，发酵过后的酸马乳乳成分也各不相同。与鲜马乳相比，酸马乳中水分含量升高；有机物、有机物、灰分含量与pH值降低；蛋白质、钙和磷含量均无显著差异。随着发酵时间的增加，乳酸的含量呈上升趋势，pH值呈下降趋势。     

单增李斯特菌毒力因子多重荧光PCR法 建立与应用

目的建立同时检测单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)及其3种毒力因子的多重荧光PCR快速检测方法,并应用于日常食品的检测。方法根据单增李斯特菌溶血素基因hly A、内化素基因inl A和表面蛋白act A基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和探针,优化多重荧光PCR反应体系。对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果该法特异性强、敏感性高,对单增李斯特菌纯培养物的最低检出限410cfu/m L;重复性好,变异系数均小于2%。对84份食品检测结果与传统国标法相符,共检出单增李斯特菌4份,检出率为4.76%。多重荧光PCR检测方法耗时1 h,比传统方法节约2~5 d。4株单增李斯特菌分离株中2株同时含有inl A、act A、hly A 3种毒力基因,另2株为毒力基因act A缺失株,提示目前流行株并非同一来源。结论本研究建立的多重实时荧光PCR方法能同时对单增李斯特菌及其3种毒力因子进行快速检测,且灵敏度高、特异性好,为食源性疾病的病原学检测提供了快速可靠的方法。     

浙江杭嘉地区水体藻毒素及富营养化状况调研

通过对嘉兴运河干流、新塍塘等河流20个采样点藻毒素及水质富营养化指标调查、评价、发展趋势分析,得出嘉兴市主要湖泊和水系的微囊藻毒素(MC-LR)分布状况及年内变化规律,为当地监管部门监测及控制微囊藻毒素提供支持与参考。采用定位仪(GPS)对各个湖泊水体进行定位,以ELISA免疫法检测MC-LR浓度,以卡尔森指数方法评价水体营养状态。结果表明, 20个采样点中,王江泾和洛东大桥2处水体全年平均藻毒素含量最高,分别为0.53μg/L和0.49μg/L。2处采样点6月份和7月份藻毒素含量在全年最高,分别为2.83μg/L和2.44μg/L。南湖中心与湘家荡的水体相比,富营养化程度更高。ELISA法能快速、灵敏地检测MC-LR含量,嘉兴地区水体6月份和7月份的微囊藻毒素含量在某些区域已超过饮用水标准,提示当地需加强监测及防控力度。     

基于蛋白损伤污染物毒性评价的luxCDABE生物发光载体的构建

目的构建含完整lux CDABE基因盒的PUCD-dna K重组发光载体,用于对蛋白损伤污染进行毒性评价。方法用PCR法从大肠杆菌W3110中扩增dna K基因,将PCR产物测序后与Gen Bank中dna K序列进行BLAST比对。将dna K片段及PUCD615载体均用Bam H I、Eco R I双酶切,连接后电转化导入宿主菌JM109。挑取克隆,提取质粒用PCR鉴定,阳性克隆再进行测序。结果 dna K基因PCR扩增产物得到206 bp片段,PCR产物测序后BLAST比对同源性为100%,表明扩增序列正确。PUCD-dna K测序结果表明序列含有dna K基因及PUCD615载体上的基因,且与载体连接处正确地出现对应的酶切位点。结论 PUCD-dna K载体构建成功。含lux CDABE全基因盒作为报告基因的载体PUCD615可克服lux AB必须外加底物(脂肪醛)才能实现生物发光的缺点,通过优化连接及转化条件,可将大片段的PUCD615载体与短片段的插入序列连接成功,构成重组载体。     

试论某高层建筑地下室防水施工及质量控制

高层建筑地下防水工程是关系着建筑物结构主体自身的稳定性和使用寿命,只有在施工过程中进行严格的施工质量控制,才能真正确保地下室防水工程的施工质量,从而切实有效地避免渗漏这一质量通病的出现。本文以某工程为例,着重介绍了高层建筑地下室防水施工技术要点及质量控制措施。     

荧光重组酶介导等温扩增快速检测食品中克罗诺杆菌属

目的 克罗诺杆菌属为乳制品及婴幼儿配方制品中常见污染的食源性致病菌,传统的培养法检测无法满足口岸大批量食品的快速检测要求。建立快速简便的荧光重组酶介导等温扩增法(recombinase-aided amplification, RAA)检测克罗诺杆菌属,以满足口岸快速通关及监管需要。方法 根据克罗诺杆菌属ompA 基因保守区设计特异性引物、探针,通过引物两两组合结合探针筛选出扩增效率及灵敏度最佳的引物组合,优化反应温度及引物探针浓度,确定最佳反应条件。将建立的荧光RAA法应用于食品基质及实际样品检测中,同时与国标GB 4789.40-2016进行比对验证。结果 克罗诺杆菌属荧光RAA最佳反应温度为39℃,最佳引物、探针终浓度均为400nmol/L。建立的荧光RAA法特异性强,纯菌灵敏度达到3×10_² CFU/ mL。加标食品基质婴儿奶粉及婴儿米粉在月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST)增菌只需2h,即可检测原始浓度达到3×10_^-2 CFU/ mL的克罗诺杆菌属。荧光RAA法只需5min即可观察结果,20-30min完成扩增,速度及灵敏度明显高于国标法。结论 荧光RAA法简便、快速、无需大型仪器,可用于口岸或其他场所进行克罗诺杆菌属的快速检测与监控。     

DNase处理法结合数字PCR与qPCR对活的非可培养状态副溶血性弧菌检测比较研究

目的探讨DNase处理法结合微滴化数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)在检测冷冻食品中活的非可培养状态(viable but non-culturable state, VBNC)副溶血性弧菌的适用性,并与实时荧光定量PCR(qPCR)进行比较。方法用无菌磷酸盐缓冲液对解冻的大西洋鲑鱼样品进行10倍梯度稀释,再加入副溶血性弧菌,终浓度为6.6×10~5 CFU/mL。-20℃分别诱导10、20和30 d。将DNase试剂与叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)染料分别作用于不同时期的冷冻基质,结合qPCR和ddPCR进行比较检测,对比其作用效果。结果DNase-qPCR和PMA-qPCR检测3个冷冻阶段活性副溶血性弧菌的Cq值分别为31.41±0.06、32.40±0.04、34.59±0.15和31.24±0.06、32.32±0.03、34.25±0.12, 2种方法Cq值均呈现上升的趋势且数值接近。采用DNase-ddPCR和PMA-ddPCR检测各阶段活性副溶血性弧菌,可直接读出绝对拷贝数,分别为233±6.43、108±5.57、28±3.21和256±6.56、126±3.06、35±2.52。2种方法检测的拷贝数差异不大,重复性好。相对标准偏差均在可接受范围内,符合欧盟定量检测要求。结论DNase处理试剂与PMA对有活性的副溶血性弧菌检测效果相当,与PMA相比,DNase处理法无需强光照射,操作简便快捷,无试剂毒性。ddPCR不需要标准品即能实现对基质中微量活性副溶血弧菌精准定量检测。     

抗扰动复合非线性伺服控制器的设计与应用

针对典型的电机伺服系统,提出了一种鲁棒复合非线性伺服控制器的离散域设计方案。把系统的扰动和不确定性归结为一个斜坡信号(其变化率恒定),设计一个降维线性扩展状态观测器,对系统未测量状态和未知扰动加以估计。把设计的控制律应用于永磁同步伺服电机,先在MATLAB上进行仿真分析,随后基于TMS320F28335DSC进行试验测试。结果表明系统在各种类型扰动作用下,对目标位置都能实现快速、平稳和准确的跟踪,具有较好的鲁棒性。     

迟缓爱德华氏菌耐药性分析研究

目的分析来自不同地区和宿主的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda, Et)耐药特性及抗性基因。方法采用VITEK 2 Compact全自动分析系统,利用VITEK 2 Compact AST-GN13(22095)药敏鉴定卡对23株Et进行药敏试验;通过实时荧光PCR法检测抗性基因。结果manE291、ET-0711059、L49231、DT这4株Et对复方新诺明耐药,其中ET-0711059还对包括氨苄西林、庆大霉素等在内的其余7种抗生素耐药,对环丙沙星处于中介耐药。23株Et经氨基糖苷类、四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类等30种抗性基因检测,16%Et含有氨基糖苷类ant(3")-I抗性基因及磺胺类sul1抗性基因;另有16%Et含磺胺类sul2抗性基因;40%Et含四环素类tetA抗性基因。所有耐药菌株均为鱼源株,6株人源菌株不表现耐药。结论所检测的Et菌株除了1株多重耐药,其余菌株的耐药性并不突出,主要表现为对复方新诺明的耐药。在检测的Et菌株中分布有一定比例的抗性基因,但和耐药性并不完全相关。