保健食品中非法添加药物的广谱筛查和确证

采用液相色谱仪—二极管阵列检测器-离子阱-飞行时间串联质谱仪(LCMS-DAD-IT-TOF)建立减肥类非法添加药物高分辨质谱数据库。样品经乙腈超声提取,提取液经QuEChERS吸附剂净化,以ZORBAX Eclipse AAA色谱柱(150mm×4.6 mm,4.5μm)分离,乙腈和0.1%乙酸为流动相梯度洗脱。筛查限为0.10~0.75 mg/kg,平均回收率在49.4%~88.1%;相对标准偏差为5.0~14.8%。该方法通过紫外光谱确定非法添加药物特征吸收波长,结合滥用药物高分辨质谱数据库,通过精确质量数的检索匹配对非法添加药物实现快速筛查,并使用保留时间、同位素丰度和多级特征碎片离子进行确证。根据多级碎片离子,推导出裂解途径。具有简便、快速、高效、准确等优点。在缺乏标准品或对照品的情况下,即可得到准确可靠的结论。适用于保健食品中非法添加药物的有效快速筛查。     

纺织品中碳氯灵、异艾氏剂、乙滴涕和十氯酮的测定方法

建立气相色谱-电子俘获检测器(GC-ECD)检测纺织品中碳氯灵、异艾氏剂、乙滴涕和十氯酮的测定方法。试样加入丙酮-正己烷溶液超声提取后,将滤液收集于鸡心瓶中,残渣再重复超声提取一遍。合并后的滤液经旋转蒸发仪浓缩至近干,用正己烷定容后,过微孔滤膜,供气相色谱仪测定,外标法定量。结果表明:碳氯灵、异艾氏剂、乙滴涕和十氯酮在检测范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.995。各添加水平的平均回收率在70.3%~109.8%之间,相对标准偏差在1.8%~10.7%之间,符合SN/T 0006-2009《进出口纺织品检验规程、检验方法标准编写的基本规定》的要求。该方法的检出限采用样品添加的方式测得,碳氯灵为0.01 mg/kg、异艾氏剂为0.01 mg/kg、乙滴涕为0.05 mg/kg、十氯酮为0.02 mg/kg,符合GB/T 18885-2009《生态纺织品技术要求》和《Oeko-Tex Standard 100》中对杀虫剂残留限量的要求。     

GC—TOF MS结合化学计量学用于安化黑茶的识别

采用顶空固相微萃取联合气相色谱—飞行时间质谱(GC—TOF MS)对安化黑茶及其它产地黑茶中的挥发性成分进行检测,对41种共有挥发性组分进行定性定量分析。应用化学计量学统计工具对数据进行变量筛选、主成分分析法(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA),筛选出安化黑茶的26个显著性差异香气成分,通过主成分得分投影图直观反映样本间的聚类趋势和分类信息,对安化黑茶与不同产地黑茶样品及其它种类茶叶进行有效区分和识别,找出14个对安化黑茶识别分类起着重要作用的挥发成分。结果表明,基于茶叶中挥发性成分差异的GC—TOF MS分析结合化学计量学统计方法用于安化黑茶识别是可行的。     

组织芯片多重免疫组织化学染色方法的优化

为提高多重免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术在组织芯片(tissue microarray,TMA)上的染色效果,通过对同一样本进行多种抗体染色或同种抗体多次染色的方法,探索并优化IHC技术中的多个步骤,具体包括:"滤纸夹层-蒸蛋器"抗原修复新装置的研发、抗原修复液的筛选、透明剂的优选.研究结果显示:自创的"滤纸夹层-蒸蛋器"抗原修复辅助工具,能减少高温高压修复时水分子对组织的冲击,作用温和、操作安全,有较好的组织切片完整性和较少的组织脱片率,且可减少抗原修复液使用量;柠康酐抗原修复液对多重染色具有更强的阳性效应和通用性;无毒TO (terpentine oil)透明剂可取代有毒二甲苯,具有同样的脱蜡透明效果. TMA中多重IHC技术的改良,提供了更加高效、廉价、安全的方法,可提升与扩展TMA在病理学中的应用价值.     

食管鳞癌中3个新miRNA的分子功能预测

为寻找食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)诊断与治疗的新分子标志物,利用实时定量荧光PCR技术检测ESCC中3个未知miRNAs(miR-3914、miR-8082和miR-4770)的表达状况;运用生物信息学方法分别对它们差异表达miRNA下游的候选靶基因做基因本体(gene ontology,GO)富集和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析;采用蛋白免疫印迹方法观察转染miRNA mimic后一些与癌症发生和发展相关蛋白的表达改变.结果显示,与食管癌癌旁正常组织和正常食管上皮细胞比较,在ESCC组织/细胞中的miR-3914和miR-8082表达均呈显著性降低(P 0. 05),但miR-4770无明显的表达变化. GO富集分析发现,miR-3914和miR-8082参与RNA聚合酶II启动子转录、蛋白结合和细胞凋亡等生物学过程; KEGG富集分析发现,miR-3914和miR-8082两者均与癌症相关通路有关,且均可调控LAMC2、CCDC6和PDGFB基因.当ESCC细胞分别转染miR-3914 mimic和miR-8082 mimic后,与未转染组比较,p53蛋白质表达增加,而c-Myc和Bcl-2蛋白质表达降低.研究结果表明,miR-3914和miR-8082各自均具有成为辅助ESCC早期诊断与精准治疗生物靶标的潜能.     

稳定同位素比质谱法鉴别茶油中掺杂玉米油研究

采用稳定同位素比质谱法进行茶油中掺杂具有相似化学特征的玉米油的研究。按照一定比例配制玉米油和茶油的混合样品。因为茶油和玉米油两者δ13C值的差异很大,当玉米油在15％以上时,本方法能够明确地判别茶油是否掺假了玉米油,并能对其百分含量做定量计算。该方法准确、稳定、操作简便,为食用荼油的监管工作提供技术支持。     

砷的不同形态在石菖蒲中的分布

建立砷元素6种形态的分析方法,研究砷的不同形态在石菖蒲不同部位中的含量、分布及转化。采用高效液相色谱法(HPLC)分离,色谱柱HAMILTON PR-X100阴离子交换柱(4.1 mm×250 mm,10μm);流动相A为水,流动相B为pH 8.5的碳酸铵(50mmol/L)与甲醇(1%)混合液,梯度洗脱,电感耦合等离子体原子发射光谱质谱联用仪(ICPMS)测定不同形态的砷。该方法线性范围为0.995~0.999,回收率为89%~97%。建立的检测方法准确、稳定、可靠。对石菖蒲根茎、叶及与外源性三价砷浸泡后的根茎、叶进行检测发现,石菖蒲样品中只存在砷的无机形态,且三价砷为主要存在的无机形态。石菖蒲的根茎为无机砷的主要富集部位,石菖蒲的根茎、叶均能将部分高毒性的三价砷转化为毒性较低的五价砷。     

电感耦合等离子体质谱法同时测定与食品接触 陶瓷制品中12种元素溶出量

目的建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时快速测定与食品接触陶瓷制品铅、镉、镍、铬、砷、锑、锌、钴、铜、锰、铝、钡等12种元素溶出量的分析方法。方法采用4%醋酸溶液,在(22±2)℃室温条件下避光浸泡样品24 h±20 min,以45Sc、72Ge、115In、209Bi作为内标,优化仪器参数和试验条件,用电感耦合等离子体质谱法同时测定浸泡液中12种元素溶出量,内标法定量。结果该方法的检出限为0.10~10.0μg/L,样品的加标回收率为90.0%~106.0%,相对标准偏差0.86%~4.31%。结论方法操作简便,准确度好,灵敏度高。可适用于食品接触陶瓷多种痕量有毒有害元素溶出量的检测。     

食品多组分添加剂及非法添加物的HPLC—HRMS广谱筛查

采用离子阱飞行时间串联质谱(LCMS-IT-TOF)技术对葡萄酒、果汁等饮料中多组分添加剂和禁用染料进行快速筛查和确证。构建了合成色素、甜味剂、禁用染料等41种化合物的精确分子质量数和多级质谱碎片离子数据库。样品经甲醇—水(体积比1;1)稀释后,以C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,甲醇和2mmol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱。筛查检出限为0.005~1.000 mg/kg。在3个添加浓度下平均回收率41.2%~114.1%,相对标准偏差(RSD)为4.3%~16.4%。利用精确质量数和数据库中质谱图的检索匹配度实现快速筛查;结合保留时间、同位素丰度和多级特征碎片离子对目标化合物进行确证。该方法具有简便快速、准确、灵敏度高等优点,同时可实现无标准物质的情况下,较短时间内完成对食品中可能存在的添加剂和非法添物进行筛查检测,缩短检测时间,提高检测效率。     

湖南茯砖茶香气成分的SPME-GC-TOF-MS分析

采用单因素对比试验方法确定固相微萃取湖南茯砖茶中香气成分的优化条件,并结合气相色谱-飞行时间-质谱法鉴定湖南茯砖茶香气组分。结果表明：固相微萃取与气相色谱-飞行时间-质谱联用分析湖南茯砖茶香气成分的最佳条件为DVB/CAR/PDMS萃取头（50/30 μm）、萃取温度80 ℃和萃取时间60 min。气相色谱-飞行时间-质谱法从3 个茯砖茶中共分离鉴定出93 种香气成分,占检出挥发性成分总量的90%以上,主要由酮类、醛类、碳氢类、杂氧类、醇类、酸类、酯类、含氮类8 类化合物构成。在鉴定出的香气化合物中共有香气组分50 个,其中含量较高的组分有反,反-2,4-庚二烯醛、甲基庚烯酮、2-戊基呋喃、香叶基丙酮、3,5-辛二烯-2-酮（E,E）、6-甲基-3,5-庚二烯-2-酮等。