大肠埃希O157:H7等致病菌多重PCR法快速检测试剂盒的研制

目的:研制一种能够同时快速检测大肠埃希O157:H7、志贺氏菌和致病性蜡样芽孢杆菌的三重PCR试剂盒.方法:以大肠埃希O157:H7的hlyAB基因、痢疾志贺氏菌的IpaH基因和致病性蜡样芽孢杆菌的hblA基因作为目的基因片段O157:H7、痢疾志贺氏菌和致病性蜡样芽孢杆菌的特异性抗原基因序列,分别设计1对引物,并对其反应条件进行优化,建立1种多重PCR检测试剂盒.结果:本试剂盒可准确检测出生肉和即食肉制品中的上述3种致病菌,O157:H7检出极限为19.8 cfu/mL,志贺氏菌检出极限为17 cfu/mL,蜡样芽孢杆菌检出极限为17.7 cfu/mL.可在5 h内完成全部反应过程,得出检测结果.结论:本试剂盒在理论和实际应用方面均具有优越性,能够同时检测上述3种病原菌,可用于食品及其原料的生物安全检测,也可用于兽医临床诊断.     

产角蛋白酶植物内生菌的筛选与鉴定

以不同植物的内生菌为出发菌株进行产角蛋白酶菌株的筛选,通过脱脂牛奶平板、高压蒸煮后的羽毛摇瓶实验及未经处理鸡毛摇瓶实验筛选到一株能够在48h内降解未经高压蒸煮的鸡毛的内生菌,该菌株来源于樟树叶片。通过形态学观察、生理生化实验结合16S rDNA基因序列分析的方法确定该菌株为蜡样芽孢杆菌,命名为Bacillus cereus Z-3。以不同的角蛋白为底物进行发酵培养,酶活力测定结果显示该酶降解角蛋白能力由强到弱的顺序为鸡毛、羊毛、头发。     

蜡状芽孢杆菌(Bacillus celreus)污染及其对食品安全的影响

蜡状芽孢杆菌是常见的食品污染菌，在工业化社会中正成为日益重要的食物病原菌。它能产生一种呕吐毒素和多种肠毒素，主要引发呕吐和腹泻型食物中毒。与蜡状芽孢杆菌同属的苏云金杆菌也能产生类似的肠毒素，近来发现它可能与食品中毒有关。我国应当加强对蜡状芽孢杆菌的监测和研究。     

蜡样芽孢杆菌ZH14产胞外核糖核酸酶的发酵条件的初步优化

实验研究了几种因素对蜡样芽孢杆菌ZH14产胞外核糖核酸酶的影响。ZH14分离自安溪乌龙茶,能产生具有抗肿瘤作用的核糖核酸酶。单因素实验确定最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏,最利于产酶的阴阳离子分别为NO3-和Mg2 ,含金属离子的无机盐KNO3和MgSO4.7H2O对产酶有促进作用。300 mL摇瓶装液量50 mL,37℃,150 r/min条件下发酵10 h时,酶活力达到最高值17.80 U/mL。核酸作为酶反应底物对ZH14产的核糖核酸酶无诱导作用。     

蜡样芽孢杆菌对稻草的降解作用

为了研究一株蜡样芽孢杆菌(Bacillussp.X10-1-2)对稻草的降解作用,测定了发酵过程中发酵液的纤维素酶和半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以及底物残渣重、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化.发现在发酵过程中蜡样芽孢杆菌菌体产酶的过程也就是木质纤维素的降解糖化过程.上清液中的纤维素酶活和半纤维素酶活分别在发酵进行到第8 h和20 h时达到最高峰.总糖含量于4 h达到最高值,然后下降到一定程度后保持恒定.还原糖含量随发酵进行不断下降,达到一定值后保持恒定.该菌株对稻草长达5 d的降解过程中结晶度变化十分显著,第3 d时达到最高峰,而后又迅速下降.此菌株对稻草中各组分都有一定降解,其中纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为3.35%、0.91%和2.81%.该菌株主要降解稻草的薄壁细胞,使薄壁细胞发生严重皱缩.这预示,该菌株在造纸工业具有良好的应用前景.     

混合菌利用制酒废水产生微生物絮凝剂的研究

从成都某污水处理厂活性污泥中分离、筛选了2株絮凝剂产生茵,初步鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和膜璞毕赤酵母(Pichia membranifaciens).利用制酒废水替代成本较高的传统培养基对这两株菌的混合菌(HXJ-1)的最佳产絮条件和絮凝剂的最佳絮凝条件进行了研究,得出了HXJ-1的最佳产絮务件:废水COD为12 000 mg/L,C/N值为20:1,相对接种量为10%(体积分数,菌体浓度为1×108个/L),初始pH值为3.6(制酒废水自然pH),摇床转速为120r/min,培养温度为30℃.在此条件下,发酵24 h所产生的絮凝剂XJBF-1)对高岭土悬浊液的絮凝率平均为89.50%.以浓度为l g/L的高岭土悬浊液(93 mL)为试验对象,得出了XJBF-1的最佳絮凝条件,即:絮凝体系的pH值为7;絮凝剂用量为2 mL;以l%的CaCl2为助凝剂,其投量为5mL.     

蜡样芽胞杆菌生长特性及大蒜精油对其抑菌活性的研究

主要研究了37℃条件下3种蜡样芽胞杆菌在营养肉汤中的生长状况，建立了37℃下蜡样芽胞杆菌在营养肉汤中的Boltzmann牛长模犁，3条牛长曲线相关系数鼯均大于0．97；检测了不同培养时间蜡样芽胞杆菌的产芽胞情况，结果表明1号菌株和14号菌株较早产芽胞，培养相同时间，产芽胞数：1号菌株，4号菌株〉标准菌株；采用牛沣杯法和平板计数法研究了大蒜精油对蜡样芽胞杆菌的抑制效果，结果表明浓度为lO。的人蒜精油对3种蜡样芽胞杆菌都有很好的抑制效果，3种菌株中l号菌株最难抑制。     

旱生植物内生细菌的分离及耐旱菌株的筛选鉴定

为筛选耐旱内生细菌,并对其进行鉴定,以典型耐旱植物为材料,分离纯化出142株内生细菌。采用液体培养基中添加聚乙二醇6000降低渗透势的方法分析内生细菌的耐旱情况。从中筛选出1株能够耐受质量浓度为60g/100mL聚乙二醇6000的内生细菌PB14。对该菌株进行形态学观察,生理生化和16S rDNA序列鉴定,判定菌株PB14为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。     

蜡状芽孢杆菌的筛选及其产氢性能

为了研究纯菌种对产氢的影响,从污水厂活性污泥中分离了纯的产氢菌种XN12,根据16S rDNA序列和DnaJ基因序列、细胞形态、生理生化数据等多项鉴定分析,该菌种被鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).为了研究该纯菌的产氢性能,实验以葡萄糖为底物,在不同pH值条件下观察其产气情况.实验结果表明:以每摩尔葡萄糖计,该菌在中性条件下获得最大产氢量为1.6 mol.对反应的液相产物的检验结果表明:该菌为丁酸发酵菌,通过丙酮酸代谢途径产出氢气.     

Bacillus subtilis HJ18‐4 from Traditional Fermented Soybean Food Inhibits Bacillus cereus Growth and Toxin‐Related Genes

Bacillus subtilis HJ18‐4 isolated from buckwheat sokseongjang, a traditional Korean fermented soybean food, exhibits broad‐spectrum antimicrobial activity against foodborne pathogens, including Bacillus cereus. In this study, we investigated the antibacterial efficacy and regulation of toxin gene expression in B. cereus by B. subtilis HJ18‐4. Expression of B. cereus toxin–related genes (groEL, nheA, nheC, and entFM) was downregulated by B. subtilis HJ18‐4, which also exhibited strong antibacterial activity against B. cereus. We also found that water extracts of soy product fermented with B. subtilis HJ18‐4 significantly inhibited the growth of B. cereus and toxin expression. These results indicate that B. subtilis HJ18‐4 could be used as an antimicrobial agent to control B. cereus in the fermented soybean food industry. Our findings also provide an opportunity to develop an efficient biological control agent against B. cereus.