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目的原核表达新德里金属-β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1),并制备其多克隆抗体。方法以临床分离的产NDM-1的臭鼻克雷伯杆菌为模板,PCR扩增NDM-1基因,克隆入pET-28a载体,构建重组原核表达质粒pET-28a-NDM-1,转化E.coli BL21(DE3)pLyss,IPTG诱导表达重组蛋白。表达的重组蛋白经硫酸铵沉淀、离子交换层析、Ni亲和层析及分子筛层析纯化后,免疫日本大耳白兔,制备NDM-1多克隆抗体。抗体经硫酸铵沉淀和SPA-Sepharose亲和层析纯化后,Western blot鉴定其特异性。结果重组表达质粒pET-28a-NDM-1经PCR及测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为28 000,诱导表达的重组菌破菌上清存在较强的β-内酰胺酶活性,表明NDM-1蛋白为可溶性形式表达;最终纯化获得的NDM-1蛋白纯度高于95%;制备的NDM-1多克隆抗体能与诱导表达的重组菌胞外蛋白特异性结合。结论成功原核表达了NDM-1,并制备了其多克隆抗体,为NDM-1的快速检测提供了新的思路。  相似文献   
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谈多媒体教学中的利与弊   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文是作者在运用多媒体教学过程中的体会,阐述了多媒体教学手段在教学中存在作用和不足之处,以期望各位教学工作者能正确看待和使用多媒体教学手段,达到最佳的教学效果。  相似文献   
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供应链管理 ,是当前企业管理领域中十分流行且有效的技术。企业实施供应链管理就要做到 :强化合作意识 ,寻求合适的合作企业 ,建立合作企业间的信任机制 ,及时解决合作企业间的问题 ,投资建设物质技术基础设施 ,从而建好供应链 ;运用现代技术———系统管理技术 (SMT)、运筹学 (OR)、管理科学 (MS)、决策支持系统 (DSS)、信息技术 (IT) ,管好供应链。  相似文献   
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与硅(Si)功率器件相比,碳化硅(SiC)功率器件的掺杂浓度更高,禁带更宽,在高电压下导通阻抗更小,因此应用于大功率场合可以提高开关频率,减小变换器体积重量。根据SiC MOSFET的开关特性,设计了一种SiC MOSFET的驱动电路,采用双脉冲电路对其开关时间、开关损耗等进行了实验测量,分析了不同阻值驱动电阻对SiC MOSFET模块开关时间和开关损耗的影响。  相似文献   
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