环氧树脂固定化拟南芥腈水解酶NIT的研究

游离酶不易回收,很难重复利用,而固定化酶重复利用度高。利用LX-1000EP(C)环氧树脂作为载体对腈水解酶进行固定化,研究了其最优固定化条件及其稳定性。最佳固定化条件为:固定化温度为20℃,固定化过程中缓冲液为磷酸钾缓冲液,pH8.0,浓度为0.1mol/L,加量为每克载体加10mL的粗酶液。固定化腈水解酶的最高酶活回收率达到98.1%,固定化酶在重复使用6次后,酶活仍能保持在初始酶活的30%以上。     

环氧化物水解酶在手性药物中间体合成中的应用

环氧化物水解酶介导的生物转化过程具有高效率、高选择性、反应温和等优点,其在手性药物中间体的合成中的应用越来越受到人们的关注。介绍了环氧化物水解酶在手性环氧化物及邻位二醇等手性药物中间体制备中的应用。     

农用抗生素刺糖菌素(Spinosads)的研究进展

本文综述了农用抗生素刺糖菌素的研究进展，主要论述了它的理化性质，生理特性、发酵生产、分离提取、分析检测、活性谱和LD50，旨在为刺糖菌素的研究开发提供参考。     

生物转化生产二羟基丙酮的研究进展

介绍了二羟基丙酮的用途及生物转化甘油生产二羟基丙酮的代谢途径和机理,综述了近年来国外生物转化生产二羟基丙酮的进展,并对二羟基丙酮的应用前景进行了展望.     

2,2-二甲基环丙腈水合酶产生菌的氮离子注入选育及突变株产酶条件研究

离子注入技术被广泛应用于微生物的品种改良.利用N 离子注入法对本实验室筛选并保藏的产2,2-二甲基环丙腈水合酶菌种Pseudomonas sp.ZJUT0509进行选育,以提高2,2-二甲基环丙甲酰胺的产量,为进一步的手性拆分提供更多的原料.结果表明,氮离子注入诱变Pseudomonas sp.ZJUT0509的存活率曲线符合离子注入诱变的"马鞍型"特征曲线.通过离子注入获得的突变株的腈水合酶活性有显著提高,其中突变株F60-4的酶活达30.1 U·mL-1,约为原始菌株的9倍.对突变株F60-4进行产酶条件的优化考察,获得了培养条件.F60-4菌株产酶的最佳碳源是葡萄糖(2 g·L-1),最佳氮源是酵母粉(10 g·L-1),最适初始pH值为6.5,最适发酵温度为20℃,最佳诱导剂为1.0g·L-1的己内酰胺.与原始菌株Pseudomonas sp.ZJUT0509相比,突变株F60-4对有机氮源的利用率更高.最佳诱导剂由己内酰胺代替了原来的2,2-二甲基环丙甲腈,使实验操作简便.突变株F60-4的发酵周期为36 h,比原始菌株缩短了12 h.     

重组大肠杆菌发酵过程中乙酸的控制

大肠杆菌是基因工程常用的宿主菌,广泛应用于外源蛋白表达。但在大肠杆菌发酵培养过程中会产生一些有害的副产物,危害较大且最为常见的是乙酸。乙酸会影响大肠杆菌的生长和目的蛋白的表达,严重影响了生产效率。本文概括了乙酸产生的机理,并在发酵过程调控和分子调控两个方面,就近年来控制乙酸生成的研究进行总结。     

真菌α—淀粉酶应用于面包生产的研究

对自制的真菌α－淀粉酶在面包生产中应用进行了研究，结果表明：添加真菌α－淀粉敏，可以缩短面包发酵时间，面包体积明显增大，品质得到改善。将酶与乳化剂、Ｖｃ配合制备面包添加剂，效果令人满意。     

酶法合成阿托伐他汀侧链中间体（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的研究进展

第三代羟甲戊二酰辅酶A （HMG-CoA）还原酶抑制剂——阿托伐他汀是年销售额超过百亿的重磅降血脂药物,因其疗效显著而广受医生患者好评.阿托伐他汀主要通过疏水性母核及手性侧链进行合成,而手性侧链的制备是合成关键.目前,生物催化技术在手性药物合成中的应用备受关注,而阿托伐他汀手性侧链中间体（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的酶法合成也成为研究热点.本文主要介绍近年酶法合成在（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的研究进展.     

蜡状芽孢杆菌ZJB-07112酰胺酶的分离纯化及其酶学性质

用一株蜡状芽孢杆菌新菌株ZJB-07112 (Bacillus cereus ZJB-07112)发酵生产酰胺酶,经超声波细胞破碎、High Q阴离子色谱、Phenyl-Sepharose疏水色谱等步骤获得了凝胶电泳均一的酰胺酶。用12.5% SDS-PAGE测得该酶的分子量约为60.6 kD。其N端氨基酸序列为ATIRPDDKAI。该酶水解反应的最适pH和最适温度分别为7.5和35 ℃。在pH 7.5条件下,该酶在50 ℃以上容易失活,60 ℃保温30 min后,仅保留10.8%的酶活。除了Hg⁺ 、Ag⁺等重金属离子和尿素外,其他金属离子和EDTA对该酶的活性影响不大。以丙烯酰胺为底物时,该酶的K_m和V_max值分别为2.64 mmol·L^-1和0.6 μmol·min^-1·ml^-1。     

重组短链脱氢酶LcSDR催化(R)-1-苯基乙醇不对称合成的工艺开发

采用基因挖掘技术从Lactobacillus composti基因组中筛选到一条编码短链脱氢酶(LcSDR)的序列,该LcSDR能不对称还原苯乙酮(1a)合成(R)-1-苯基乙醇[(R)-1b]。构建了Lc SDR和葡萄糖脱氢酶(EsGDH)双酶偶联催化合成体系,优化了Lc SDR不对称还原1a合成(R)-1b的催化工艺参数。在较佳催化条件下,50 g/L1a转化反应2 h,产物(R)-1b得率93.8%,产物对映体过量值(eep)高于99%,该手性生物合成催化过程的时空产率达到562.8 g/(L·d)。