艾塞那肽的合成研究

艾塞那肽是胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的类似物,由39个氨基酸组成,具有双激素靶向调控血糖的作用。本文对艾塞那肽的合成新方法进行了研究,将原肽拆分成六个全保护片段,分别经过独立的固相或液相方法合成,然后对片段进行组装,经切割、纯化,得到艾塞那肽产品0.98g,纯度﹥98%,总收率33.8%。切割时保留Fmoc-保护基可以使目标峰与杂峰有效分离。该方法结合了固相和液相合成的特点,与传统方法相比,是一种周期较短、纯化方便和收率较高的合成艾赛那肽的方法。     

GHK及GHK-Cu纯化方法研究

建立高效、快速、简便的纯化GHK和GHK-Cu的方法,以便提高GHK和GHK-Cu的纯度,减少过敏反应。该方法通过离子交换色谱除去GHK及GHK-Cu中的三氟乙酸及部分杂质,再通过反相色谱纯化得到纯度96%的GHK及GHK-Cu醋酸盐。此方法仅需两步纯化,降低了生产成本,不仅能得到纯度大于96%的GHK和GHK-Cu,而且能达到纯化GHK成本低、收率高、产业化的要求。     

二种固相合成艾塞那肽方法比较

介绍了两种艾塞那肽的合成方法,为艾塞那肽规模化生产方法的选择提供有意义的参考。通过采用经典的固相逐个延伸法和固相四片段片段合成方法,并用两种方法分别合成艾塞那肽,对结果进行了分析和讨论。结果表明,综合工艺难度、工艺稳定性、合成成本等方面因素考虑,艾塞那肽合成采用逐个延伸法合成综合效果更优。     

透皮肽纯化方法研究

建立高效、快速、简便的纯化透皮肽的方法,以便提高透皮肽的纯度,减少过敏反应。采用反相聚合物色谱柱去除六胜肽中的杂质,再用DEAE色谱柱除去大批量透皮肽粗品中的三氟乙酸,得到醋酸型的透皮肽。此方法仅需两步纯化,降低了生产成本,不仅能得到纯度大于99%的透皮肽,而且能达到纯化透皮肽成本低、收率高、产业化的要求。     

艾塞那肽的合成

首先采取C-N延伸策略,将艾塞那肽的39个氨基酸分成4个片段,分别采用固相法合成4段全保护片段;再将4段全保护片段依次进行组装连接,得到艾塞那肽树脂;最后进行切割,得到艾塞那肽粗品。质谱分析表明,合成的艾塞那肽结构正确,纯度较高。该方法克服了传统固相合成法纯化困难、规模化困难的问题,提高了合成效率,减少了杂质累积,降低了纯化难度,适合规模化生产。     

艾塞那肽的合成

艾塞那肽是胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的类似物,由39个氨基酸组成,具有双激素靶向调控血糖的作用。该文对艾塞那肽的合成方法进行了研究,将原肽拆分成6个全保护片段,分别经过独立的固相或液相方法合成,然后对片段进行组装,经切割、纯化,得到艾塞那肽产品0.98 g,纯度﹥98%,总收率33.8%。切割时保留Fmoc-保护基可以使目标峰与杂峰有效分离。该方法结合了固相和液相合成的特点,与传统方法相比,是一种周期较短、纯化方便和收率较高的合成艾塞那肽的方法。     

三肽D-Trp-Arg-Leu-NH2抑制B16黑色素瘤细胞黑色素合成的机制

为了研究三肽D-Trp-Arg-Leu-NH₂(dWRL)对小鼠B16细胞的酪氨酸酶(TYR)活性、黑色素合成及相关基因和蛋白表达的影响，探讨dWRL抑制黑色素生成的可能机制，我们体外培养小鼠B16细胞，采用MTT法测定细胞增殖情况、L-多巴氧化法测定TYR活性、氢氧化钠裂解法测定细胞黑色素含量、qRT-PCR和Western Blot法分别检测药物作用后B16细胞中小眼畸形相关转录因子(MITF)、TYR的mRNA和蛋白表达水平。结果显示三肽dWRL在试验浓度范围内可明显抑制α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)诱导的B16细胞内TYR活性、黑色素合成量及MITF、TYR基因及蛋白的表达量，且呈浓度依赖性。所以三肽dWRL在体外能抑制B16细胞黑色素的合成，上述变化可能是通过下调MITF和TYR的基因转录和蛋白表达作用来完成。