红色红曲菌组蛋白去乙酰化酶MrSir2的原核表达及活性分析

根据基因组序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)得到了红色红曲菌中组蛋白去乙酰化酶mrsir2基因的完整cDNA序列,其编码序列(coding sequence,CDS)为1539 bp,编码512个氨基酸,含有一个SIR2蛋白保守结构域。根据大肠杆菌的密码子的偏好性对mrsir2序列进行优化,优化后的序列与p ET-28b载体连接后转入宿主菌E.coli BL21中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。实验结果表明:在16℃条件下用终浓度为0.25 mM的IPTG诱导培养16 h后,目的蛋白Mr Sir2可溶性表达效果良好。Ni2+柱亲和层析纯化后的Mr Sir2重组蛋白在SDS-PAGE上显示为一条约75 ku大小的条带,蛋白定量浓度达1.97 mg/mL,经Western blot鉴定为目的蛋白,测定酶活为78.5(OD/min/mg),780μM的二氢香豆素(dihydrocoumarin,DHC)对Mr Sir2蛋白的酶活抑制率为47%。Mr Sir2蛋白的可溶性表达为全面了解其酶学特征提供了材料,也为体外分析蛋白相互作用奠定了基础。     

乙酰化羟丙基糯玉米淀粉对速冻汤圆品质的影响

为提高速冻汤圆的食用品质,以乙酰化羟丙基糯玉米淀粉(acetylated hydroxypropyl waxy corn starch,AHWCS)作为品质改良剂,探究其对速冻汤圆的蒸煮、质构特性和感官品质的影响。结果表明,当添加质量分数为20%时,在蒸煮特性方面速冻汤圆失重率为9. 95%、蒸煮损失率为0. 93%、冻裂率为13. 33%,均为最低;汤汁透光率为7. 43%,为最高。在质构特性方面,硬度、咀嚼性较低,质地松软,弹性最高。在感官品质方面,汤圆表面光滑、色泽鲜亮、口感柔软、有浓厚的糯米清香味,感官评分最高,为90. 67分,汤圆品质最佳。因此,添加适当比例的AHWCS可有效改善速冻汤圆的品质,这为其在速冻食品中的应用提供了基础。     

EGCG升高cTnIR193H限制型心肌病模型小鼠未突变cTnI的表达水平

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）升高cTnIR193H限制型心肌病模型小鼠未突变cTnI的表达水平。方法:8周龄野生型C57小鼠及8周龄cTnIR193H限制型心肌病模型小鼠分别随机分为EGCG干预组、DMSO干预组以及未干预组。每周干预5 d,3个月后采集小鼠心脏组织。分别以Western blot与RT-PCR分别检测HDAC1、GATA4及cTnI 的mRNA表达水平。组蛋白H3K9乙酰化水平、cTnI基因启动子区域中的GATA4与HDAC1结合水平以ChIP-Q-PCR方式检测。结果:EGCG干预组未突变cTnI蛋白表达水平与mRNA表达水平、GATA4的mRNA表达水平、组蛋白H3K9乙酰化水平、cTnI启动子区域GATA4的结合水平均高于未干预组（P<0.05）。cTnI启动子区域HDAC1结合水平、HDAC1的mRNA表达水平均低于未干预组（P<0.05）。 结论:在EGCG干预R193H模型小鼠实验中,EGCG可抑制HDAC1的表达,抑制cTnI启动子区域HDAC1的结合,促进心脏核心转录因子GATA4的表达、组蛋白H3K9的乙酰化、及cTnI启动子区域GATA4的结合,上调心肌的未突变cTnI的表达水平。     

2,6-二溴-4-甲基乙酰苯胺的一步合成

研究了2,6-二溴-4-甲基乙酰苯胺的一步合成反应,优化了合成的条件。通过增加加热时间及蒸馏步骤,使得串联反应得以发生,从而获得最终的目标产物。筛选的最佳合成条件:以4-甲基苯胺为原料,经过溴代反应、加热酰化利用溶剂乙酸直接获得氨基保护的最终产物,产率高达93%。     

白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇对小鼠辐射损伤的防护作用

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)衍生物白皮杉醇(piceatannol)和乙酰化白藜芦醇(acetylated resveratrol)对小鼠辐射损伤的防护作用。方法将昆明小鼠随机分为8组:正常对照组、照射对照组、白皮杉醇低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和乙酰化白藜芦醇低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组,每组6只。小鼠经5.5 Gy 60Coγ射线一次性全身照射前2 h灌胃给药,对照组均灌服含2%DMSO的生理盐水溶液。照射后24 h,观察小鼠脾脏和胸腺系数、外周血淋巴细胞数量和百分率、血浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及骨髓嗜多染红细胞微核率的变化。结果与正常对照组相比,照射对照组小鼠脾脏和胸腺系数、外周血淋巴细胞数量和百分率及血浆SOD活力均显著降低(P<0.05或P<0.01),骨髓嗜多染红细胞微核率显著升高(P<0.01)。与照射对照组相比,白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇各剂量组脾脏系数均显著增高(P<0.05或P<0.01),但胸腺系数差异无统计学意义(P>0.05);乙酰化白藜芦醇中、高剂量组外周血淋巴细胞数量和淋巴细胞百分率均显著升高(P<0.05或P<0.01);白皮杉醇中、高剂量组以及乙酰化白藜芦醇各剂量组血浆SOD活力均显著升高(P<0.05或P<0.01);白皮杉醇及乙酰化白藜芦醇各剂量组骨髓嗜多染红细胞微核率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论白藜芦醇衍生物白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇均对小鼠具有一定的辐射损伤防护作用,其作用机制与提高机体免疫能力、清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)、保护造血组织免于辐射诱发的损伤有关。     

交联氧化乙酰化蜡质玉米淀粉性质的研究

以蜡质玉米淀粉为原料、三偏磷酸钠为交联剂、次氯酸钠为氧化剂、醋酸酐为乙酰化试剂,采用湿法工艺制备交联氧化乙酰化复合变性淀粉,并利用扫描电镜(SEM)及红外光谱仪(FT-IR)分析其淀粉颗粒的形貌及结构。结果显示:复合变性处理后的淀粉白度升高至97.2,糊透光率升高至71.0%,耐酸及抗剪切性能也有所改善。扫描电镜图表现了淀粉颗粒形貌的变化,红外光谱图中展现的各基团的特征吸收峰表明其分子结构发生了改变。蜡质玉米淀粉采用复合变性的处理手段,有益于增强其在食品加工领域的应用价值。     

丹皮酚的合成工艺改进

目的改进丹皮酚的合成工艺。方法以间苯二酚为原料,经乙酰化、甲基化反应,后经重结晶,得到丹皮酚针状结晶。结果合成丹皮酚总收率68%(纯度99.99%)。所得产品经熔点、质谱和核磁共振氢谱等方法确证结构。结论本工艺制备得到高纯度、高收率丹皮酚。制备过程操作简单,适合工业化生产。     

新型喹唑啉酮类衍生物的设计、合成与体外抗肿瘤活性评价

为发现具有抗实体瘤活性的新型喹唑啉酮类衍生物，以2-氨基-6-氯苯甲酸为原料，经缩合、环合、亲核取代、脱Boc、芳族亲核取代以及羟胺解反应，得到3个目标分子，并通过¹HNMR、¹³CNMR以及HR-MS对其进行了结构确证。目标化合物的抗增殖活性测试结果表明，所有目标分子对PC-3、MDA-MB-231以及T-47D这3种实体瘤细胞株的增殖抑制活性均与阳性对照SAHA、Idelalisib相当或更优，且对正常细胞毒性较低。分子对接的结果，揭示了目标化合物与PI3Kδ蛋白以及HDAC蛋白的可能结合模式。     

端氯乙酰氧基原子转移自由基大分子引发剂的合成

用正丁基锂为引发剂，以苯、环己烷等为溶剂，加入苯乙烯或丁二烯聚合形成活性负离子，然后加入环氧乙烷封端形成烷氧基锂，最后加入氯乙酰氯进行氯乙酰化形成具有原子转移自由基引发基团的大分子引发剂。这些大分子引发剂引发原子转移自由基聚合合成的嵌段共聚物的结构已通过核磁共振谱图和红外光谱得到确认。     

邻乙酰氨基苯酚合成方法的改进

对邻氨基苯酚的N－乙酰化工业方法进行了改进，以邻氨基苯酚为原料，采用水作分散介质、盐酸作催化剂，合成邻乙酰基氨基苯酚，收率较高，结果满意，为工业生产提出了另一可行途径。