毕赤酵母全细胞催化合成新型高倍甜味剂莱鲍迪苷A

本研究构建经密码子优化后的UDP-糖基转移酶UGT76G1和蔗糖合成酶AtSUS基因的重组毕赤酵母菌株GS115/p PIC9KUGT/p PICZA-At SUS,实现双酶在毕赤酵母中的胞内共表达。利用共表达菌株作为全细胞催化剂在体外进行催化反应,可成功将ST转化为RA,并在此基础上对其最适反应温度、反应p H、底物UDP浓度与底物蔗糖浓度条件进行优化。重组菌株经甲醇诱导,对不同发酵时间菌体的催化能力进行探究,确定发酵120 h菌体催化能力最佳,RA产量为0.58 mg/mL。对共表达菌株催化体系中全细胞催化条件进行优化,优化后的催化体系为:反应pH 7.0,UDP浓度1 mM,蔗糖浓度70 mM,MgCl_2浓度3 mM,ST浓度10 mg/mL,将OD_(600)为30的细胞与上述体系混合后在最适温度45℃下,200 r/min反应15 h,重组菌可将10 mg/mL ST转化为7.46 mg/mL RA,为RA酶法生物合成及其产业化应用提供技术支持。     

人工甜味剂的应用及其对人体带来的影响

甜味剂是一种食品添加剂,它能够使食品具有甜味,我们在很多食用产品中都能看见它的身影,已成为现今食品工业中必不可少的物质。甜味剂的分类方式有很多种,按照来源,可将甜味剂分为天然甜味剂和人工合成甜味剂。天然甜味剂常见的有糖、糖浆、糖醇、一些非糖类天然甜味剂、天然物的衍生甜味剂如氨基酸和二肽衍生物、二氢查尔酮衍生物等。人工合成甜味剂中常见的,也是本文将要着重讨论的有糖精、甜蜜素阿斯巴甜和三氯蔗糖几类物质。人工甜味剂的特征——高甜度、无能量的产生,使得其受到广大消费者的喜爱,其应用也非常广泛,但有研究表明人工甜味剂的使用会对人体健康带来一定的影响,本文将探讨人工合成甜味剂的应用实例,以及人工甜味剂的食用对人体可能带来的影响。     

高效液相色谱法测定保健品益生菌粉中三氯蔗糖的不确定度评估

目的 按照食品安全国家标准GB 22255-2014规定的高效液相色谱法对保健品益生菌粉中三氯蔗糖含量进行测定。根据CNAS-GL006：2019要求以及JJF1059.1-2012对测定过程中影响检验结果的各个分量进行评估。方法 通过对测量重复性、标准品溶液配制、样品溶液的配制、高效液相色谱仪以及标准曲线拟合测量偏差这5个方面引入的不确定度进行分析,并确定各个不确定度分量,得到扩展不确定度。结果 经测定,保健品益生菌粉中三氯蔗糖含量为(0.78±0.046)g/kg,P=95%,(k=2)结论 高效液相色谱法因素对测量不确定度影响显著,由检验方法重复测量和标准品溶液配制体现。     

酱腌菜中三氯蔗糖的检测

实验利用液相色谱质谱联用的检测方法(LV-MS)进行检测,样品经水超声提取,亚铁氰化钾和乙酸锌溶液去除蛋白等杂质后,用甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱,资生堂MGⅡC₁₈色谱柱(5 μm,100 mm×2.1 mm)分离,电喷雾负离子模式电离,以395/359为定量离子,395/36为定性离子,进行定性定量分析,方法定量限为0.5mg/kg。     

双频超声强化酯交换合成蔗糖月桂酸单酯工艺

以蔗糖、月桂酸甲酯为主要原料,无水K_2CO_3为催化剂,研究双频超声协同强化合成蔗糖月桂酸单酯工艺。单因素和正交实验表明,超声场中强化合成蔗糖月桂单酯的最优工艺条件为:糖酯摩尔比6∶1,温度80℃,声强1.050 W/cm²,超声作用时间3 h,催化剂占月桂酸甲酯质量的12%。在此条件下,单酯产率达87.99%。     

大规模纯化脊髓灰质炎病毒的蔗糖垫层离心法的建立

目的建立可大规模纯化脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)的蔗糖垫层离心法。方法病毒大量增殖后,收集病毒液,经PEG浓缩、三氟三氯乙烷抽提后,采用蔗糖垫层或Cs Cl密度梯度离心法纯化PV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型),电镜下观察病毒形态,进行核酸及感染性滴度的检测。将纯化的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型PV免疫豚鼠,心脏采血,分离血清,微量中和试验法检测血清中和抗体滴度。结果蔗糖垫层离心法纯化的各型PV,病毒颗粒形态典型,背景清晰,除完整的光滑型病毒颗粒外,还可见大量空心病毒颗粒样品,纯化效果较好;Cs Cl密度梯度离心法纯化的PV样品,病毒形态也较典型,但完整的病毒颗粒较多。两种纯化方法获得的病毒基因组核酸特征显著,背景清晰,无明显差异。蔗糖垫层离心法纯化的各型PV的感染性滴度及免疫后豚鼠血清中和抗体滴度均高于Cs Cl密度梯度离心法。结论蔗糖垫层离心法纯化的PV纯度高,免疫原性好,可用于大规模纯化PV或其他病毒。     

米曲霉发酵蔗糖生产曲酸的培养基优化

对米曲霉(Aspergillus oryzae)GIM3.423生产曲酸的培养基进行优化,研究蔗糖浓度、氮源、乙醇和无机盐等对曲酸产量、转化率和生物量的影响,单因素试验结合正交实验方法确定其最佳的发酵培养基:蔗糖8%,酵母膏0.3%,乙醇2%,KH_2PO_40.1%,MgSO_4·7H_2O 0.05%,KCl 0.05%,在此条件下进行发酵试验,曲酸浓度可达14.91g/L,比优化前提高了2.2倍,转化率达到21%。     

鉴定和防治混凝土泌水性的砂浆试验方法

混凝土产生泌水会影响混凝土结构的外观和质量,其产生原因有多种,施工现场需要迅速确定产生原因并及时解决。本文提出一种快速鉴定和防治混凝土泌水性的新方法—砂浆泌水检验法,对施工现场混凝土泌水的主要原因提供了一种简单易行的确定方法。文中还对采用掺加一定量的蔗糖减少混凝土泌水性进行了研究,并取得良好的工程应用效果。