番石榴叶抑制酪氨酸酶作用机制研究

采用测定L-多巴被酪氨酸酶催化氧化速率的方法,研究番石榴叶粉乙醇提取液对酪氨酸酶活性的抑制作用。研究表明,由番石榴叶水提物抑制酪氨酸酶的Lineweaver-Burk双倒数直线图可知,番石榴叶水提物对酪氨酸酶的抑制作用类型为可逆、混合型。     

静电纺丝法制备ZnO构建酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

电化学生物传感器在环境监测、生物与食品分析等领域应用广泛。本文采用静电纺丝法制备了氧化锌微纳米纤维材料，并负载酪氨酸酶（Tyr）构建了检测邻苯二酚的生物传感电极。利用X射线粉末衍射（XRD）、扫描电子显微镜（SEM）表征了氧化锌微纳米纤维的形貌结构，采用循环伏安法（CV）和计时电流法（IT）优化了检测邻苯二酚的工作条件。结果表明，制备的Tyr/ZnO/CS/GCE生物传感电极具有良好的电化学性能，在反应过程中为扩散控制，对邻苯二酚的检测在5～50μmol/L的浓度范围内具有较好的线性关系，最低检测限为1.9041μmol/L，灵敏度为376.31μA/(mmol·L·cm²)，氧化锌的加入可增强酪氨酸酶的稳定性，在尿素、多巴胺和葡萄糖3种电化学活性相近物质存在的情况下仍对邻苯二酚的检测有较好的选择性，且具有良好的循环稳定性。     

桑叶黄酮抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

采用超声波辅助法,以体积分数为60%的乙醇水溶液从新疆桑叶粉末中提取桑叶黄酮。以L-多巴为底物,采用酶动力学方法研究该提取物对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,桑叶黄酮提取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其IC50为0.2 g·L-1。其对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆效应,抑制类型为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为366和873 mg·L-1。DPPH实验显示新疆桑叶黄酮提取物具有一定的抗氧化作用,对DPPH自由基氧化作用相对活性的IC50为25 mg·L-1,与VC效果相当。     

具有酪氨酸酶抑制作用的酵母多肽的分离纯化及分子量分布

为确定具有较好酪氨酸酶抑制作用的酵母多肽的分子量,对酵母多肽粗制品溶液以截留相对分子量为10 KDa、5 KDa、1 KDa的超滤膜进行超滤,采用生化酶法对不同超滤组分进行酪氨酸酶抑制活性检测。结果显示,各多肽组分的活性随相对分子量的减少而增大,活性多肽的相对分子量主要集中在1 KDa以下。对相对分子量1 KDa的多肽组分依次以DEAE-52阴离子交换柱层析法和Sephadex G-15凝胶层柱析法进行分离,最后得到4个洗脱组分,分别富集各洗脱组分并进行酪氨酸酶抑制活性研究。结果表明,组分d-1活性最佳,其IC50值为3.53 mg/mL。经高效液相空间排阻色谱分析,d-1组分多肽的相对分子质量主要集中在200~800 Da。     

核桃多酚对酪氨酸酶的作用

核桃多酚主要含黄酮类和酚酸类化合物,它们不仅能通过干扰酪氨酸酶活性而影响黑色素合成及黄褐斑的形成,也有很好的抗紫外线、抗氧化、清除自由基等功效,是一种很有潜力的天然护肤因子。本文就核桃多酚对酪氨酸酶的作用作一综述,为综合利用核桃资源开发天然植物祛斑产品提供参考。     

在基因检测指导下非小细胞肺癌患者接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗临床疗效比较

目的:探讨病理组织切片和外周血检测基因突变的一致性,不同EGFR敏感突变类型NSCLC患者一线接受EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗的疗效和预后。方法:回顾性分析2016年1月-2017年2月收治的接受EGFR基因检测的晚期NSCLC患者62例的临床资料。比较应用病理组织片和外周血检测基因突变结果的一致性,比较EGFR基因突变组与野生组的临床特征及2种EGFR基因型突变患者EGFR-TKIs治疗的近期疗效和中位无进展生存时间(PFS)。结果:病理组织切片和外周血检测EGFR基因的一致性达0.8(P<0.05)。两组病理类型和吸烟史比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组性别、年龄、TNM分期、体力评分(ECOG)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。19del组和L858R组的客观有效率(ORR)和疾病控制率(DCR)比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而19del组的中位PFS优于L858R组(P<0.05)。10例患者进行基因捕获与高通量测序法(NGS)检测发现,3例EGFR-TKIs治疗无效的患者中,存在PIK3CA突变2例。结论:病理组织切片和外周血EGFR基因检测结果一致性较好,外周血基因检测可以成为临床无法取得病理组织标本患者的替代选择。EGFR-TKIs治疗EGFR突变,19del基因型患者预后可能好于L858R基因型,而下游基因如PIK3CA基因突变可能会引起EGFR-TKIs药物耐药,影响疗效。     

Hf-ZnO酪氨酸酶生物传感器检测邻苯二酚

以四氯化铪(HfCl4)和硝酸锌为原料，通过水热法制得Hf掺杂氧化锌纳米材料(Hf-ZnO)，并将Hf-ZnO、酪氨酸酶(Tyr)和壳聚糖(CS)修饰在玻碳电极(GCE)上,制得Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE生物电极。利用FESEM、DLS、XRD和XPS对Hf-ZnO的结构和性能进行表征。采用循环伏安伏安法(CV)和计时电流法(IT)对Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极进行电化学测试。结果表明，Tyr/Hf-ZnO/CS/GCE电极在pH 5和-50 mV的低电势下对邻苯二酚有最佳检测能力，对邻苯二酚检测的线性范围是0.5~47 μmol/L，灵敏度为195 μA/(mmol/L)，检测限是0.1215 μmol/L(S/N=3)。此外，该生物电极的稳定性和重复性好，可有效避免尿素、多巴胺、抗坏血酸等与邻苯二酚电活性相近物质的干扰。     

酪氨酸酶催化乳清蛋白聚合耦联超滤的效果研究

采用酪氨酸酶催化乳清蛋白聚合,酪氨酸酶催化蛋白的条件为pH 7.0,温度50℃,时间为3 h,酶活添加量为1 000 U/g蛋白时,相对于没有通过酶处理的样品,蛋白的膜回收效率和膜通量明显提高。膜通量与对照组相比提高20%。蛋白回收率与对照组相比提高27%左右。乳糖的截留率降低8%左右。此时,膜总阻力R_t和膜孔阻力R_p与对照组相比分别降低16%和33%。膜污染模型分析结果显示,酪氨酸酶催化蛋白膜过滤符合标准堵塞模型和饼层过滤模型。     

姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶抑制活性的研究

酪氨酸酶抑制剂广泛应用于皮肤美白化妆品中.通过芳香醛分别与丙酮和环戊酮在酸性条件下催化缩合,合成了两个系列共10个姜黄素多酚类似物(A1-5和B1-5),并研究了其对酪氨酸酶的抑制活性.结果表明,含邻二酚羟基的姜黄素多酚类似物(A4和B4)对酪氰酸酶具有很强的抑制作用,半抑制浓度(IC50)分别为1.19,1.24 μmol/L,比曲酸(IC50为28.59μmoL/L)的活性强20多倍.抑制动力学研究表明,该类姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶的抑制属于非竞争性抑制类型.