ZIF-12在检测抗坏血酸和L-色氨酸中的应用

采用室温搅拌法合成分子筛咪唑框架-12(ZIF-12),对其进行了X-射线衍射、电镜扫描和红外表征.将其制备成ZIF-12/gelatin/GCE电化学传感器,并采用循环伏安法对检测抗坏血酸、L-色氨酸及抗坏血酸和L-色氨酸进行同步检测.结果表明,ZIF-12作为电化学传感器材料应用于对抗坏血酸、L-色氨酸及抗坏血酸和L-色氨酸的同步检测,有良好的电化学响应.     

代谢工程改造大肠杆菌合成反式-4-羟基-L-脯氨酸

通过比对筛选,从Micromonospora sp.CNB394中获得高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,随后利用规律成簇的间隔短回文重复-associated protein 9基因编辑方法,通过强化L-脯氨酸合成途径和引入高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,构建1株以葡萄糖为碳源合成反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌基因工程菌HYP15。摇瓶发酵30 h,工程菌的反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到13.6 g/L。5 L发酵罐分批补料发酵40 h,反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到48.6 g/L,糖酸转化率和平均生产强度分别达到21.6%和1.22 g/(L h),具有良好的工业应用前景。     

微生物发酵法生产L-异亮氨酸的研究进展

L-异亮氨酸作为三大支链氨基酸之一，在食品、牲畜饲料和医药等领域都有广泛应用。微生物发酵法是目前生产L-异亮氨酸最主要的方法，选育优良的生产菌种和优化发酵控制工艺有助于提高L-异亮氨酸的产量。该文对L-异亮氨酸的生物合成途径及代谢调控机制、L-异亮氨酸产生菌的选育现状以及发酵控制工艺进行了系统综述，为后续利用微生物发酵法生产L-异亮氨酸的生产研究提供了参考。     

Pyrococcus yayanosii L-天冬酰胺酶在枯草芽孢杆菌中分泌途径的鉴定及其分泌能力的提高

食品安全（GRAS）菌株枯草芽孢杆菌由于其具有良好的分泌表达能力及易于基因工程操作等特性被广泛用作外源蛋白质的表达菌株。枯草芽孢杆菌中蛋白质的分泌大多依赖于信号肽介导的Sec分泌途径（General secretion pathway）和Tat分泌途径（Twin-arginine translocation pathway）。在本研究中，通过信号肽预测、蛋白质N端测序等手段发现来自于Pyrococcus yayanosii L-天冬酰胺酶在枯草芽孢杆菌中的分泌并不依赖信号肽，该酶通过非经典蛋白质分泌途径（non-classical protein secretion pathway）进行分泌。通过信号肽筛选，发现最适合该酶在枯草芽孢杆菌中表达的信号肽为Tat分泌途径信号肽SP_phoD，并通过共表达分子伴侣PrsA的方式将该L-天冬酰胺酶的分泌量提高了72.11%。     

定点突变提高食品新型L-天冬酰胺酶的活力及热稳定性

L-天冬酰胺酶（L-asparaginase II，EC 3.5.1.1）可将L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸，减少高温加工食品中丙烯酰胺的形成，因而受到人们的广泛关注。该酶在食品加工及预处理阶段的使用已受到人们广泛的关注，但是由于食品加工及预处理过程中环境的复杂性，对L-天冬酰胺酶的性质、热稳定性和酶活等方面有较高的要求。通过序列对比和同源模拟对嗜热菌Pyrococcus yayanosii CH1来源的编码L-天冬酰胺酶的基因PyAsnase进行了3个位点的突变，并在Bacilus subtilis 168 中进行表达，提高了该酶的热稳定性及比酶活。其中突变株E22K较原始菌株相比所得突变体比酶活提高了约37.3%，突变株R111L较原始菌株相比所得突变体的比酶活提高了约31.1%，突变株M92A较原始突变菌株相比所得突变体在85 ℃时的半衰期延长了约30 min。本研究结果为探索L-天冬酰胺酶结构和功能的相互关系提供了借鉴，提高了其在食品工业中的应用前景。     

巯-烯光聚合制备氨基酸基光固化涂层的研究

在碱催化条件下， L-苯丙氨酸与 L-酪氨酸分别与溴丙烯反应，合成了烯丙基苯丙氨酸（AP）和烯丙基酪氨酸（ AT）光敏树脂，然后将 AP与 AT树脂分别与多官硫醇混合，通过 UV固化制备了氨基酸基光固化涂层。采用傅里变换叶红外光谱（ FT-IR）、核磁共振氢谱（ 1H NMR）表征了树脂的分子结构，利用实时红外（ ATR-FTIR）测试了树脂的巯 -烯光聚合速率，并对涂层的性能进行了测试。结果表明：光聚合速率较快，巯基转化效率与硫醇的官能度呈负相关，硫醇的官能度越大，所带来的位阻影响越大，反应效率越低； AP树脂所得涂层的玻璃化转变温度为 21~29 ℃；AT树脂所得涂层对钢板的附着力为 0级，耐冲击性较优，具有较高的透明度，玻璃化转变温度为 11~15 ℃；此外，这些涂层热失质量 10%时所对应温度均在 300 ℃左右，热稳定性较好。     

含L-精氨酸和抗氧化物质组方的毒理学安全性研究

为探究含L-精氨酸和抗氧化物质组方的毒理学安全性,该文按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)重点开展了含L-精氨酸、山楂提取物、知母提取物和虾青素组方的毒理学评价。毒理实验显示,该组方小鼠经口急性毒性试验中最大耐受剂量值(maximum tolerance dose,MTD)>20.0 g/(kg·BW),Ames试验、小鼠骨髓微核试验和小鼠精子畸形试验均未见该组方样品有致突变作用。大鼠30 d喂养试验各项指标也均未见明显毒性反应。该组方属于无毒级、无遗传毒性,不会引起突变,为其临床应用及保健食品研发提供毒理学方面的科学依据。     

白化茶树L-茶氨酸累积机理的研究进展

L-茶氨酸是茶树体内特征性非蛋白氨基酸,是影响茶叶品质的重要指标之一。L-茶氨酸具有抗疾病、保护神经和镇定安神等保健功效。大部分白化茶树拥有高含量的游离氨基酸和L-茶氨酸,引领着茶树资源的选育方向,因此研究白化茶树L-茶氨酸的高累积机理至关重要。该文主要对白化茶树L-茶氨酸的差异累积、L-茶氨酸在茶树体内的含量及分布、合成代谢途径以及影响因素等方面进行文献综述。旨在为白化茶树种质资源的选育及其L-茶氨酸的高累积机理研究提供参考,并对L-茶氨酸在保健领域的研究方向进行展望。