南美白对虾肝胰腺蛋白提取方法优化及无水保活环境胁迫对细胞凋亡蛋白的影响

为提高Western Blotting结果的可靠性，以蛋白溶出率和凝胶电泳蛋白条带完整性为指标，比较提取液种类、研磨方式、酶抑制剂种类及其体积分数和提取时间对南美白对虾肝胰腺蛋白提取效果的影响。采用优化后的提取方法获得高质量蛋白样品，并采用Western Blotting法分析无水环境胁迫后南美白对虾肝胰腺组织中细胞凋亡信号通路相关蛋白的表达水平。结果表明：RIPA裂解液作为提取溶剂所得的蛋白溶出率高于水提和磷酸盐缓冲液，电动匀浆和液氮研磨所得蛋白条带更完整，4%蛋白酶磷酸酶混合抑制剂能有效抑制肝胰腺内源酶引起的蛋白降解；采用Western Blotting法分析无水保活期间南美白对虾肝胰腺蛋白，发现低温诱导休眠的同时会引起细胞轻微凋亡，且凋亡水平呈应激时间依赖性增加，环境胁迫解除后有所回调。     

Btk/JAK3双靶点共价抑制剂的设计、合成及其活性研究

布鲁顿式酪氨酸激酶(Btk)和两面神激酶3(JAK3)均是自身免疫性疾病和血液系统恶性肿瘤的潜力靶标。以4-氯吡咯并嘧啶为原料,经7步反应合成了一系列7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺衍生物,其结构经¹HNMR、¹³CNMR和MS(ESI)分析证实。体外依次考察了所得化合物分别对Btk和JAK3激酶的活性、以及对部分B淋巴细胞瘤细胞系的抗增殖活性。结果表明,四氢吡咯烷基取代的衍生物NB1~4对Btk(IC₅₀<3 nmol/L)和JAK3(IC₅₀<165 nmol/L)均能有效抑制,其余化合物只对Btk显示抑制效果;而且NB2和NB4对所测试的多种B细胞淋巴瘤细胞系的抗增殖活性均优于阳性对照泛激酶抑制剂依鲁替尼及Btk单靶点抑制剂。其中,对Jeko-1细胞的抑制能力最佳(IC₅₀<3μmol/L),其次是OCI-LYI(IC₅₀<4μmol/L)、SUDHL-6(IC₅₀<6μmol/L)和HBL-1^*(IC₅₀<6.5μmol/L),最差为SUDHL-4细胞(IC₅₀<11μmol/L)。这些发现可为开发B细胞淋巴瘤的多靶点药物提供新的思路。     

基于视觉伺服的细胞载玻片精确点胶方法研究

目前在机械臂与点胶机协同完成细胞载玻片点胶的过程中,由于点胶路径的固定造成系统的稳定性较差,主要表现为细胞在载玻片上的粘附位置一旦出现偏移则会导致点胶失败。为了解决这一问题,我们把视觉技术引入到点胶机的点胶位置测量过程中,根据细胞载玻片样本的图像特征,运用图像处理技术实现点胶位置的识别,与原点胶路径比对得到偏差,并根据此偏差大小判断是否需要改变点胶路径,从而实现对点胶位置实时监测与校正,提高工作效率,使系统的稳定性增强。实验结果表明,点胶准确率可以提高30%左右,满足样本制作的要求。     

在线生物活细胞浓度和电导率测量系统设计

为了实时在线监测活细胞生长状态，进而给细胞培养和生物反应过程提供积极的指导，设计了活细胞浓度和电导率测量系统，由传感探头、激励信号源、调理板、采集板、上位机这五部分构成，传感探头利用四电极，将激励和检测两部分分离，大大降低了电极极化效应给测量带来的影响，激励信号源采用FPGA+DDS方案，为系统提供激励信号，调理电路采差分接收方式并利用同频解调原理解调出电压幅值信息，采集电路将调理信号进行模数转换，采用了过采样技术提高测量精度，结果上传至上位机显示处理，测试表明，测量系统可以检测的细胞介电常数测量范围达400ｐＦ/ｃｍ以上，电导率测量范围达到40ｍＳ/ｃｍ以上。     

医用敷料用柔性金属电极的制备及其细胞毒性分析

为研究用于医用敷料的柔性金属电极的制备可行性和安全性,以涤纶非织造布为基布,通过丝网印刷技术,制备以锌为负电极、银为正电极的柔性微电流生物医用敷料。探讨了电极制备过程中的分散剂种类、分散剂含量及黏合剂含量对金属电极电学性能的影响,并分析了金属电极可能引起的细胞毒性问题。实验结果表明:丝网印刷技术能在基布表面均匀地负载锌、银微纳米颗粒;1%的羧甲基纤维素钠和0.5%的吐温-80分别作为锌、银颗粒的分散剂,能使金属颗粒具有良好的分散性;5%和15%的水性丙烯酸乳液分别作为锌、银金属电极的黏合剂,可使电极具有优良的电性能;当金属质量分数为0.5%~1.0%时,金属电极表现出良好的细胞相容性,可作为生物医用敷料为伤口提供外源性微电流。     

非小细胞肺癌射频消融热点问题探讨

【摘要】 射频消融（RFA）是不能耐受外科手术的早期非小细胞肺癌（NSCLC）治疗选择之一，但是仍需要进行前瞻性随机多中心临床研究，比较其它局部治疗手段如亚肺叶切除与立体定向放射治疗（SBRT）；同时，早期肺癌RFA后局部复发率较高，需要联合其它肿瘤治疗手段如放疗、化疗和分子靶向药物治疗等提高局部控制率。
     

大豆多肽的分离纯化及其体外降血脂功能研究

通过HepG2肝癌细胞构建高胆固醇细胞模型，以大豆蛋白为对照组，分析了大豆多肽的体外降血脂活性，并通过凝胶过滤层析法和纳米技术-高效液相色谱-串联质谱（Nano-HPLC-MS/MS）技术对大豆多肽进行了初步纯化和鉴定。结果表明，大豆多肽对HepG2细胞内甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的产生具有一定的抑制作用，对HepG2细胞内高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的产生和超氧化物歧化酶（SOD）活力具有促进作用，且大豆多肽对HepG2细胞内TG、LDL-C的抑制作用及对HDL-C和SOD活力的促进作用均强于对照组，具有良好的体外降血脂活性。大豆多肽经分离纯化，最终鉴定并筛选出5个多肽，分别编号为LLDTN、FLEHAF、DFGKFF、LVGLKLY和LIDSVLDVVRK，相应的分子质量分别为574.30 Da、762.37 Da、759.36 Da、804.51 Da和1 255.75 Da。     

红藜-荞麦提取物饮品的抗糖化功效评价

红藜和荞麦都是使用历史悠久且高营养价值的药食同源植物，具有抗氧化、抗炎、抗糖化等功效。在体外培养糖化损伤细胞模型中，红藜-荞麦提取物可增加糖化损伤后细胞中胶原蛋白的含量，并可有效清除氧自由基。以红藜-荞麦提取物作为主要功效原料的果味饮品，经受试者饮用6周后，面部皮肤水分含量、皮肤光泽度、皮肤颜色L*值及b*值以及眼角皱纹深度均有明显改善。综合以上数据发现，作为一款具有改善皮肤的美容功效饮品，其主要功效原料和饮品均有较优的抗氧化、抗糖化等效果，且人体试验中未出现任何不良反应。