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目的:建立类风湿关节炎(RA)患者树突状细胞(DCs)泛素和E3连接酶荧光定量PCR检测体系,观察青藤碱对RA患者DCs泛素和E3连接酶mRNA表达的影响。方法:体外分离RA患者单核细胞,采用细胞因子刺激为DCS。提取DCS总RNA,采用特异性荧光探针标记后进行PCR反应,建立荧光定量标准曲线。采用不同浓度青藤碱干预DCs,荧光定量PCR检测干预后泛素和E3连接酶mRNA的表达。结果:不同浓度定量模板的对数值与循环数之间有非常好的相关关系,经青藤碱干预后RA患者外周血Dc中泛素(P〈0.01)和E3连接酶(P〈0.01)mRNA表达显著降低。结论:研究成功的建立了RA患者DCs泛素和E3连接酶荧光定量PCR检测体系,青藤碱可能抑制了泛素一蛋白酶体的功能,降低了NF—KB途径的磷酸化,影响了DCs的免疫功能,从而起到治疗Rh的作用。 相似文献
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