微球材料尺寸和结构控制的过程工程

微球材料的粒径均一性和结构可控性直接影响其应用效果,这对过程工程提出了挑战。在发展微孔膜乳化过程制备均一乳液和微球的基础上,对均一乳液的形成机理进行了研究,通过对液滴形成过程的控制,在油/水、水/油、水/油/水等体系成功制备出了均一微球。通过发展微球结构演变过程的定量研究方法,成功对微球结构进行了调控;针对生化工程对超大孔微球的重要需求,发展了超大孔微球制备方法,实现了孔径在100 nm到微米级的调控。研究了粒径均一性和结构对其应用效果的影响。微球应用于生物分离介质时,粒径均一性提高了蛋白质的分离度;超大孔微球可使超大生物分子快速进入介质内部,显著提高纯化回收率。微球应用于胰岛素口服药物载体时,粒径对其在消化道的分布有显著影响,中空-多孔微球显示了最佳的降血糖效果。     

醋糟酶解液的制备及其发酵生产枯草芽孢杆菌TS-02

采用水热处理技术对醋糟进行预处理,优化了醋糟的纤维素酶酶解条件,制得葡萄糖浓度27.00 g/L的醋糟酶解液.以醋糟酶解液为基础培养基替代培养基中的葡萄糖,发酵生产枯草芽孢杆菌TS-02活菌制剂.结果表明,在醋糟酶解液培养基中摇瓶发酵44 h时活菌数活菌数最高达4.64×1010个/m L,7 L发酵罐中发酵周期为22 h,活菌数达6.16×1010个/m L,芽孢率达80%以上.     

葡聚糖接枝型高载量金属螯合介质的制备与性能

对琼脂糖凝胶微球进行烯丙基活化,再接枝葡聚糖分子,考察葡聚糖分子量等因素对葡聚糖接枝过程的影响;以葡聚糖接枝琼脂糖凝胶微球为基质,制备亚氨基二乙酸型金属螯合介质,考察葡聚糖接枝过程对金属螯合介质的孔道结构、流通性能和载量等的影响.结果表明,分子量20～500 k Da的葡聚糖都能均匀分布于琼脂糖凝胶微球内,葡聚糖接枝量随分子量增加而增大,所制的金属螯合介质形貌、粒径及其分布基本不受影响,且具有更好的流通性能,孔道结构比商品介质Ni Sepharose 6FF更丰富.葡聚糖接枝的金属螯合介质对带组氨酸标签的乳酸脱氢酶和睫状神经营养因子的载量分别达到19和27 mg/m L,较Ni Sepharose 6FF的载量分别提高26.6%和42.0%.     

丙酸对费氏丙酸杆菌生长及脱氧腺苷钴胺素合成的影响

通过添加控制丙酸浓度考查了费氏丙酸杆菌发酵生产VB12的过程中丙酸抑制细胞生长的浓度范围,在此基础上利用树脂对发酵过程中丙酸进行了选择性吸附后细胞的生长和脱氧腺苷钴胺素合成的变化。研究结果表明,丙酸的浓度在10.0g/L时,对菌体细胞生长产生了明显的抑制。在丙酸浓度积累到10.0g/L之前,利用树脂对其吸附分离出2.5g/L的丙酸后,生物量提高了37.5%,脱氧腺苷钴胺素产量提高了50.0%。该实验为实现丙酸的在线分离和丙酸/VB12高效联产的新型耦合发酵工艺提供了基础。     

人民日报社报刊综合业务楼防风防坠控制技术

以人民日报社报刊综合业务楼工程为例,对异形超高层钢结构建筑施工过程中存在的诸多安全隐患进行具体分析,突出重点、难点。对安全施工作业中高空安全防护及防风控制技术的实施情况进行具体说明。结果表明,在具体实施过程中保证了主体结构施工进度和施工安全的前提下此控制技术有效地避免了事故的发生及人员伤亡。有效减少安全防护设施搭设施工时间,减少作业难度,有效地避免了因交叉作业带来的安全隐患。     

用盐析与疏水层析相偶合快速分离提纯猪胰激肽释放酶

将疏水层析技术用于从猪胰脏中分离纯化激肽释放酶，建立了一种简便、快速的分离提纯方法：将粗品溶解后经过硫酸铵沉淀处理，然后经过Butyl Sepharose FF疏水层析后得到目标蛋白，分析其纯度大于500U／mg，盐析和疏水两步纯化的收率大于85．0％，同时比较了Phenyl Sepharose FF,Octyl Sepharose FF和Butyl Sepharose FF三种疏水介质分离纯化胰K的效果，本实验工艺与传统工艺相比，具有操作简单、快速、回收率和纯化倍数高等优点，有望成为一种从动物组织中快速分离纯化药用蛋白质的有效技术平台。     

CROSS-FLOW FILTRATION OF FUNGAL SUSPENSION WITH REVERSED-FLOW CLEANING

The separation of fungal suspension Trichoderma reesei was studied by using cross-flow filtration(CFF)with re-versed-flow cleaning(RFC)technique.The advantage of this technique is demonstrated in comparison with other filtra-tion techniques.The filtration rate is influenced by different frequencies of RFC.For optimum combination of CFF andRFC,both experimental and theoretical considerations are necessary and are discussed.An expression has been derivedfor the optimum filtration time needed to maximize the flux for a given RFC period assuming that the filtration stage canbe approximated by Ruth’s equation.The practical usefulness of this calculation is demonstrated on a batch thickening op-eration.     

莽草酸发酵液的快速检测方法

建立了采用高效液相色谱法快速测定发酵液中蔗糖、莽草酸和芳香族氨基酸含量的方法,为微生物发酵生产莽草酸的工艺控制提供便捷.色谱条件为:Hypersil APS-2色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),检测波长215nm,示差检测器和紫外检测器联用,流动相为pH2.5的磷酸水溶液和乙腈(体积比20:80),柱温30℃,流速1.0mL/min,进样量10μL.在该条件下所测各物质的线性回归方程相关系数均大于0.9986,加样回收率为95%～105%,相对标准偏差均小于2.0%.     

生物3D打印蓖麻油基水性聚氨酯涂层固定化碳酸酐酶

以蓖麻油基阴离子水性聚氨酯为载体,采用生物3D打印技术制备含碳酸酐酶的生物活性聚氨酯涂层,并与传统涂覆法制备的含酶涂层进行对比。通过动态光散射、红外、扫描电镜-X射线能谱、热重、接触角等各种手段对涂层中酶与水性聚氨酯之间的相互作用进行了分析表征。结果表明,在形成生物活性涂层过程中,碳酸酐酶是通过与聚氨酯链段上阴离子基团的静电吸引被固定在聚氨酯涂层中。催化活性结果表明,与传统涂覆法相比,涂层的酶活回收率为50.51%,比传统涂覆法提高了4倍。这可能是由于生物3D打印技术制备的含酶涂层更薄、更均匀,表面更平滑。     

多肽配基亲和吸附介质的配基密度控制规律

以谷胱甘肽为配基,琼脂糖微球为骨架,探索将谷胱甘肽通过共价键偶联到琼脂糖微球骨架上,制备可以分离谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase, GST)及以其为标签的融合蛋白的亲和吸附介质.采用正交实验方法考察了谷胱甘肽加入量、偶联缓冲液的pH值和反应温度对亲和介质配基密度的影响.结果发现,该反应过程中的pH值对配基密度影响最大,其次为谷胱甘肽的加入量.用所制备的亲和吸附介质纯化GST(大鼠肝脏谷胱甘肽S转移酶),发现GST的吸附量随配基密度增加而增加,但GST活性却随配基密度的增加而下降,较好的干胶配基密度为260 μmol/g.大鼠肝匀浆液经过离子交换和亲和层析两个步骤,获得了电泳纯的GST,比活力为12.08 U/mg,总活性回收率为40%以上.