大豆胚轴中异黄酮的提取及其抗血小板聚集作用的研究

从大豆胚轴提取总糖苷后，采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷，再将其水解制备成异黄酮苷元，并研究大豆异黄酮对人血小板聚集性的影响。结果：在体外人血小板聚集实验中，大豆异黄酮苷元均抑制ADP、胶原蛋白和肾上腺素诱导的血小板聚集。提示：大豆异黄酮可能有助于防止血栓形成。     

大豆胚轴中B类、E类和DDMP大豆皂甙的分离纯化

从大豆胚轴提取总糖甙，以C18柱层析法和高效液相色谱法（HPLC）分离纯化B类皂甙Ba和Bb,E类皂甙Bd和Be,DDMP皂甙αg和βg。各单体经薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法分析其纯度，用红外光谱（IR），质谱（MS）和核磁共振（NMR）技术确定其结构。     

高效液相色谱法测定大豆胚轴中DDMP皂甙αg和βg

为检测大豆中的αg和βg含量 ,应用高效液相色谱 -差示折射法 (HPLC -dRI)测定大豆皂甙样品中DDMP皂甙αg和 βg含量 ,色谱柱为ODS -AM - 30 3柱 (YMC ,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,流动相为含 0 1%三氟乙酸的乙腈 水 (4 0 6 0 )。DDMP皂甙αg和 βg分别在 1 38～ 6 88μg和 1 6 2～ 8 12 μg范围内线性关系良好 ,平均回收率为 93 4 %和 94 2 % ,RSD为 4 0 7%和 4 2 8%。方法准确度高 ,重现性好 ,适用于大豆皂甙样品中DDMP皂甙以及其它大豆皂甙的含量测定。     

草苁蓉多糖对HepG2细胞氧化应激的抑制作用

研究草苁蓉多糖(BRPS)对过氧化氢(H_2O_2)所致HepG2细胞氧化应激的抑制作用。以HepG2细胞为研究对象,通过H_2O_2诱导细胞氧化应激损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞存活率;比色法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平;蛋白印迹法测定细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)活化水平。结果表明,BRPS在质量浓度12.5 mg/L~50 mg/L范围内对HepG2细胞存活率无显著影响,对细胞安全。而H_2O_2诱导使HepG2细胞存活率和抗氧化能力下降,细胞内ERK和JNK磷酸化水平升高。与H_2O_2模型组相比,BRPS预处理可提高细胞存活率;降低培养液中LDH、AST和ALT活性;降低细胞内MDA含量,升高细胞中SOD活性和GSH含量,降低细胞内ERK和JNK磷酸化水平。提示,BRPS对H_2O_2所致HepG2细胞氧化应激具有抑制作用,减轻其细胞损伤。     

草苁蓉提取物抑制肺癌细胞增殖分子机制的研究

草苁蓉提取物可通过促进肿瘤细胞凋亡抑制A549肺癌细胞增殖。继续探讨草苁蓉提取物(BRE)抑制肺癌细胞增殖的分子机制。采用流式细胞术检测A549细胞周期分布和细胞凋亡,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bax、Bc1-2、P53和Fas蛋白的表达,ELISA法检测sFAS蛋白的表达。结果表明,BRE改变肺癌细胞周期分布,使多数细胞阻滞于G0/G1期。同时,BRE诱导肺癌细胞凋亡,明显增加Fas表达,增加Bax表达和降低Bc1-2表达,但不改变P53表达以及sFas蛋白水平。提示,BRE抗肺癌细胞增殖作用与其改变细胞周期分布、增高Fas表达和降低Bcl-2/Bax比值而诱导肺癌细胞凋亡相关。     

揄干离褶伞菌丝体溶栓酶特性研究

探讨各种因子对榆干离褶伞溶栓酶活性的影响,观察溶栓酶对纤维蛋白及纤维蛋白原的水解特征和酰胺水解活性.实验结果表明,该酶的最适pH为6,最适温度为35℃,并对tPA底物S-2288最敏感.Mn2 和Mg2 激活酶活性,而Cu2 、EDTA对酶活有抑制作用.该酶不仅直接水解纤维蛋白,还可以水解纤维蛋白原.因此,榆干离褶伞溶栓酶很有可能成为治疗和预防血栓栓塞性疾病的新来源.     

大豆异黄酮苷元的提取及其抗血浆脂蛋白氧化作用

从大豆胚轴提取总糖苷后,采用C18反相柱层析法分离大豆异黄酮糖苷,再将其水解制备成异黄酮苷元,并对大豆异黄酮苷元的抗脂蛋白氧化作用进行了实验研究.12名健康受试者空腹食用大豆异黄酮苷元前后抽取静脉血制备血浆脂蛋白,观察血浆脂蛋白过氧化程度及氧化易感性的变化.结果表明,大豆异黄酮苷元食用后受试者血浆VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低;在体外进行氧化修饰时,LDL氧化延滞时间明显延长,LDL氧化易感性下降.大豆异黄酮苷元可增强血浆抗氧化能力,尤其增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治心血管疾病的积极作用.     

大豆异黄酮抗家兔动脉粥样硬化作用

研究大豆异黄酮(ISF)对动脉粥样硬化家兔血浆脂蛋白抗脂质过氧化作用的影响。高脂饲料喂养法建立家兔动脉粥样硬化模型,连续给药8周后,处死动物,观察主动脉壁横切面病理变化。分离血浆脂蛋白,观察各血浆脂蛋白过氧化脂质(LPO)含量及低密度脂蛋白(LDL)氧化易感性的变化。结果表明：ISF可减轻高脂饲料诱导的动脉粥样硬化家兔主动脉病理变化;显著降低家兔血浆总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-CH)水平(P＜0.05);显著降低血浆总LPO和脂蛋白LPO含量(P＜0.05);在体外进行氧化修饰时,延长LDL氧化延滞时间。提示,ISF可降低动脉粥样硬化家兔LDL胆固醇水平和脂质过氧化程度,增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治动脉粥样硬化症的积极作用。     

草苁蓉多糖对氧化损伤致血管内皮细胞凋亡相关蛋白表达的影响

该研究探讨草苁蓉多糖（Boschniakia rossica polysaccharides，BRPS）对氧化损伤致人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）凋亡相关蛋白表达的影响。以叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide，t-BHP）损伤HUVEC建立体外凋亡模型，分为正常组、t-BHP组（损伤组）、BRPS组，分别应用细胞增殖毒性检测试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）法和流式细胞术检测细胞存活率和细胞凋亡率，用Western blotting技术检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶原（pro-cysteine aspastic acid-specific protease，Procaspase）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]、Survivin、p53、核转录因子-кB（nuclear factor-кB，NF-кB）信号通路蛋白以及丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信号通路蛋白活化水平。结果显示，与正常组比较，损伤组HUVEC细胞活力降低50.6%，细胞凋亡率升高41.0%；与损伤组比较，BRPS组HUVEC细胞活力升高16.4%，细胞凋亡率降低了22.2%。此外，t-BHP降低HUVEC细胞的Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9、PARP和Survivin蛋白水平，升高Cleaved-PARP、p53、NF-κB、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（phosphorylated extracellular signalregulated kinase，p-ERK）、磷酸化 c-Jun N 末端激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase，p-JNK）、磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase，p-p38）蛋白水平。而BRPS升高Procaspase-3、Procaspase-8、Procaspase-9、PARP 和 Survivin 蛋白水平，降低 Cleaved-PARP、p53、NF-кB、p-JNK、p-p38 蛋白水平。研究结果表明，BRPS对t-BHP引起HUVEC凋亡具有抑制作用，其机制可能与JNK、p38及NF-κB调控有关。     

茶多酚对血浆脂蛋白氧化的抑制作用

14名健康受试者空腹饮用茶多酚后抽取静脉血,采用序列超速离心法分离血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL),并观察各血浆脂蛋白过氧化程度以及氧化易感性的变化。结果表明:茶多酚饮用后受试者VLDL、LDL和HDL过氧化脂质水平明显降低;在体外进行氧化修饰时,LDL氧化延滞时间明显延长,提示LDL氧化易感性下降。茶多酚可降低脂蛋白过氧化程度和增强LDL抗氧化修饰能力,因此能够起到防治心血管疾病的积极作用。