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目的:探究龟肉蛋白肽(pond turtle protein-derived peptides,PTPDP)延缓果蝇衰老的作用和机制。方法:酶解乌龟肉得到PTPDP,测定其营养成分、分子质量分布以及氨基酸组成;分别以0.2%、0.4%和0.8%的PTPDP喂养果蝇,通过生存实验和测定体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量来分析其抗衰老功能;通过测定0.8% PTPDP喂养的雌性果蝇抗氧化相关基因Sod1、Sod2、Cat和寿命相关基因mth、Rpn11的表达来探究其抗衰老机制。结果:龟肉酶解产物以1000 Da以下的小分子肽段为主,富含甘氨酸、谷氨酸和脯氨酸等具有抗氧化活性的氨基酸。生存实验和抗氧化活性实验中,0.8% PTPDP组雌雄果蝇的平均寿命分别显著延长了18.92%和9.37%(P<0.01);SOD活性分别显著提高了7.13%和7.37%(P<0.05);CAT活性分别极显著提高了42.14%和84.66%(P<0.01);MDA含量分别显著下降了22.22%和23.08%(P<0.05)。基因表达结果显示,0.8% PTPDP喂养显著上调了抗氧化相关基因Sod1,Sod2(P<0.05)和Cat(P<0.01)的表达,同时对寿命相关基因mth和Rpn11(P<0.01)的表达也表现出显著的调节作用。结论:PTPDP通过影响果蝇抗氧化和寿命相关基因的表达,提高其体内抗氧化活性,延长果蝇寿命,有潜在的抗衰老功效。 相似文献
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通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体p PIC9K中。结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/m L,对应的p NPP水解酶活达到312.72U/m L。与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/m L)相比,密码子优化后酶活提高74.29%,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达。比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适p H和温度耐受范围。另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力。 相似文献
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以棕榈硬脂为原料,以非专一性脂肪酶Novozym 435作催化剂,将棕榈酸作为酰基供体与棕榈硬脂进行酸解反应,制备Sn-2位富含棕榈酸的甘油三酯,为下一步制备母乳脂肪替代油脂提供原料。首先,通过单因素实验确定了各因素的范围,再应用Box-Behnken中心组合实验设计建立二次多项数学模型,进行响应面分析。结果表明,当棕榈酸与棕榈硬脂质量比1.09∶1,反应时间9.9h,反应温度54.7℃,加酶量21.9%时,反应所得甘油三酯中Sn-2位棕榈酸可达到60.59%,可满足下一步制备母乳脂肪替代油脂的要求。 相似文献
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响应曲面法优化母乳化结构油脂制备工艺 总被引:1,自引:0,他引:1
文中对母乳化结构油脂的制备工艺进行优化。选用Sn-2位富含棕榈酸的猪油为原料,以Sn-1,3专一性脂肪酶Lipozyme RM IM作催化剂,与游离脂肪酸进行酶促酯交换反应制备母乳化结构油脂。通过单因素试验和响应面法优化工艺参数,建立了合成产物中Sn-2棕榈酸分布与反应温度、底物比酰基供体与猪油摩尔比、反应时间、加酶量之间的二次回归模型,即Y=-2 304.15+63.75 A+129.27 B+158.19C+45.85D-0.28AB-1.21AC-0.12AD-6.02BC-0.36BD+3.62CD-0.50A2-24.64 B2-52.00C2-2.05D2。优化后的工艺条件为:反应温度60.42°C;底物酰基供体与猪油的摩尔比为2.08∶1;反应时间1.05 h,酶/底物10.15%,制得的结构油脂中棕榈酸含量为20.35%,其中71.68%位于Sn-2位,与母乳脂肪的结构基本一致。表明采用RSM优化得到的酶促酯交换工艺条件参数适合以猪油为原料,制备母乳化结构油脂,建立的模型可以进行准确可靠的预测。 相似文献
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酪蛋白酸肽(CPPs)的分子量及持钙功能的分析 总被引:14,自引:0,他引:14
实验对不同来源的酪蛋白磷酸肽(CPPs)的氮与磷的摩尔比值(N:P)、分子大小及结合钙的最大量进行了分析和测定,初步探讨了CPPs和N:P,分子大小和结合钙的能力之间的关系。N:P较小则CPPs制品的纯度较高或磷酸基密度较大,也即CPPs制品中分子量较小部分占的比例较大,结合钙的能力也较强,N:P能较客观和综合地反映CPPs的肽链长度和磷酸基密度,因而可以作为CPPs的特性指标 相似文献
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生理活性物质酪蛋白磷酸肽的功能及应用 总被引:12,自引:0,他引:12
生理活性物质酪蛋白磷酸肽的功能及应用冯凤琴,许时婴,王璋(无锡轻工大学食品科学与工程系,无锡,214036)自然界赋予很多食物以保健和治疗功能。由于我们在分子水平上对食物成分进行分析和测试的能力不断提高,因此,对食物成分的分子结构与功能的关系以及它们... 相似文献
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为建立气相色谱测定月桂酸单甘脂的方法,采用六甲基二硅胺烷(HMDS)和三甲基氯硅烷(TMCS)作为衍生化试剂,用吡啶作溶剂和催化剂将月桂酸单甘酯合成粗品中的各种组分硅烷化,用OV-17玻璃填充柱进行分离分析,并以十四酸作为内标物,用内标法进行定量。试验结果:月桂酸单甘脂的线性范围是1.11~11.11mg/mL,检出限是0.063mg/mL。此外,将气相色谱法同高碘酸氧化法进行了比较,结果表明:气相色谱法比高碘酸氧化法高效、精确。 相似文献
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米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。 相似文献
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为研究饲粮中添加单月桂酸甘油酯(glycerol monolaurate,GML)对肉鸡生长性能、消化能力及鸡肉营养品质的影响,以1日龄三黄鸡为研究对象,在饲粮中添加150 mg/kg GML饲喂49 d后分析肉鸡生长性能、肠道结构、营养成分表观代谢率及鸡肉中营养成分含量的变化。结果表明:与对照组相比,150 mg/kg GML饲喂可以显著提高肉鸡22~49 d的饲料转化率;显著提高十二指肠、空肠、回肠的肠段长度,空肠的绒毛长度和十二指肠、空肠的绒隐比(绒毛长度/隐窝深度),并显著提高肉鸡粗蛋白、铜和钙的表观代谢率;显著提高鸡肉中C18:2、C20:4、必需脂肪酸、多不饱和脂肪酸的比例,以及粗蛋白、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、鲜味氨基酸和总氨基酸的含量。总体来看,GML饲喂对提高肉鸡生长性能、消化能力和鸡肉营养品质具有积极的作用。 相似文献