不同来源氨基脲在刺参体内的富集和消除规律研究

目的分析刺参中低浓度氨基脲的残留分布特征,明确不同来源引起的低浓度氨基脲的变化趋势。方法采用超高效液相色谱-串联质谱法对不同来源氨基脲在刺参(Apostichopusjaponicus)体内的富集和消除规律进行研究。结果非呋喃西林源氨基脲, 1 d后氨基脲在刺参体壁的含量为0.57μg/kg,之后含量逐渐上升,到3d时含量度达到最大值1.00μg/kg。富集实验共持续3d,按天计算平均富集速率,分别为0.57、0.24、0.19μg/(kg·d),第140 d时体壁未检出,平均消除速率为0.0073μg/(kg·d);呋喃西林源氨基脲, 1 d后体壁的含量为0.52μg/kg,之后含量逐渐上升,到3 d时,含量达到最大1.00μg/kg。富集实验共持续3 d,按天计算平均富集速率,分别为0.52、0.26、0.22μg/(kg·d),第160 d时体壁未检出,平均消除速率为0.0064μg/(kg·d)。跟踪监测至180 d时,非呋喃西林源氨基脲和呋喃西林源氨基脲在刺参体壁内均未检出,半衰期分别为1045.7 h和1224.2 h,呋喃西林源大于非呋喃西林源。内脏的富集和消除速率相对较快,但内脏中氨基脲残留量大于体壁,所以降至未检出所需时间更长。结论在投喂过呋喃西林或暴露于一定浓度氨基脲的刺参,需经较长时间净化后才能降至未检出。     

响应面法优化刺参(Apostichopus japonicus)中金刚烷胺检测

目的利用响应面分析法优化刺参中金刚烷胺的检测。方法在单因素基础上,确定采用1%乙酸乙腈作为提取溶剂,以1%乙酸乙腈的添加量、超声时间、PSA吸附剂的添加量、C_(18)吸附剂的添加量为影响因素,以金刚烷胺的回收率为响应值,根据Box-Behnken试验设计原理对刺参中金刚烷胺提取条件进行响应面分析,优化前处理条件。结果1%乙酸乙腈为15 mL,超声提取10 min, PSA吸附剂为250 mg时刺参中金刚烷胺的回收率最大。在此优化条件下进行验证性试验,测得金刚烷胺的回收率为118%,与预测值相对误差为9.62%。实际检测刺参样品20个,2个样品检出,分别为4.3、1.6μg/kg。结论该优化前处理方法具有良好的可行性。     

海参铅同位素测定及产地溯源研究

目的 基于铅同位素实现对海参的产地溯源。。方法 海参样品经冷冻干燥、粉碎、微波消解后, 利用电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)对海参铅同位素进行测定, 对数据进行差异性分析, 结合主成分分析和判别分析, 建立锦州、烟台、霞浦三个产区底播海参的判别模型。结果 调整样品消解液中总铅含量在5-20 μg/L, 采用10 μg/L的标准溶液进行交叉测量, 可对质量歧视效应进行准确修正; 204Pb/206Pb、207Pb/206Pb和208Pb/206Pb的日内精密度为0.02%、0.02%和0.01%, 而日间精密度为0.04%、0.02%和0.01%。用此方法对生物成分分析标准物质大虾和扇贝的铅同位素进行测定, 204Pb/206Pb、207Pb/206Pb和208Pb/206Pb的相对标准偏差小于0.1%。应用此方法对取自锦州、烟台、霞浦三3个海参主产区的底播海参进行铅同位素测定, 结合主成分分析和判别分析, 实现了有效区分, 判别正确率在90.0%以上。结论 采用本方法建立的铅同位素比值测定技术可以实现海参的产地溯源。     

凝胶色谱-固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定水产品中9种三嗪类除草剂

建立了水产品中9种三嗪类除草剂的凝胶色谱 固相萃取-气相色谱-串联质谱(GPC-SPE-GC-MS/MS)分析方法。样品采用乙酸乙酯提取,凝胶渗透过滤,石墨化碳串联氨基柱净化,选择离子监测模式测定,外标法定量。结果表明：扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、扑草净在1.0~50.0 μg/L范围内线性良好,检出限均为1.0 μg/kg,在1.0~10.0 μg/kg添加水平,平均回收率为86.3%~119%,相对标准偏差为5.11%~10.1%;环草津、莠灭净、特丁净、西草净在2.0~100.0 μg/L范围内线性良好,检出限均为2.0 μg/kg,在2.0~20.0 μg/kg添加水平,平均回收率为87.6%~112%,相对标准偏差为5.27%~9.56%。该方法稳定、可靠,适用于水产品中9种三嗪类除草剂的同时测定。     

HPLC-MS/MS法分析乙酰甲喹在海参中的主要代谢物

建立了高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法分析乙酰甲喹在海参体壁中可能的代谢产物。采用沉淀法和固相萃取法（SPE）对不同种类的代谢物进行净化和浓缩。以含0.1%甲酸的乙腈和含0.1%甲酸的水为流动相,选取Acquity^TMUPLC^® BEH C18（2.1 mm×50 mm×1.7 μm）色谱柱对代谢物进行梯度洗脱,以电喷雾离子源（ESI）正离子全扫描模式进行检测。通过将样品的一级和二级子离子与标准品比对,确定乙酰甲喹在海参体壁的代谢物中含有3-甲基喹噁啉-2-羧酸（MQCA）,同时检测出3种未知代谢物D2、D3、D4,并推测了代谢物可能的裂解途径。     

超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中的己烯雌酚

建立了水产品中己烯雌酚(DES)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MSMS)检测方法。样品经乙酸乙酯提取后,经正相固相萃取小柱净化,进行UPLC-MSMS分析。当添加水平在0.1～1.0μg/kg时回收率大于75%,相对标准偏差为7.2%～9.2%。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定栉孔扇贝中6种砷形态化合物

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(highperformanceliquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry, HPLC-ICP-MS)定量测定栉孔扇贝中6种砷形态的方法。方法称取均质后的样品1.0 g置于50 mL离心管中,加入5 mmol/L(NH4)2CO3溶液20 mL,混匀,超声提取30 min,经0.45μm滤膜过滤。采用DionexIonPac AS-7(250 mm×4.0 mm, 10μm)色谱柱分离,流动相为5 mmol/L(NH4)2CO3溶液和200 mmol/L(NH4)2CO3溶液,然后ICP-MS测定栉孔扇贝中的6种砷形态。结果市售栉孔扇贝中总砷含量高,64.8%～86.0%砷元素是以无毒砷甜菜碱的形式存在,无机砷含量低于国标限量要求。在优化实验条件下,6种砷形态质量浓度在0～100μg/L范围内线性良好,检出限(3S/N)在0.0002～0.0005 mg/kg之间,定量限在0.001～0.002 mg/kg之间,加标回收率在80.0%～100.4%之间, RSD在2.02%～5.78%之间。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定栉孔扇贝中的主要砷形态化合物。     

氨基脲胁迫下刺参的组织学和酶学反应

根据急性毒性试验,推导了氨基脲在刺参中的半数致死浓度值(LC_(50)),96hLC_(50)为3.72 g/L(以盐酸氨基脲计),95%置信区间为3.43 g/L～4.02 g/L。氨基脲能对刺参呼吸树、肠道和肌肉的组织结构产生一定影响。在1/5 LC_(50)组,呼吸树病变严重,肠道组织基本解体,平滑肌病变紊乱;在1/25 LC_(50)组和1/50 LC_(50)组,呼吸树、肠道和肌肉组织均呈现病变缓慢且逐步积累的现象。刺参对氨基脲的毒性作用表现为毒物兴奋效应,抗氧化酶和神经传导关键酶活性均显示先升高后降低的趋势,即先诱导后抑制,1/5 LC_(50)组刺参中毒反应最为明显。1/25 LC_(50)组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及乙酰胆碱酯酶(ACh E)酶活性最高,其次是1/5 LC_(50)组和1/50 LC_(50)组。中浓度1/25 LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大SOD活性值分别是对照组的1.78倍、1.67倍和2.50倍。中浓度1/25LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大CAT活性是对照组的1.87倍、1.96倍和2.04倍。中浓度1/25 LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大ACh E是对照组的7.86倍、6.24倍和2.86倍。最终均趋于对照组水平,推测可能与刺参免疫疲劳有关。     

组学技术在海洋生态毒理学研究中的应用

近年来我国沿海区域的城市化和工业化推动经济高速发展，众多的重金属冶炼、加工等企业蓬勃发展，随之而来的是大量工业废水排放到海洋中，导致海洋污染问题日益加重。其中重金属由于高危性及难治理性，被认为是环境中重要的污染物之一。重金属等污染物在海洋环境中浓度累计达到一定程度后，会影响生物体的正常生长发育，进而对生物种群乃至整个生态系统的结构产生不可逆的破坏作用。随着系统生物学的不断发展，为探求重金属等对海洋生物的生态毒性效应以及生物体的响应机制提供更加有力的工具。本文主要针对重金属污染现状、毒理效应以及基因组学、转录组学、蛋白质组学及代谢组学技术在海洋生态毒理学研究中的应用进行综述，旨在为海洋重金属检测及环境风险评估提供理论参考。     

刺参(Apostichopus japonicus)中13种三嗪类除草剂残留情况及风险评估

超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)分析了刺参(Apostichopus japonicus)3种三嗪类除草剂的残留水平,并采用食品安全状态指数和危害残留物的风险系数评估了其潜在风险。在采集的57个样品中,阿特拉津、扑草净和莠灭净均有不同程度的检出,其余10种除草剂均未检出,其中检出率最高的为扑草净(77.2%),其次为阿特拉津(15.8%)和莠灭净(8.77%);最高检出浓度分别为阿特拉津(0.84μg/kg)、扑草净(54.4μg/kg)和莠灭净(0.69μg/kg)。依照所建立的方法对采集的刺参样品中三嗪类除草剂的残留量采用安全指数法进行评估,表明在所采样月份中,13种三嗪类除草剂残留对刺参安全没有影响。在所采样的6个城市中,其安全指数均小于1,说明刺参安全状态很好,除草剂对刺参安全没有影响。阿特拉津、扑草净和莠灭净的风险系数依次为0.2、0.38和0.2,均小于1.5,表明上述3种物质均为低度风险。从风险系数来看,本研究进一步确定所采样的6城市的刺参在除草剂残留方面是低风险的,是安全的。