高效液相色谱法与pH示差法测定紫荚豌豆花青素含量的比较

目的:采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HLPC)测定不同豌豆品种的花青素单体及含量,并与pH示差法测定结果进行了比较,旨在研究紫荚豌豆花青素定量分析方法的差异及其花青素的种类及功能。方法:紫荚豌豆以乙醇和盐酸作为萃取剂,采用安捷伦1260高效液相色谱仪进行测定,以10%的甲酸溶液、10%的甲酸甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,在波长520 nm的条件下检测紫荚豌豆花青素含量。pH示差法使用紫外分光光度计,在缓冲液pH值为1.0和4.5,30 ℃水浴60 min,波长为520 nm条件下测定花青素总含量。结果:利用高效液相色谱法测定紫荚豌豆的花色苷含量和种类,紫荚豌豆中含有飞燕草色素和矢车菊色素这2种花色苷,其中飞燕草色素含量显著高于矢车菊色素。利用紫外分光光度计检测总花青素,T0183的花青素含量最高。结论:相较于pH示差法测定紫荚豌豆花色苷总含量的结果,高效液相色谱法的测定含量更低,两者间的差异可能与紫荚豌豆中花色苷的种类和含量、HPLC法和pH示差法的花色苷标准品的选择以及pH示差法仪器准确度较低等相关。文章采用高效液相色谱法和pH示差法相结合的方式进行紫荚豌豆花青素定量分析,提高了花青素检测的稳定性与准确性。