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为了满足能够同时对多个靶标进行检测,克服传统多重PCR的引物间排斥、重现性差等缺点的要求,建立通用引物多重PCR新方法对番木瓜中转基因成分进行高效、快速的检测。选用三种转基因番木瓜(Event 55-1、"GM-YK"和"华农一号")和非转基因番木瓜("台农2号")的新鲜叶片为研究对象,根据三种转基因番木瓜的外源基因和内标木瓜蛋白酶基因(papain)序列,设计五种特异性引物。通过比较不加入接头的特异性引物的PCR验证结果,发现复合引物(带通用接头的引物)无论在单重PCR或者多重PCR的检测中的电泳条带均更为明亮清晰。而由灵敏度的对比,可以得出通用引物多重PCR灵敏度比普通引物的灵敏度提高了1个数量级。通用引物多重PCR新技术较普通多重PCR方法检测番木瓜中转基因成分拥有更低的检测限和灵敏度,为转基因成分的快速检测提供一种新技术。 相似文献
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教学质量是学校内在质量的重要组成部分,如何提高教学质量是学校工作的重点。教学质量的提高离不开教师的刻苦钻研,对教学内容和教学方法的不断改革,更离不开学生的积极配合。本文从教学过程中的两个基本元素教师和学生切入分析,对如何提高学校的教学质量给出了几点建议和意见。 相似文献
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目的:研究丙烯酰胺(acrylamide,AA)对体外培养的睾丸间质细胞R2C生长及孕酮合成功能的影响。方法:用浓度为0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L的AA作用于R2C细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法获得IC25、IC50及IC75的AA作用浓度。用以上3种浓度的AA处理R2C细胞24 h,观察细胞形态。AA作用于R2C细胞4 h后,通过彗星实验(Comet assay)检测细胞DNA的损伤程度;放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)测定AA处理R2C细胞4 h和24 h后的孕酮合成量。结果:AA能抑制R2C细胞活性,其IC25、IC50、IC75分别为1.140、1.925、3.250 mmol/L;3种浓度的AA能不同程度地影响R2C细胞生长形态;作用4 h对R2C细胞DNA有损伤作用;各浓度组作用24 h后均能降低R2C细胞的孕酮合成量。结论:AA能影响R2C细胞增殖及孕酮合成能力。 相似文献
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本文通过对某大学本科生《运筹学》期末考核试卷成绩进行分析,发现考核试题的题型设计基本合理、完全符合大纲要求且考查知识面较全,。从学生掌握和运用的知识角度,对教学内容和教学方法的改革给出了相应的建议。 相似文献
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采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对市售20个品牌方便面中游离态和结合态羧甲基赖氨酸(CML)含量进行了定量分析,并以体外细胞培养评价了CML的雄性生殖毒性和胚胎发育毒性。市售方便面中,游离态CML质量分数为0.39~0.80 mg/kg,结合态CML质量分数为19.42~34.99 mg/kg。CML作用于睾丸间质细胞R2C细胞24 h,浓度在1 mmol/L以下对细胞存活率没有显著抑制作用,浓度在2 mmol/L以下对孕酮分泌量没有显著的抑制作用;CML作用于胚胎干(ES)细胞D3和成纤维细胞3T3 10 d,浓度在4 mmol/L以下对3T3细胞存活率没有显著影响,浓度在0.5 mmol/L以下对D3细胞存活率没有显著影响。根据市售方便面中的CML浓度评估CML的摄入量,常规食用方便面摄入的CML不会对这几种细胞的存活率和R2C细胞的孕酮分泌量产生显著抑制作用,可认为不会产生雄性生殖和胚胎发育毒性。 相似文献
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花色苷是一种天然食用功能色素。本文从花色苷的结构特点、生理活性及作用机理等方面,综述了花色苷对慢性疾病的作用途径及分子机制,并对花色苷对心血管疾病、肿瘤、糖尿病等慢性疾病具有的营养干预作用进行了讨论,为花色苷预防疾病和营养干预机制的深入研究提供参考。 相似文献
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