氧化胁迫联合UV、DES诱变选育高产、高分子量透明质酸菌株

本实验以马疫链球菌MF003为出发菌,通过H2O2氧化胁迫培养、紫外辐照(UV)和硫酸二乙酯(DES)对菌株进行复合诱变,获得一株高产、高分子量透明质酸酶缺陷菌株ZD-25。经摇瓶发酵培养,该菌株透明质酸产量达到1.61g/L,相对分子量达到2.13×106u,分别比原始菌株提高了120.5%,57.8%。经过多次传代后,菌株透明质酸产量及相对分子量具有较高的稳定性。经5L发酵罐初步发酵,突变株ZD-25的透明质酸产量达到4.26g/L,相对分子量达到2.90×106u,分别比原始菌株提高了166.3%,93.3%。     

红景天超临界CO_2提取物抗氧化作用研究

对红景天超临界CO_2提取物抗氧化作用进行研究。采用二苯代苦味酰基自由基分析法、邻苯三酚自氧化法、过氧化氢检测法和过氧化值测定法,测定了红景天超临界CO_2提取物对二苯代苦味酰基自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力以及对油脂过氧化作用的影响。结果表明:红景天超临界CO_2提取物具有明显清除自由基的能力,对猪油,菜油有较强的抗氧化作用。     

HPLC在研究微杆菌D-97胞内酶合成海藻糖机制中的应用

微杆菌D 97胞内酶对麦芽糖的水解微弱 ,并且合成海藻糖的酶反应对磷酸盐无依赖性。采用氨基键合柱HPLC对酶作用的初始底物麦芽寡糖混合物 (Ⅰ )、酶作用 2 4h后未糖化的底物 (Ⅱ )及其糖化水解后的底物 (Ⅲ )分别进行检测对照 ,底物Ⅰ麦芽五糖占34 1 5 % ,底物Ⅱ海藻糖、三糖和五糖分别占 1 7 68%、37 63 %和 3 0 8% ,底物Ⅲ的 2种主要产物葡萄糖和海藻糖各占 77 57%、2 0 2 0 %。通过上述 3种底物二糖至六糖浓度变化的比较 ,发现 DP 值 >4的麦芽寡糖为微杆菌D - 97胞内酶合成海藻糖的较适底物 ,并推断麦芽五糖生成海藻糖的基本方式为 :麦芽五糖→麦芽三糖 +海藻糖。以麦芽五糖为底物的酶反应研究进一步证实了上述作用方式。对于筛选得到的野生菌酶 ,HPLC对照检测从 1个角度为其酶合成海藻糖基本机制研究提供 1种方法。     

生物合成天然2-苯乙醇细菌的筛选及合成途径分析

从上海国家森林公园土壤样本中筛选到1?株菌株,经过生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,该菌属肠杆菌属并命名为Enterobacter sp. MF024。Enterobacter sp. MF024全基因组测序结果表明该菌株包含从头合成途径和艾氏途径合成2-苯乙醇所有关键酶的编码基因。分别以葡萄糖、L-苯丙氨酸为底物进行生物转化实验,并以苯乙醛、苯丙酮酸等合成途径中间产物为底物进行验证,气相色谱-质谱法、红外光谱分析结果进一步说明Enterobacter sp. MF024具备两种2-苯乙醇合成途径,且该菌利用从头合成途径和艾氏途径产2-苯乙醇产量分别达到0.56、1.15 g/L。该菌株以葡萄糖为碳源生物合成2-苯乙醇极具应用前景。     

乳化剂对坎利酮增溶及生物转化的影响

探索不同乳化剂sp60、sp80、tw60、tw80及其复合乳化剂对坎利酮羟基化的影响。结果表明乳化剂对坎利酮有增溶作用,且tw80、复合乳化剂tw80—sp60对坎利酮微生物转化有促进作用。其中单组分乳化剂tw80的最佳质量分数为0．18％,转化率为90．32％;复合乳化剂tw80-sp60,最佳质量分数为0．09％,转化率为92．22％。     

微生物发酵谷氨酰胺转胺酶的超滤过程研究

将Streptoverticillium mobaraense发酵得到的谷氨酰胺转胺酶粗酶液进行凝胶层析,采用SDS-PAGE电泳得到了谷氨酰胺转胺酶的分子质量在37ku左右,pI值在8.7～9.0。对超滤过程TGase的酶活损失和超滤膜通量综合考虑,确定超滤过程温度控制在8℃左右比较适宜,在此基础上,考察了对膜通量有较大影响的酶液pH值和超滤压力等因素。实验结果表明,将料液pH调节到7.5左右,压力控制在0.20～0.25MPa比较理想。     

内酯类香料的微生物法转化制备及其调控研究进展

内酯类香料因具有典型奶香和花果香气,被广泛地应用于糖果、饮料、乳制品、烘焙等食品中。得益于近些年来消费者对于产品天然特性的喜爱,内酯类香料的微生物法转化制备备受关注。本文综述了γ-和δ-两类内酯的微生物法转化机理包括脂肪酸进入线粒体方式、β-氧化、环化过程和降解代谢途径。对目前已有的生物转化法调控方式如基于基因组学的基因调控、溶氧氧合、底物分批培养、细胞固定化、菌种诱变等进行了总结,展望了内酯类香料的调控研究方向,为更经济高效的生物法转化内酯类香料提供借鉴。     

一些蛋白质和多肽对谷氨酰胺转胺酶热稳定性的影响

谷氨酰胺转胺酶(TGase)是一种催化蛋白质分子间产生共价交联的硫醇酶类,但其热稳定性较差,通过35～60℃之间的热处理研究,发现谷朊粉、大豆多肽、乳清蛋白、酪蛋白酸钠、乳清粉和脱脂乳6种蛋白和多肽物质对TGase酶活都表现出保护作用,其中酪蛋白酸钠和乳清蛋白较为显著。采用TG/DSC分析,我们获得了上述六种蛋白物质对TGase的相变温度(Tm),相变热焓(ΔH)和失重率(LW)影响的数据,其中酪蛋白酸钠对TGase的三种热力学参数改变最大,分别为32℃,40.5J/g和-7.0%。加入0.1%～2.0%的上述6种蛋白和多肽物质对TGase的冻干过程也具有保护作用,以0.5%的谷朊粉添加效果较好。     

发酵法制备肉独活化妆品原料液的工艺

采用发酵法制备肉独活化妆品原料液,以蛇床子素含量为菌株的筛选指标,分别对发酵温度、发酵时间、碳源添加量、接种量进行单因素试验,进而用正交试验优化制备工艺,并用脂氧合酶（5-LOX）抑制率评价其抗炎活性。结果表明,鼠李糖乳杆菌为制备肉独活发酵液的适宜菌株,其优化工艺为：发酵温度37℃、发酵时间40 h、碳氮比为6∶1,葡萄糖质量浓度为8 mg/mL、接种量为体积分数0.5%,该条件下制备的肉独活原料液的蛇床子素质量浓度为79.50 mg/L,5-LOX抑制率为84.12%。     

氧化牛油Maillard反应制备牛肉香精研究

以牛油为原料经高温氧化,再用Maillard反应制备牛肉香精,考察了氧化温度、时间、空气流量与牛油氧化后的酸值、过氧化值和茴香胺值变化的关系,牛油氧化程度不同对牛内香精风味形成的影响.采用感观评价法对产品风味进行评定.实验结果表明牛油在温度120℃,时间4h和空气流量0.6 L/min条件下氧化,产生的酸值为2.05 mgKOH/g脂肪,过氧化值为128.25 meq/kg脂肪、茴香胺值42.60,该氧化牛油经Maillard反应形成香精风味最具有浓郁的牛肉香精特征.用GC/MS对Maillard产物中的挥发性物质进行分析,鉴定出12种主要风味物质.