实时LAMP法快速检测食用植物油中的转基因成分CaMV-35S

环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一项新的DNA扩增技术,近年来已被成功应用于转基因作物中外源基因的检测分析。本文针对花椰菜花叶病毒35 S启动子(CaMV-35S)设计引物以及有效提取目标DNA后,首次建立了食用植物油中CaMV-35S启动子的LAMP检测方法。通过在DNA提取过程中加入正己烷乳化和加入共沉淀剂,获得了可以进行LAMP扩增的DNA片段,采用LAMP实时浊度法和染色法对扩增产物进行比较分析。着重对FIP/BIP引物、甜菜碱和Mg2+浓度等反应参数进行了优化。结果表明,LAMP方法能够在56 min内特异性地检测到CaMV-35S启动子,检测灵敏度比常规PCR高10倍,而且不需要特别的仪器设备,扩增产物可通过观察实时浊度曲线或通过SYBR Green I染色后借助肉眼对检测结果进行判断。该方法快速高效、操作简便、灵敏度高、检测结果准确,适合食用植物油中转基因成分的快速检测。     

食用油脂鉴伪技术研究进展

近年来,地沟油事件多次引起人们对我国食品安全现状的担忧。由于缺乏有效的食用油脂中地沟油鉴别检测技术,制约着相关方面的食品安全监管和预警体系建设。由于地沟油通常是作为一种添加物掺入食用油脂中,更有甚者,地沟油渣直接冒充正常油脂流向餐桌,因此食用油脂鉴伪技术研究对地沟油的检测有较大借鉴作用。基于此,该文对近几年来食用油脂鉴伪技术研究进展进行综述。     

QuEChERS净化—气相色谱—质谱法测定食用植物油中4种合成抗氧化剂

建立了一种QuEChERS净化—气相色谱—质谱(GC-MS)快速测定7类食用植物油中4种合成抗氧化剂(BHT、BHA、TBHQ、Ionox-100)的方法。样品经乙腈超声提取后,运用QuEChERS技术净化,采用DB-35MS毛细管色谱柱(30 m×0.250 mm×0.25μm)分离,选择离子监测(SIM)模式进行测定,外标法定量。结果表明:各合成抗氧化剂在0.5~20.0μg/mL内线性关系良好,其相关系数R 2均>0.999,相对标准偏差RSD为0.4%~4.5%,检出限为0.05 mg/kg,加标回收率为84.1%~108.0%,采用质控样品进行验证,结果均为满意。该方法适用于食用植物油中抗氧化剂含量的快速筛查和测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中78种非法添加化学药物

建立了超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查减肥、抗疲劳和增强免疫力类保健食品中非法添加78种化学药物的方法。保健食品样品经甲醇溶剂提取、QuEChERS净化，试样以C18柱分离，多反应监测（MRM）模式进行定量与定性分析，采用外标法定量。采用ACQUITY UPLC HSS T3柱（2.1×100 mm，1.7 μm）进行分离，以乙腈和乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）作为流动相，进行梯度洗脱,质谱采用正离子和负离子同时扫描分析。在优化的色谱、质谱条件下，78种化学药物能够得到较好分离，在线性范围内线性关系良好，相关系数均大于0.9991，检出限（LOQ）为0.5 μg/kg~420 μg/kg。各组分在三个不同加标水平下平均回收率为59.9%~120.7%，相对标准偏差（RSD）为1.3%~16.2%。运用本方法对57批次保健食品进行快速筛查，检出41批次样品含有一种或多种非法添加药物,被检出的药物为西布曲明、苄基西布曲明、氯代西布曲明、酚酞、伪麻黄碱、麻黄碱、二甲双胍、咖啡因、茶碱、番泻苷A、番泻苷B、呋塞米、大黄素和西地那非。本方法样品处理过程简单，分析时间短，准确可靠，灵敏度高，适用于保健食品中非法添加化学药物的定性与定量检测及快速筛查。     

肉眼读取-荧光微球竞争免疫层析法半定量快速检测保健食品中的西布曲明

建立一种新型的西布曲明半定量检测方法。通过在检测试纸条上设置4?条包被有抗原的检测线,和被测抗原反应后的剩余标记抗体与包被抗原的反应浓度可梯度降低,实现在单一试纸条构建多级灵敏度的免疫反应,从而建立基于波长470?nm手电筒作为激发光源、肉眼读取结果的西布曲明荧光微球竞争免疫层析半定量检测方法。对吐温-20表面活性剂含量、标记抗体量、包被抗原质量浓度、硝酸纤维膜类型和层析反应时间等参数进行优化,通过试纸条上显色条带的数量对西布曲明进行半定量。结果显示,在优化的实验条件下,该检测方法检出限为0.05?μg/mL,检测范围为0～9.00?μg/mL。该方法无需使用专门的检测仪器,可在15?min内完成检测,其结果与液相色谱-串联质谱法检测结果一致。该方法操作简便、灵敏度高、结果可靠,可用于保健食品中西布曲明非法添加物的定性和半定量筛查分析。     

核酸适配体-纳米金可视化检测盐酸克伦特罗

建立了一种基于核酸适配体识别-纳米金显色的盐酸克伦特罗可视化检测方法。通过合成纳米金、适配体、适配体互补链以及适配体-纳米金探针和互补链-纳米金探针,利用纳米金的变色效应,构建了盐酸克伦特罗的简单、快速、高灵敏度检测方法。当待测物中含有目标物时,适配体与目标物结合,纳米金呈现游离状态,在一定的盐浓度下,纳米颗粒发生聚集,纳米金颜色发生变化;当待测物中不含目标物时,适配体与适配体互补链互补杂交,形成稳定的网络结构,溶液颜色不发生变化。分别对适配体、互补链与纳米金连接的陈化盐浓度、适配体与互补链浓度、显色体系盐浓度等参数进行了优化。在优化的条件下,盐酸克伦特罗在1～1000 ng/mL浓度范围内,呈现良好的线性关系,回归方程为y=0.023x+0.362(R2=0.991),最低检测限为1ng/m L。对猪肝实际样品的加标回收率为83.5%～101.8%。该方法简单、准确、可靠,可用于实际样品的检测分析。     

纳米金标记-银染信号放大快速检测福氏志贺氏菌

采用纳米金标记结合银染信号放大技术建立了检测福氏志贺氏菌的新方法.优化了酶标板包被亲和素使用浓度以及分子杂交和化学发光检测实验条件.结果表明,化学发光法比吸光度法检测灵敏度高15倍,通过银染信号增强后,化学发光检测目标菌DNA的检测限达2fmol/L,相对化学发光强度与目标菌DNA浓度在5～1000 fmol/L范围内...     

比色法快速测定奶粉和含乳饮料中游离L-羟脯氨酸

建立用蛋白沉淀剂沉淀蛋白质后比色法快速测定奶粉和含乳饮料中游离L-羟脯氨酸的方法。结果表明,219g/L醋酸锌和106g／L亚铁氰化钾共同沉淀蛋白质效果最佳。该方法线性范围为0．1μg／mL～1．6μg／mL,最低检出限为0．05g,kg,RSD为2．6％-4．9％,回收率为91％～96％。     

塑料食品包装中邻苯二甲酸酯类增塑剂迁移研究进展

介绍了邻苯二甲酸酯类增塑剂的毒性,综述了国内外对邻苯二甲酸酯类增塑剂迁移的研究现状及安全法律法规,总结出了塑料包装材料中增塑剂的发展趋势。     

气相色谱-质谱法同时测定腊肠中7种镇静剂类药物残留

本研究建立了同时测定腊肠中地西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、苯巴比妥、异丙嗪7种镇静剂残留的固相萃取气相色谱-质谱（GC-MS）方法。试样中的镇静剂类药物经氨化乙腈和酸化乙腈提取,用C18固相萃取柱净化,甲醇:丙酮（5: 5,V/V）洗脱,上GC-MS分析。采用毛细管色谱柱DB-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）进行分离,电子轰击电离源（EI）,在选择离子扫描（SIM）模式下测定,外标法定量（定量离子分别为256、205、259、279、313、204、72）。实验结果表明,7种镇静剂类药物在一定的含量范围内线性关系良好（分别为0.0488~0.7808 mg/L,0.1039~1.2468 mg/L,0.0971~1.4566 mg/L,0.1006~1.5090 mg/L,0.0975~1.1700 mg/L,0.0605~1.5360 mg/L,0.0454~1.0896 mg/L）,相关系数大于0.997,检出限为0.020~0.082 mg/L,回收率为63.20~88.23%,相对标准偏差（n=5）为7.02~16.89%。结果表明,该方法简便快速、灵敏可靠,适用于肉制品中多种镇静剂类药物残留的检测。