肉鸡屠宰加工过程中沙门氏菌的污染情况及其耐药性分析

目的:了解四川某肉鸡屠宰加工过程不同环节沙门氏菌的污染情况、耐药性和耐药谱,为食品安全和临床用药提供理论依据。方法:根据GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》、沙门氏菌科玛嘉显色培养基筛选疑似沙门氏菌,并针对沙门氏菌invA和hut基因的二重PCR方法对疑似沙门氏菌鉴定,再用纸片扩散法对其分离株进行10种抗菌药物(组合)的药敏实验,参考临床和实验室标准化研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)标准(2010)判定药敏结果。结果:从1 350份样品中,分离鉴定出156株沙门氏菌;肉鸡屠宰前沙门氏菌的污染率为13.53%;烫毛脱毛、开肛、净膛、冲淋4个环节鸡胴体和分割鸡肉、冷冻鸡肉沙门氏菌的污染率分别为0、7.23%、9.80%、11.54%、14.50%、9.33%。沙门氏菌分离株对萘啶酸(100.00%)和氨苄西林(85.90%)的耐药率最高,对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(44.23%)、庆大霉素(39.10%)、四环素(35.26%)的耐药率较高,对头孢曲松敏感,多重耐药率为53.85%,共有39种耐药谱,从肉鸡屠宰前到分割鸡肉沙门氏菌分离株的耐药谱型先下降再上升。结论:四川某肉鸡屠宰生产链中沙门氏菌的污染率及其耐药情况比较严重,且可能存在从上游向下游生产链传播的情况,需要加强卫生和抗菌药物使用监督。     

鸡枞菌ITS区克隆、测序及其系统发育关系

采集鸡枞菌(Termitomyces)子实体,对其进行rDNA-ITS区序列聚合酶链式反应扩增测序,利用MEGA5对rDNA-ITS不同区域作序列分析,并构建鸡枞菌转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)系统发育树。结果表明:在10种鸡枞菌中,测序结果表明鸡枞菌rDNA-ITS区长度在527~661bp。系统发育树表明,10种鸡枞菌中,有8种鸡枞菌各为一支,尖盾鸡枞菌与球盖白蚁伞聚为一支;待定种A1、E1、H1独为一支,可能为新种;B1、G1、D1可能为谷堆鸡枞菌;I1可能为根白蚁伞;ZZ1可能为粗柄鸡枞菌;待定种C1不能明确。结果证明,ITS1及ITS1-5.8S rDNA-ITS2可用于鸡枞菌进行种间系统发育树的建立,但ITS1区构建的鸡枞菌种间系统发育树支持率最高,ITS2区可辅助进行某些待定种的鉴定。     

植酸酶毕赤酵母工程菌发酵条件优化研究

以工程菌PP-MS-NPm-4-16为发酵菌株,探讨其在5 L发酵罐上发酵产植酸酶的条件,从而为植酸酶规模化生产提供理论依据.对发酵过程中的补料方式、甲醇流速、甘油流速及诱导时间进行了分析.通过正交试验筛选出工程菌产植酸酶的最佳发酵条件.在温度28℃、搅拌速度750r/min条件下,接种量10%,恒溶氧补料,甲醇流速8 mL/(L·h),诱导阶段甘油流速1 mL/(L·h),诱导时间84 h,酶活可以达到472.933 kU/mL发酵液.     

四川省猪肉源大肠杆菌和沙门氏菌的分离与耐药性分析

采集四川省鲜猪肉126份,选择性培养基分离大肠杆菌、沙门氏菌,划线纯化后,通过形态特性及16SrDNA序列对菌株进行鉴定,利用K-B法(CLSI)药敏试验检测大肠杆菌和沙门氏菌对17种抗生素的耐药性。结果表明:共获得大肠杆菌105株,沙门氏菌18株,检出率分别为83.33%和14.28%。大肠杆菌对各种抗生素的耐药率在0%～55.3%,对四环素、氨苄西林耐药率最高,分别为55.3%、52.3%,对其他抗菌药物的耐药率依次为卡那霉素(26.7%)>链霉素(19.1%)>环丙沙星(17.1%)>诺氟沙星(14.3%)>头孢噻吩(11.5%)>氨苄西林/舒巴坦(4.8%)>头孢曲松、头孢噻肟、氨曲南、庆大霉素(2.9%)>头孢他啶(1.9%)>阿莫西林/克拉维酸(0.8%)>丁胺卡那霉素(0.1%)>亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦(0%),共产生28种耐药谱,氨苄西林、四环素及氨苄西林/四环素谱型占优势。沙门氏菌对各种抗生素的耐药率在0%～55.5%,其中对四环素、氨苄西林、链霉素的耐药率最高,依次是55.5%、38.9%、27.8%,对其他抗菌药物的耐药率依次是:氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸(11.1%)>头孢噻肟、卡那霉素、头孢噻吩、庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星(5.6%)>头孢曲松、头孢他啶、亚胺培南、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、丁胺卡那霉素(0%),共产生13种耐药谱。四川省肉源大肠杆菌、沙门氏菌对各类抗生素已表现出一定的耐药性,虽耐药率相对较低,但多重耐药已经成为普遍现象,应引起足够重视,并加强对其监测。     

都市农业背景下的成都市农产品质量安全调查研究

目的了解成都市当前的都市农业发展情况,探究都市农业中农产品存在的质量安全问题,加强成都市居民对都市农业的认识。方法以成都市5大城区的居民作为调查研究对象,采用问卷调查法结合访谈对居民对都市农业的了解程度、参与情况、农产品质量安全问题进行调查。结果大多数居民对都市农业并不了解,也未参与过与都市农业有关的一些农业活动,他们获得农产品的第一渠道仍然是农贸市场,对社区支援农业、阳台农业和互联网农业这3种都市农业模式的接受度并不是很高。而且,社区支援农业存在农户与消费者的信任问题;阳台农业存在规模小、气候恶劣的问题;互联网农业存在流通运输、平台虚拟的问题。结论成都市的都市农业发展水平有待提高,需加大新模式引进力度,而且都市农业中确实存在着不少的安全问题。     

屠宰过程中猪胴体表面及环境的细菌菌相分析

应用传统培养方法结合高通量测序技术分析屠宰分割过程中猪胴体表面微生物污染情况，并对屠宰车间刀具和分割车间接触面进行细菌菌落计数，以确定屠宰分割过程中的关键污染环节。结果表明：测序共得到881 458 个有效序列，864 个可操作分类单元，样品共注释到了22 门、33 纲、79 目、162 科、382 属和613 种的微生物信息。变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidota）和厚壁菌门（Firmicutes）为优势菌门，不动杆菌属（Acinetobacter）和气单胞菌属（Aeromonas）为主要的优势菌属。屠宰分割过程中群落多样性的排序为放血＞脱毛＞分割＞开膛＞冲淋＞冷却，冷却环节胴体表面的微生物多样性最低，分割后有所增加，表明分割是关键污染环节。传统微生物计数与测序的结果一致，从脱毛到冷却环节，猪胴体表面各类微生物数量呈下降趋势，分割后显著上升；分割车间各接触面菌落总数平均为6.11（lg（CFU/cm2）），高于屠宰车间刀具（平均为4.86（lg（CFU/cm2））），表明分割车间各接触面是关键污染源，进一步证明猪胴体分割环节为关键污染环节。     

鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药性研究

目的检测302株食品源、动物源和人源鼠伤寒沙门菌(Salmonella enterica Typhimurium)对抗生素和消毒剂的耐药表型,测定消毒剂耐药基因型,并分析鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药的相关性。方法纸片扩散法测定鼠伤寒沙门菌对16种抗生素的耐药性,微量肉汤稀释法测定4种消毒剂的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentrations, MICs),聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)检测消毒剂的耐药基因。结果鼠伤寒沙门菌分离株中96.03%(290/302)至少对一种抗生素有耐药性,79.80%(241/302)是多重耐药(multidrug resistant, MDR)菌株。分离株对链霉素的耐药率最高(78.81%,238/302),其次是磺胺复合物(78.15%,236/302)、四环素(75.50%,228/302)、氨苄青霉素(71.85%,217/302),所有分离株均对头孢吡肟和亚胺培南敏感。食品源鼠伤寒沙门菌对磺胺复合物、四环素、氨苄西林、萘啶酸和庆大霉素的耐药率均高于动物源和人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P0.05);动物源鼠伤寒沙门菌对环丙沙星和氧氟沙星的耐药率高于食品源和人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P0.05);人源鼠伤寒沙门菌对头孢噻肟和头孢他啶的耐药率高于食品源和动物源分离株。消毒剂苯扎氯铵、三氯生、三氯异氰尿酸和聚维酮碘对鼠伤寒沙门菌分离株的MICs范围分别为2～64、0.031 25～1、32～1 024和256～1 024 mg/L。食品源与动物源鼠伤寒沙门菌对苯扎氯铵、三氯生和聚维酮碘的耐药率高于人源鼠伤寒沙门菌,差异有统计学意义(P0.05)。分离株中消毒剂耐药基因qacEΔ1、sugE(p)和qacE检出率分别为56.95%(172/302)、20.53%(62/302)和2.65%(8/302),qacEΔ1基因与鼠伤寒沙门菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、氯霉素类和喹诺酮类的耐药性显著相关(P0.01)。结论鼠伤寒沙门菌对抗生素耐药普遍,多重耐药率较高,并表现对消毒剂的耐药,鼠伤寒沙门菌对抗生素和消毒剂耐药存在相关性。     

季铵盐类消毒剂及大肠杆菌对其耐药性研究进展

研究表明,食源性细菌消毒剂耐药严重,大肠杆菌是食品污染状况及耐药性监测的指示菌,对季铵盐类消毒剂表现出比革兰氏阳性菌更强的抗性,且大肠杆菌对消毒剂与抗生素耐药性可共传播。鉴于此,本文综述了季铵盐类消毒剂的结构与种类、作用机制、大肠杆菌消毒剂耐药产生、耐药基因、基因型与表型的关系以及与抗生素耐药共传播机制等的研究进展。食源性大肠杆菌对季铵盐类消毒剂抗性的耐药机制研究很少,研究大肠杆菌对季铵盐类消毒剂耐药性,可为消毒剂的规范使用以及食源性大肠杆菌的防控提供科学依据及理论基础。     

四川省鸡枞菌氨基酸组成及硒元素含量分析

采集获得四川省内10种鸡枞菌,利用全自动氨基酸分析仪测定其氨基酸组成及含量,利用原子荧光光度仪分析其硒元素含量,并利用统计学方法进行分析。结果表明:鸡枞菌子实体氨基酸含量高,总氨基酸为15.92%～28.86%,必需氨基酸含量分别为7.08%～10.20%,普通鸡枞、裂纹鸡枞、乌黑鸡枞、谷堆鸡枞、粗柄鸡枞及小鸡枞的氨基酸含量均超过20%,其中谷堆鸡枞总氨基酸及必需氨基酸分别达到28.86%、10.20%。鸡枞菌中硒含量亦较高,为长根菇的3～18倍,其中乌黑鸡枞含量达到(1.2286±0.0340)μg/g。可见四川省鸡枞菌氨基酸种类、硒含量丰富,营养价值高。     

热水结合乳酸喷淋处理对屠宰生产链中肉鸡胴体微生物、理化及感官指标的影响

以某肉鸡加工厂屠宰生产链的肉鸡胴体作为试材,采用热水(50℃)结合乳酸(1.5%)喷淋(15s)的减菌方法对其进行喷淋处理,采集处理前后的肉鸡胴体表面样品或产品进行微生物、理化及感官指标的测定。减菌处理后肉鸡胴体表面菌落总数、大肠菌群及肠球菌的数量在不同的加工环节均有一定程度的降低;鸡肉产品金黄色葡萄球菌检出率(从37.5%降至9.76%)和沙门氏菌(从12.75%降至1.22%)检出率明显降低;在两个月贮藏期内,处理前后鸡肉的p H、挥发性盐基氮及解冻后失水率无明显变化;处理前后鸡肉产品的组织状态、色泽无明显差异,且处理组鲜味更浓,加热煮沸后肉汤较对照组澄清。采用热水(50℃)结合乳酸(1.5%)喷淋(15s)的减菌方法处理肉鸡胴体能有效降低微生物污染数量,且处理前后胴体分割后速冻产品的部分理化指标、感官指标无明显变化。